Effect of the venom of Bothrops diporus on the expression of Laminine 5 in equine foot biopsies

El objetivo del presente trabajo fue estudiar la expresión de laminina 5 en cortes de biopsias de pie equino precultivados con veneno de serpiente Bothrops diporus por histopatología e inmunohistoquímica contra controles no tratados. Las membranas basales de las láminas de las biopsias, así como las de las arteriolas y venas interlamelares evidenciaron intensa inmunomarcación de laminina 5 (L-5) en los cultivos controles; sin embargo, fue significativamente menor en las biopsias precultivadas con el veneno de B. diporus concomitantemente con la disrupción de la histoarquitectura típica de las laminillas. Estos resultados describen por primera vez la normo-localización de L-5 en biopsias de pie equino y el efecto de las metaloproteinasas, componentes de los venenos de B. diporus, tanto en la integridad lamelar como en los componentes de la vascularización.The aim of the present study was to study the expression of laminin 5 in equine foot biopsies precultured with venom of Bothrops diporus by histopathology and immunohistochemistry against untreated controls. The basal membranes of the laminae of the biopsies, as well as those of the interlamellar arterioles and veins, showed intense immunostaining of laminin 5 (L-5) in the control cultures; however, it was significantly lower in pre-cultured biopsies with the B. diporus venom concomitantly with the disruption of the typical laminar plate histoarchitecture. These results describe for the first time the normo-localization of L-5 in equine foot biopsies and the effect of the metalloproteinases, components of B. diporus venoms, both in the lamellar integrity and in the components of the vascularization

Effect of venom of Bothrops diporus from northeast Argentina on hemostatic system in different mammals

Fil: Maruñak, S. L. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Nuñez, Sandra. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Fernandez, C. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Leiva, Laura Cristina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina.Fil: Acosta, Ofelia Cristina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Los venenos de serpientes inducen gran variedad de efectos sobre la coagulación sanguínea debido a sus componentes coagulantes y anticoagulantes. En este trabajo se estudió el efecto del veneno de Bothrops diporus de Argentina sobre el sistema hemostático en diferentes especies de mamíferos, determinándose las actividades coagulante, fibrinolítica y letal. Se pudo comprobar que el veneno de esta serpiente genera desórdenes de la coagulación sanguínea atribuibles a enzimas de tipo trombinas que inducen la transformación del fibrinógeno a fibrina, registrándose mayor susceptibilidad en las especies ovina y humana. La dosis coagulante mínima se comparó con venenos de víboras centroamericanas, surgiendo que las serpientes de zonas más cálidas poseen menor actividad coagulante.Snake venoms induce a wide variety of disorders, some of them on blood coagulation, since they contain both coagulant and anticoagulant components. In this assay we present the effects of venom of Bothrops diporus from Argentina on the hemostatic system of different mammal species, in order to estimate blood–clotting, fibrinolytic, and lethal activities. From our results, it can be stated that this venom has trombin– like enzymes that produced coagulation of plasma, being ovine and human the most sensitive species. Minimum coagulant dose for this venom was compared to those from Central America (Bothrops asper, Costa Rica), suggesting that venom of snakes from warmer areas have less coagulant activity

Seroprevalence of trypanosoma cruzi in dogs from suburbia neighborhoods of Corrientes, Argentina

