Protein C activation peptide inhibits the expression of ICAM-1, VCAM-1, and interleukin-8 induced by TNF-a in human dermal microvascular endothelial cells

Activated protein C (APC) is generated from the cleavage of protein C by thrombin coupled to thrombomodulinand, subsequently, is released as protein C activation peptide (papC). The aim of this study was toevaluate the effect of papC on human dermal microvascular endothelial cells (HMEC-1), activated with 5 ng//mL TNF-a. Flow cytometry showed that papC inhibited the expression of VCAM-1 and ICAM-1, after activationwith TNF-a. Similarly, RT-PCR analysis revealed that 2 and 4 pM papC inhibited the expression of VCAM-1and IL-8 mRNA in TNF-a-treated HMEC-1. In addition, the expression of endothelial nitric oxide synthase(eNOS) increased in HMEC-1 treated with papC, compared to those without treatment. Furthermore, Jurkatcell adhesion to HMEC-1 induced by TNF-a was significantly inhibited after the addition of papC, compared toHMEC-1 without papC (p = 0.03). Finally, a control peptide analog to papC showed no effect on the expressionof ICAM and VCAM on the surface of HMEC-1. In conclusion, our results suggest that papC exerts antiinflammatoryeffects on endothelial cells.Activated protein C (APC) is generated from the cleavage of protein C by thrombin coupled to thrombomodulinand, subsequently, is released as protein C activation peptide (papC). The aim of this study was toevaluate the effect of papC on human dermal microvascular endothelial cells (HMEC-1), activated with 5 ng//mL TNF-a. Flow cytometry showed that papC inhibited the expression of VCAM-1 and ICAM-1, after activationwith TNF-a. Similarly, RT-PCR analysis revealed that 2 and 4 pM papC inhibited the expression of VCAM-1and IL-8 mRNA in TNF-a-treated HMEC-1. In addition, the expression of endothelial nitric oxide synthase(eNOS) increased in HMEC-1 treated with papC, compared to those without treatment. Furthermore, Jurkatcell adhesion to HMEC-1 induced by TNF-a was significantly inhibited after the addition of papC, compared toHMEC-1 without papC (p = 0.03). Finally, a control peptide analog to papC showed no effect on the expressionof ICAM and VCAM on the surface of HMEC-1. In conclusion, our results suggest that papC exerts antiinflammatoryeffects on endothelial cells

Evaluación del crecimiento radial de Lactarius volemus en medio semisólido

Objetivo. Evaluar el crecimiento radial de Lactarius volemus en cinco medios de cultivo semisólidos in vitro. Materiales y métodos. Cuerpos fructíferos de L. volemus provenientes de la Sierra Norte del estado de Oaxaca, México, se cultivaron en laboratorio en medios Agar Papa Dextrosa, Agar Czapek-Dox, Agar Extracto de Malta, Agar Papa Sacarosa y Agar Dextrosa Saboraud; mediante dos técnicas de sembrado. Se evaluaron las características morfológicas de colonias obtenidas de distintas muestras del cuerpo fructífero, así como el crecimiento radial de cada una. Resultados. El crecimiento colonial evaluado permitió seleccionar un medio que reúne las condiciones óptimas para el cultivo de Lactarius volemus in vitro. No todas las muestras utilizadas desarrollan un crecimiento abundante: la muestra proveniente del látex presenta un crecimiento escaso. Conclusiones. Con la evaluación del crecimiento radial de Lactarius volemus se obtiene una referencia directa del ciclo de crecimiento de esta especie; es posible identificar las fases exponencial y estacionaria pero las condiciones del medio no permiten evaluar la fase de muerte debido a la deshidratación y reducción del agar

Cuantificación de la actividad específica de lectina en teosinte Zea diploperennis

