Reduction of vancomycin resistance inVanAand VanBcontainingVancomycin Resistant Enterococci (VRE) isolatesin presence of lactoferrin protein

چکیده زمینه و هدف : پروتئین لاکتوفرین(Lactoferrin(LF)) دارای اثرات ضدمیکروبی اثبات شده ای است. هدف از این مطالعه بررسی تأثیر لاکتوفرین روی حداقل غلظت مهاری) Minimum inhibitory concentration (MIC))وانکومایسین در سویه های انتروکوک مقاوم به وانکومایسین دارای ژنهای مقاومت VanA و VanB بود. ﻣﻮﺍﺩ ﻭ ﺭﻭﺵﻫﺎ: در این مطالعه مقطعی ، پس از جداسازی و تشخیص265 سویه انتروکوک از نمونه های بالینی ، MIC وانکومایسین و تیکوپلانین سویه هابا روش تست اپسیلومتر ( Epsilometer test(Etest)) بدست آمد. نمونه های انتروکوک مقاوم به وانکومایسین Vancomycin Resistance Entrococcus(VRE)) ) ، با روش real time PCR ازلحاظ وجود ژنهای مقاوم به وانکومایسین VanA و VanB بررسی شد و سپس تأثیر لاکتوفرین را بر روی MIC آنتی بیوتیک وانکومایسین سویه های VRE مورد بررسی و بااستفاده از نرم افزارآماری SPSS نسخه 20 (version 20, SPSS Inc., Chicago, IL) و آزمون های آماری رگرسیون خطی و همبستگی پیرسون با سطح معنی داری P-value <0.05 آنالیز گردید. ﻧﺘﺎﻳﺞ: نمونه VanA در غلظت µg/ml) 2048)پروتئین لاکتوفرین MIC وانکومایسین را 85 و 80 برابر به ترتیب در روش تغییر یافته Etest و میکروتیتر کاهش داده و در نمونه VanB در غلظت µg/ml) 512) پروتئین لاکتوفرین MIC وانکومایسین را 10و 10.3 برابر به ترتیب در روش تغییر یافته Etest و میکروتیتر کاهش داده است. شاخص لاکتوفرین ارتباط همبستگی مثبت معنی داری را با کاهش MIC وانکومایسین نشان داد (001/0 Pvalue< و r=0.183 ). نتیجه گیری: غلظت های متفاوت پروتئین لاکتوفرین در شرایط آزمایشگاهی باعث کاهش مقاومت در سویه هایVRE دارای ژن VanA و VanB می شود ،پیشنهاد پتانسیل استفاده از این پروتئین به عنوان یک عامل کمکی به وانکومایسین وجود دارد

Phenotypic and Molecular Characterization of Extended-Spectrum beta-Lactamase Produced by Escherichia coli, and Klebsiella pneumoniae Isolates in an Educational Hospital

Background: Extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) are a group of enzymes that hydrolyze antibiotics, including those containing new cephalosporins, and they are found in a significant percentage of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae strains. With the widespread use of antibiotics, difficulties with infection therapy caused by drug resistant organisms, especially those that have acquired resistance to beta-lactams, such as broad-spectrum cephalosporins, have amplified the above-mentioned organisms. Objectives: This study was conducted to characterize ESBLs among E. coli and K. pneumonia isolates by molecular and phenotypic methods. Materials and Methods: Different strains of E. coli and K. pneumonia were collected from patients with urinary tract infections. The ESBL phenotype was determined by a double disk diffusion test (DDDT). In addition, polymerase chain reaction (PCR) analysis specific for beta-lactamase genes of the TEM and SHV family was carried out. The PCR products were run on agarose and examined for DNA bands. Results: A total of 245 E. coli and 55 K. pneumonia strains were isolated from different samples. In total, 128 of the 300 isolates were confirmed as potential ESBLs producers as follows: 107 (43.67%) E. coli and 21 (38.18%) K. pneumonia. ESBLs genes were found in 24 isolates (18.75%): 21 E. coli and 3 K. pneumonia isolates. The TEM gene was present in 13 (12.14%) E. coli strains, but it was not detected in K. pneumonia. In addition, the SHV gene was present in 8 (7.47%) E. coli and 3 (14.28%) K. pneumonia isolates. Five (4.67%) of the E. coli isolates harbored both TEM and SHV genes. All isolates (100%) were susceptible to imipenem. The lowest rates of resistance to other antibiotics were observed for; piperacillin-tazobactam (6.25%), amikacin (12.5%) and gentamicin (14.84%). The rates of resistance to other antibiotics were as follow: nitrofurantoin (16.4%), nalidixic acid (23.43), co-trimoxazole (25%), cefepime (32%), ciprofloxacin (55.46%), ampicillin (69.53%), ceftazidime (100%), and cefotaxime (100%). Conclusions: The results of this study indicate the widespread prevalence of ESBLs and multiple antibiotic resistance in E. coli and K. pneumoniae. Therefore, beta-lactam antibiotics and beta-lactamase inhibitors or carbapenems should be prescribed based on an antibacterial susceptibility test