Fil: Ulon, Sara Noemí. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Zorzo, Liliana. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Muzzio, N. M. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Ríos Machuca, Liliana Mariel. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Maruñak, S. L. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.La importancia de los perros como reservorio en el ciclo doméstico de Trypanosoma cruzi, agente de la enfermedad de Chagas, se ha visto reforzada por las altas prevalencias halladas en caninos de barrios periféricos, lo cual junto a la precariedad de viviendas, patios y su entorno, contribuyen a la presencia endémica de la enfermedad. Se consideró el grado de infección canina a T. cruzi y su asociación con factores de riesgo, utilizándose como indicador epidemiológico el porcentaje de animales infectados en el barrio Bañado Norte de la ciudad de Corrientes, dimensionándose los factores de riesgo surgidos de las características de las viviendas. La muestra estuvo conformada por 122 caninos, de los cuales el 58% pertenecían a viviendas tipo A (paredes de madera, piso de tierra) y el 42% a tipo B (ladrillos y cemento, respectivamente). La prevalencia total fue de 54%, es decir que resultaron positivos 66 sueros, de los cuales 41 pertenecían a caninos que habitaban casas tipo A y los 25 restantes a casas tipo B. Si bien la prevalencia hallada fue alta, para poder inferir la situación existente a nivel poblacional se debería aumentar el tamaño muestral. El valor de 1,41 del riesgo relativo calculado para asociar la presencia de infección con el tipo de vivienda, podría interpretarse como que los caninos procedentes de viviendas tipo A tienen mayor probabilidad de adquirir la infección, aunque el análisis estadístico no arrojó evidencias significativas para afirmar tal asociaciónStudies in canine populations have demonstrated a high prevalence of dogs infected with Trypanosoma cruzi, the infectious agent of Chagas’s disease, and their importance as a reservoir in the domestic cycle of the parasite. The presence of infected canines in the neighbourhoods, associated with the precarious characteristics of the houses, their gardens and surroundings, contribute to the endemic presence of the disease. The degree of canine T. cruzi infection and its association with risk factors was considered, using the percentage of infected animals in peripheral neighbourhoods as an epidemiological indicator. Areas of the city of Corrientes under consideration had precarious conditions, with increased risk factors arising from the characteristics of the houses. A total of 122 canines, from which 58% belonged to type A houses (wood walls, soil floor) and 42% to type B (brick walls, concrete floor). The total prevalence was 54% (66 sera were positive, 41 animals from type A houses, and the remaining 25 to type B). Although the prevalence was high, the number of animals should be increased in order to infer what happens at the population level. With the calculation of the relative risk and the association between the presence of infection and house types, value 1.41 could be indicating that canines from type A houses are more likely to develop the disease. Statistical analysis allows us to conclude that there is no significant evidence to affirm that there is association between canine infection and the type of house where animals live

Yield, moisture, ashes and minerals in liver and muscles of broilers submitted to stress in summer and winter

Fil: Álvarez, M. I. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Sandoval, Gladis Lilia. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Terraes, Juan Carlos. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Revidatti, Fernando Augusto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Fernández, Ricardo Juan. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Maruñak, S. L. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Ortíz, M. L. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Cowper Coles, P. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Para evaluar los efectos del estrés sobre la calidad de la canal de polloscriados en jaulas, se compararon lotes control (C) y experimental (E) durante las temporadasestival e invernal. Las aves eran machos provenientes del cruzamiento Rhode Island x PlymouthRock Barrada. El lote E (n = 4) fue sometido 2 veces por semana a maniobras inductorasde estrés, consistentes en sujeción, hacinamiento e inversión corporal durante todo el ciclode crianza, mientras que el lote C (n = 4) continuó su desarrollo en condiciones normales. Lasaves fueron sacrificadas a los 55 días. Se evaluaron los pesos corporales, así como el peso decanal, hígado y músculos de pata y pechuga. Se determinó el rendimiento, humedad, cenizas,macrominerales (Ca, Mg, K) y microminerales (Cu, Fe, Zn) en hígado y músculos. El análisisde la variancia no reveló diferencias significativas atribuibles al estrés, pero en la mayoría delas variables productivas estudiadas (peso final, rendimiento de pata, porcentaje de humedaden pechuga y proporciones de hígado y desperdicios con respecto al peso corporal), se registrarondiferencias significativas entre temporadas (p &lt; 0,05). Cenizas y minerales tambiénfueron significativamente distintos entre temporadas. En período estival se hallaron valoresmás altos de cenizas en hígado y pata, Ca en hígado, Mg en pechuga y pata, Zn en hígado ypechuga y K en hígado, pechuga y pata. Se concluye que las condiciones ambientales fueroncapaces de provocar mayores modificaciones que las atribuidas al estrés.To study stress influence, two groups of male chickens with (E) and without (C) stress, placed in cages, were compared in summer and winter. Animals were a crossbred Rhode Island x Plymouth Rock Barred. The E group (n = 4) was crowded inside a box and put up side down twice a week as a stress inductor all over the growth period, while the other group (n = 4) remained as control. Chicken were slaughtered after 55 days. The studied variables were body weight; carcass weight, liver and muscles from breast and leg. Yield, moisture, ashes, macrominerals (Ca, Mg, K) and microminerals (Cu, Fe, Zn) were found in liver and muscles. Variance analysis showed no significative differences because of stress, but most of the studied variables (body weight, leg yield, moisture percentage in breast muscles, liver weight respect body weight and waste –considering head and claws as waste– percentage relative to body weight), showed significative differences (p < 0.05) between both seasons. Considering ashes and minerals contents, there were statistical differences between seasons with high values in summer in ashes in liver and leg, calcium in liver, magnesium in breast and leg, zinc in liver and breast and potassium in liver, breast and leg. These data indicate that different growth seasons cause more significant changes than stress for the analysed variables