Objetivo. Evaluar la actividad específica de lectina en teosinte Zea diploperennis sano e infectado con Ustilago maydis. Materiales y métodos-. Plántulas de Zea diploperennis de 6 días de crecimiento fueron inoculadas con Ustilago maydis. Se evaluó la concentración de proteínas totales y la actividad hemaglutinante de extractos crudos de teosinte sano e infectado en placas de microtitulación con eritrocitos tipo O al 3% siguiendo la técnica de diluciones dobles seriadas durante 6 días. Resultados. La concentración de proteínas totales se incrementa en coleoptilo sano durante cada día de su crecimiento. No así en teosinte infectado donde la curva presenta una tendencia a la baja desde el momento de la inoculación. La actividad específica de lectina disminuye en ambos casos desde el primer día de cuantificación. Conclusiones. La evidente reducción en la actividad de lectina en teosinte infectado en comparación con teosinte sano podría explicar la susceptibilidad de este teosinte a dicho fitopatógeno. Si bien, la participación de las lectinas de teosinte y maíz en el mecanismo de defensa a Ustilago maydis todavía no ha sido esclarecida, los resultados obtenidos contribuyen a la comprensión del efecto que puede tener la concentración de lectina y proteína sobre la resistencia en teosinte

Inducción de infección en Teosinte (Zea diploperennis) con el fitopatógeno Ustilago maydis

Introduction: The corn and teosinte share morphological and molecular similarities latter being those that support the theory of teosinte (Zea parviglumis) as its predecessor, both species are attacked by specific pathogens like Ustilago maydis. Objective: To analyze the infectious process that presents U. maydis on the variety of the teosinte Zea diploperennis. Materials and Methods: We used the strain of U. maydis FB-D12, which was kept a culture media rich in nutrients (CPES) pH 7.0. Viable cells without morphological alterations to the inoculation method of puncture in teosinte seedlings were used. Monitoring of infection was carried out every 24 hours by measuring concentration of chlorophyll and plant tissue through microscopic observation Results: In the seedlings of Zea diploperennis inoculated with U. maydis the symptoms of the infection were presented, wilt and chlorosis in the leaves; The chlorosis was confirmed with the low concentration of chlorophyll 12 days later to the inoculation. In the microscopic observation of cuts of the tissue plant was found mycelium long and branched from the third day of the inoculation, until the appearance of tumors in seedlings of 45 days. Conclusions: The typical signs of infection with Ustilago maydis in the variety of teosinte Zea diploperennis do not differ from those reported for corn. Ustilago maydis presents its full life cycle within the plant, confirming that the diploperennis variety is susceptible.Introducción: El maíz y teosinte comparten similitudes morfológicas y moleculares siendo estas últimas las que sustentan la teoría del teosinte (Zea parviglumis) como su antecesor, ambas especies son atacadas por fitopatógenos específicos, como Ustilago maydis. Objetivo: Analizar el proceso infeccioso que presenta U. maydis sobre el teosinte variedad Zea diploperennis. Materiales y Métodos: Se utilizó la cepa de U. maydis FB-D12, la cual se mantuvo en medio de cultivo rico en nutrientes (CPES) pH 7.0. Se emplearon células viables y sin alteraciones morfológicas para la inoculación por el método de punción en las plántulas de teosinte. El seguimiento de la infección se realizó cada 24 horas midiendo concentración de clorofila y observación microscópica del tejido vegetal. Resultados: En las plántulas de Zea diploperennis inoculadas con U. maydis se presentaron los síntomas de la infección, marchitamiento y clorosis en las hojas; esto se confirmó con la baja concentración de clorofila 12 días posteriores a la inoculación. En la observación microscópica de cortes del tejido vegetal se encontró micelio largo y ramificado a partir del tercer día de la inoculación, hasta la aparición de tumores en plántulas de 45 días. Conclusiones: Los signos característicos de la infección con Ustilago maydis en la variedad de teosinte Zea diploperennis no difieren de los reportados para el maíz. U. maydis presenta su ciclo de vida completo dentro de la planta confirmando que la variedad diploperennis es susceptible

Evaluación del crecimiento radial de Lactarius volemus en medio semisólido

Objective. To evaluate the radial growth of Lactarius volemus in five semi-solid culture media in vitro. Materials and methods. Fruitful bodies of L. volemus from the Sierra Norte of the state of Oaxaca, Mexico, were cultured in the laboratory in Potato Dextrose Agar Papa, Czapek-Dox Agar, Malt Extract Agar, Potato Sucrose Agar and Dextrose Saboraud Agar; using two seeding techniques. The morphological characteristics of colonies obtained from different samples of the fruiting body were evaluated, as well as the radial growth of each one. Results. The evaluated colonial growth allowed to select a culture medium that meets the optimal conditions for the cultivation of Lactarius volemus in vitro. Not all samples used develop abundant growth: the sample from latex shows little growth. Conclusions. With the evaluation of the radial growth of Lactarius volemus a direct reference to the growth cycle of this species is obtained; it is possible to identify the exponential and stationary phases but the conditions of the medium do not allow evaluating the phase of death due to dehydration and reduction of the agar.  Objetivo. Evaluar el crecimiento radial de Lactarius volemus en cinco medios de cultivo semisólidos in vitro. Materiales y métodos. Cuerpos fructíferos de L. volemus provenientes de la Sierra Norte del estado de Oaxaca, México, se cultivaron en laboratorio en medios Agar Papa Dextrosa, Agar Czapek-Dox, Agar Extracto de Malta, Agar Papa Sacarosa y Agar Dextrosa Saboraud; mediante dos técnicas de sembrado. Se evaluaron las características morfológicas de colonias obtenidas de distintas muestras del cuerpo fructífero, así como el crecimiento radial de cada una. Resultados. El crecimiento colonial evaluado permitió seleccionar un medio que reúne las condiciones óptimas para el cultivo de Lactarius volemus in vitro. No todas las muestras utilizadas desarrollan un crecimiento abundante: la muestra proveniente del látex presenta un crecimiento escaso. Conclusiones. Con la evaluación del crecimiento radial de Lactarius volemus se obtiene una referencia directa del ciclo de crecimiento de esta especie; es posible identificar las fases exponencial y estacionaria pero las condiciones del medio no permiten evaluar la fase de muerte debido a la deshidratación y reducción del agar.

EFECTO DE EXTRACTOS CRUDOS DE AJO (Allium sativum) SOBRE EL DESARROLLO DE Aspergillus parasiticus Y Aspergillus niger in vitro.

Aspergillus parasiticus y A. niger son dos hongos productores de micotoxinas; aflatoxinas y ocratoxinas respectivamente. Estas toxinas son causantes de enfermedades en seres humanos y animales, además de generar cuantiosas pérdidas económicas al contaminar cultivos de cereales, algodón, frutas secas entre otros. Como una alternativa para controlar el desarrollo de estos hongos, el objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de extractos crudos de ajo sobre el desarrollo de Aspergillus parasiticus y A. niger.El extracto crudo de ajo (ECA) se preparó por maceración utilizando PBS pH 7.2 como solvente. Se evaluó su efecto sobre el desarrollo de los hongos mediante halos de inhibición, punción, unidades formadoras de colonias (UFC), determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) y de la concentración fungicida. Se observó la interacción del extracto crudo de ajo con los hongos mediante microscopia de luz visible.El extracto crudo de ajo indujo halos de inhibición de 12 mm para A. parasiticus y de 15.5 mm para A. niger, e inhibió su crecimiento en un 13 y 46.8% respectivamente. La CMI para A. parasiticus se encontró en la dilución 1:2 (50 μl de extracto crudo) y para A. niger en la dilución 1:32 (3.12 μl de extracto crudo), y las concentraciones fungicidas se observaron en la dilución 1:2 (50 µl de extracto crudo) y 1:16 (6.25 µl de extracto crudo), respectivamente. Además, inhibió la producción de micelio y esporulación de los dos hongos.El extracto crudo de ajo presentó actividad antifúngica frente a A. parasiticus y A. niger. Es necesario identificar el principio activo del ajo al que se le atribuye dicho efecto