Effect of monospecific antibodies against baltergin in myotoxicity induced by Bothrops alternatus venom from northeast of Argentina. Role of metalloproteinases in muscle damage

Myotoxicity, one of the most relevant local manifestations in envenomation by Bothrops genus, may result from a direct action of myotoxins or be due to an indirect vascular degeneration and ischemia. Baltergin, a snake venom metalloproteinase (SVMP), isolated from Bothrops alternatus venom has been used to obtain monospecific IgG, in order to determine the relative role of toxin in myotoxicity induced by whole venom. Bothrops diporus venom, another medical relevant genus of the northeastern region of Argentina, was also studied. Anti-baltergin IgG was able to neutralize completely the hemorrhagic activity of B. alternatus venom at an antibodies:venom ratio of 30:1 (w:w). However, mice injected with B. diporus venom showed a small spot remaining even at the highest ratio of IgG:venom assayed (50:1; w:w). Specific antibodies were efficient to neutralize the myotoxicity of B. alternatus venom at ratio 30:1 (w:w) but did not neutralize the same effects in B. diporus venom. Anti-baltergin polyclonal antibodies were useful tools for revealing the central role of SVMPs in the development of myotoxicity of B. alternatus venom, as well as, helping to suggest indirectly presence of potent myotoxic phospholipases A2 (PLA2s) in B. diporus venom.Fil: Gay, Claudia Carolina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste; ArgentinaFil: Maruñak, Silvana. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; ArgentinaFil: Teibler, Pamela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; ArgentinaFil: Leiva, Laura. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura; ArgentinaFil: Acosta, Ofelia Cristina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste; Argentin

Situación actual de la Oruga Taturana (Lonomia Oblicua) en el Nordeste Argentino

Los accidentes producidos por orugas pertenecientes a la especie Lonomia obliqua representan un problema creciente que preocupa a la comunidad de salud en general. El veneno de las orugas de esta especie tiene actividad procoagulante, fibrinolítica y fosfolipasa A2, que en los casos de envenenamiento, se traduce en hipofibrinogenemia, fibrinólisis, disminución de los factores XIII y V de la coagulación, plasminógeno y alfa-2-antiplasmina. Como consecuencia de los efectos deletéreos de esta intoxicación, se estima una tasa de mortalidad de 2,5% y que un 5% de los pacientes que sobreviven evolucionan a un cuadro de insuficiencia renal aguda que deriva en hasta un 20% de muertes debido a la intensa necrosis tubular aguda. En los últimos años en América del Sur aumentaron los casos de intoxicación entre el estadio larvario de este insecto y el ser humano, llegando en algunos casos a adquirir características epidémicas. En marzo 2015, en la FCV-UNNE, se recibieron orugas provenientes del departamento de San Ignacio de la Provincia de Misiones lo que constituyó un hallazgo interesante ya que anteriormente, se citaba que la oruga se encontraba en el centro-norte de la provincia, y evidentemente esto implica que se está produciendo una expansión de estos insectos hacia el sur de esta región.Fil: Sanchez, Matias Nicolas. Ministerio de Salud. Instituto Nacional de Medicina Tropical; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Valdovinos Zaputovich, Bertha. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Maruñak, Silvana. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Peichoto, María Elisa. Ministerio de Salud. Instituto Nacional de Medicina Tropical; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Teibler, Gladys Pamela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentin

Isolation and biological characterization of a basic phospholipase A2 from bothrops jararacussu snake venom