Cuantificación de la actividad específica de lectina en teosinte Zea diploperennis

Objective. To evaluate the specific activity of lectin in healthy and infected teosinte Zea diploperennis with Ustilago maydis. Materials and methods. Zea diploperennis seedlings of 6 days of growth were inoculated with Ustilago maydis. Total protein concentration and hemagglutinating activity of crude extracts of healthy and infected teosinte were evaluated in microtiter plates with 3% type O red cells following the technique of serial double dilutions for 6 days. Results. The concentration of total proteins increases in healthy coleoptile during each day of its growth. Not so in infected teosinte where the curve shows a downward trend from the moment of inoculation. The specific lectin activity decreases in both cases from the first day of quantification. Conclusions. The evident reduction in lectin activity in infected teosinte compared to healthy teosinte could explain the susceptibility of this teosinte to said phytopathogen. Although the participation of the teosinte and corn lectins in the defense mechanism against Ustilago maydis has not yet been clarified, the results obtained contribute to the understanding of the effect that the concentration of lectin and protein can have on resistance in teosinte.  Objetivo. Evaluar la actividad específica de lectina en teosinte Zea diploperennis sano e infectado con Ustilago maydis. Materiales y métodos-. Plántulas de Zea diploperennis de 6 días de crecimiento fueron inoculadas con Ustilago maydis. Se evaluó la concentración de proteínas totales y la actividad hemaglutinante de extractos crudos de teosinte sano e infectado en placas de microtitulación con eritrocitos tipo O al 3% siguiendo la técnica de diluciones dobles seriadas durante 6 días. Resultados. La concentración de proteínas totales se incrementa en coleoptilo sano durante cada día de su crecimiento. No así en teosinte infectado donde la curva presenta una tendencia a la baja desde el momento de la inoculación. La actividad específica de lectina disminuye en ambos casos desde el primer día de cuantificación. Conclusiones. La evidente reducción en la actividad de lectina en teosinte infectado en comparación con teosinte sano podría explicar la susceptibilidad de este teosinte a dicho fitopatógeno. Si bien, la participación de las lectinas de teosinte y maíz en el mecanismo de defensa a Ustilago maydis todavía no ha sido esclarecida, los resultados obtenidos contribuyen a la comprensión del efecto que puede tener la concentración de lectina y proteína sobre la resistencia en teosinte.

Induction of infection in Teosinte (Zea diploperennis) through the phytopathogen Ustilago maydis.

Introduction: The corn and teosinte share morphological and molecular similarities latter being those that support the theory of teosinte (Zea parviglumis) as its predecessor, both species are attacked by specific pathogens like Ustilago maydis. Objective: To analyze the infectious process that presents U. maydis on the variety of the teosinte Zea diploperennis. Materials and Methods: We used the strain of U. maydis FB-D12, which was kept a culture media rich in nutrients (CPES) pH 7.0. Viable cells without morphological alterations to the inoculation method of puncture in teosinte seedlings were used. Monitoring of infection was carried out every 24 hours by measuring concentration of chlorophyll and plant tissue through microscopic observation Results: In the seedlings of Zea diploperennis inoculated with U. maydis the symptoms of the infection were presented, wilt and chlorosis in the leaves; The chlorosis was confirmed with the low concentration of chlorophyll 12 days later to the inoculation. In the microscopic observation of cuts of the tissue plant was found mycelium long and branched from the third day of the inoculation, until the appearance of tumors in seedlings of 45 days. Conclusions: The typical signs of infection with Ustilago maydis in the variety of teosinte Zea diploperennis do not differ from those reported for corn. Ustilago maydis presents its full life cycle within the plant, confirming that the diploperennis variety is susceptible