Fil: Maruñak, Silvana Licia. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias. Veterinarias; Argentina.Fil: Leiva, Laura Cristina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura; Argentina.Fil: García Denegri, María Emilia. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura; Argentina.Fil: Teibler, Gladys Pamela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Acosta, Ofelia Cristina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.A phospholipase A2 has been isolated from Bothrops jararacussu venom from snakes that inhabit the northeast region of Argentina. The present study describes in vivo and in vitro biological activities of phospholipase A2 from B. jararacussu as well as isolation details of its. Venom was obtained by milking of adult snakes which were housing in wood reptile cages of varying dimensions in heated (20–30oC) rooms. Snakes received a weekly diet of mice and water was available ad libitum for drinking and soaking. The enzyme was purified by gel filtration on a Sephadex G-75 column followed by ion exchange chromatography on a SP-Sephadex C25 column. The major peak belonging to proteins was retained in the cation exchanger and then eluted using a concentration gradient of KCl that exhibited phospholipase activity. This basic PLA2 consists of a single polypeptide chain with a molecular mass of 15.6 kDa. It had a high indirect hemolytic activity and produced a significant paw edema reaction in mice. The enzyme showed a low lethality (LD50 148.6 μg) when was administered i.p. but exhibited elevated myotoxic effects in vivo by increasing plasma CK activity of injected mice, corroborated results by the histological observations of samples of gastrocnemius muscle. Myonecrosis is the result of intense destruction of muscular fibers that involves local infiltration of inflammatory cells and leads to the highest peak of CK level just after 1 hour mice injection. Moreover, the isolated enzyme showed anticoagulant activity, evaluated on sheep platelet-poor plasma which recalcification time was prolonged after incubation with the isolated phospholipase A2 . These findings showed that this phospholipase, isolated by only two simple chromatographic steps, possesses high edematogenic and myotoxic activities. However, despite the low lethal activity, this enzyme would contribute markedly to the pathophysiology of the bothropic envenomation

Proteolytic, edematogenic and myotoxic activities of a hemorrhagic metalloproteinase isolated from Bothrops alternatus venom

A hemorrhagic metalloproteinase has been isolated from Bothrops alternatus venom from specimens that inhabit the north-east region of Argentina. The present study aimed at evaluating the proteolytic, hemorrhagic, edematogenic and myotoxic activities of the purified metalloproteinase, in order to consider its participation on the phatophysiology of the intoxication by Bothrops alternatus venom. The hemorrhagic metalloproteinase was isolated by a combination of DEAE-Cellulose chromatography and gel filtration on Sephadex G-75. The enzyme showed a molecular mass around 55 kDa, it exhibited a hemorrhagic activity with a minimal hemorrhagic dose of 1.9 μg, almost two fold minor than the whole venom (3.6 μg). The enzyme showed a weak proteolytic activity on casein (18.72 U/mg enzyme), similar to the one exhibited by the whole venom (20 U/mg venom). Besides, the ability to degrade casein could be detected by SDS-PAGE; β-casein was the fraction that showed the higher degradation, followed by αs1-casein and κ-casein degradation. The hemorrhagic metalloproteinase rapidly hydrolysed the Aα-chain of fibrinogen, followed by Bβ-chain degradation and leaving the γ-chain unaffected. Proteolytic activities were inhibited by EDTA whereas they were not inhibited by benzamidine and PMSF. The metalloproteinase showed several polypeptides chains after autocatalytic processing, including a chain of 28 kDa, it could be the processed disintegrin-like and cysteine-rich domains. The isolated enzyme exhibited myotoxic activity with high CK levels at 6 h, due to local ischemia resulting of its hemorrhagic activity, and a significant edema-inducing effect (MED=1.3 μg), corroborated both results by the histological observations of samples of gastrocnemius muscle. These findings showed that this hemorrhagic metalloproteinase, possesses high edematogenic and myotoxic activities and, in despite of exhibiting a weak proteolytic activity, it is able to degrade fibrinogen. So, this enzyme would contribute markedly to the phatophysiology of the bothropic envenomation.Fil: Gay, Claudia Carolina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Leiva, Laura Cristina Ana. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; ArgentinaFil: Maruñak, Silvana. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Teibler, Gladys Pamela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Acosta de Pérez, Ofelia. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentin