Anorexigen-induced pulmonary hypertension and the serotonin (5-HT) hypothesis: lessons for the future in pathogenesis

Epidemiological studies have established that fenfluramine, D-fenfluramine, and aminorex, but not other appetite suppressants, increase the risk of primary pulmonary hypertension (PH). One current hypothesis suggests that fenfluramine-like medications may act through interactions with the serotonin (5-hydroxytryptamine [5-HT]) transporter (5-HTT) located on pulmonary artery smooth muscle cells and responsible for the mitogenic action of 5-HT. Anorexigens may contribute to PH by boosting 5-HT levels in the bloodstream, directly stimulating smooth muscle cell growth, or altering 5-HTT expression. We suggest that individuals with a high basal level of 5-HTT expression related to the presence of the long 5-HTT gene promoter variant may be particularly susceptible to one or more of these potential mechanisms of appetite-suppressant-related PH

Evaluation de la densité osseuse chez les patients BPCO suivis dans les hôpitaux Henri Mondor et CHIC

Introduction Les co-morbidités et les conséquences systémiques de la BPCO restent sous-diagnostiquées et sous traitées malgré un arsenal thérapeutique adapté. Le traitement des co-morbidités semble d ailleurs avoir un impact majeur sur l évolution de la BPCO elle-même. De nombreuses études ont montré que l ostéoporose faisait partie de ces comorbidités. Le but de ce travail était de comparer la densité osseuse des patients atteints de BPCO à celle de sujets fumeurs indemnes de la maladie et de déterminer la prévalence de l ostéoporose dans une population de patients BPCO suivis dans l hôpital Henri Mondor et le Centre Hospitalier Intercommunal de Créteil. Matériel et Méthode Cette étude épidémiologique transversale a comparé des sujets BPCO à des fumeurs sains. En raison des différences de densité osseuse liées au genre, hommes et femmes ont été analysés séparément. La mesure de la DMO s est faite chez tous les patients par osteo-densitomètre avec détermination de la masse osseuse, reportée en gramme par centimètre carrée et en T-score. Le T-score a été utilisé pour classer les patients en DMO normale et ostéoporose. Résultat 133 hommes et 69 femmes ont été inclus dans cette étude. La DMO de la hanche droite et gauche des femmes BPCO était significativement plus basse que celles des fumeuses non BPCO, cette différence n était pas retrouvée chez les hommes. Conclusions La prévalence de l ostéoporose est importante chez les patients BPCO, particulièrement chez les femmes et demande une prise en charge spécifiquePARIS12-Bib. électronique (940280011) / SudocSudocFranceF

Financement des universités : pour un SYstème de répartition des Moyens à l\u27Activité et à la Performance (SYMPA) (le)

Sénat - Rapport d\u27information n° 382 (2007-2008) du 10 juin 2008 - par MM. Philippe ADNOT, Jean-Léonce DUPONT, Christian GAUDIN, Serge LAGAUCHE, Gérard LONGUET et Philippe RICHERT, fait au nom de la commission des Affaires culturelles et de la commission des Finances, du contrôle budgétaire et des comptes économiques de la Natio

Gene expression in lungs of mice lacking the 5-hydroxytryptamine transporter gene

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>While modulation of the serotonin transporter (5HTT) has shown to be a risk factor for pulmonary arterial hypertension for almost 40 years, there is a lack of in vivo data about the broad molecular effects of pulmonary inhibition of 5HTT. Previous studies have suggested effects on inflammation, proliferation, and vasoconstriction. The goal of this study was to determine which of these were supported by alterations in gene expression in serotonin transporter knockout mice.</p> <p>Methods</p> <p>Eight week old normoxic mice with a 5-HTT knock-out (5HTT-/-) and their heterozygote(5HTT+/-) or wild-type(5HTT+/+) littermates had right ventricular systolic pressure(RVSP) assessed, lungs collected for RNA, pooled, and used in duplicate in Affymetrix array analysis. Representative genes were confirmed by quantitative RT-PCR and western blot.</p> <p>Results</p> <p>RVSP was normal in all groups. Only 124 genes were reliably changed between 5HTT-/- and 5HTT+/+ mice. More than half of these were either involved in inflammatory response or muscle function and organization; in addition, some matrix, heme oxygenase, developmental, and energy metabolism genes showed altered expression. Quantitative RT-PCR for examples from each major group confirmed changes seen by array, with an intermediate level in 5HTT +/- mice.</p> <p>Conclusion</p> <p>These results for the first time show the in vivo effects of 5HTT knockout in lungs, and show that many of the downstream mechanisms suggested by cell culture and ex vivo experiments are also operational in vivo. This suggests that the effect of 5HTT on pulmonary vascular function arises from its impact on several systems, including vasoreactivity, proliferation, and immune function.</p

Physiopathologie de l'hypertension pulmonaire de la BPCO

L hypertension pulmonaire (PH) compliquant la bronchopneumopathie chronique obstructive (BPCO) est associée à une augmentation du risque de décès. Le remodelage vasculaire pulmonaire en est la principale cause ; ce remodelage est le résultat de la combinaison des effets de l'hypoxie alvéolaire, d une inflammation et de la perte du lit vasculaire pulmonaire. Sur le plan anatomique, on observe un épaississement de l intima dû à une prolifération des cellules musculaires lisses (CML). Ces anomalies sont sous la dépendance du transporteur de la sérotonine (5-HTT). La quantité d ARN messager du 5- HTT des CML humaines en culture est significativement plus élevée chez les sujets homozygotes pour la forme longue du promoteur de 5-HTT (LL), par rapport aux sujets hétérozygotes (LS) ou homozygotes pour la forme courte (SS), notamment en condition hypoxique. La pression artérielle pulmonaire (PAP) est significativement plus élevée chez les patients homozygotes LL (moy. 34 +- (ET)13 mm Hg), par rapport aux autres patients (22 +- 4 mm Hg et 23 +- 5 mm Hg ; p<0,001). Nous avons également observé que l interleukine 6 (IL- 6) sérique est corrélée à la PAP (r=0,39 ; p< 0,001). De plus, un polymorphisme fonctionnel du gène codant pour l IL-6 G( 174)C est associé dans sa forme homozygote GG à une HP plus fréquente (Odds Ratio ajusté= 4.32; [Intervalle de confiance à 95%, 1.96-9.54]) et une PAP significativement plus élevée. En conclusion, la prolifération des CML artérielles pulmonaires dans la BPCO est dépendante du 5-HTT et de l inflammation. Cette prolifération est en partie induite par l hypoxie alvéolaire entraînant un remodelage des petites artères et artérioles pulmonairesRésumé anglais manquantPARIS-EST-Université (770839901) / SudocSudocFranceF

Contribution à l'étude du contrôle neuro-hormonal des réponses rénales aux variations du volume sanguin central

PARIS12-CRETEIL BU Multidisc. (940282102) / SudocSudocFranceF

TRANSFERT DU GENE DU FACTEUR ATRIAL NATRIURETIQUE PAR VECTORISATION ADENOVIRALE CHEZ LE CHIEN

CES TRAVAUX EXPERIMENTAUX REALISES A L'ECOLE NATIONALE VETERINAIRE D'ALFORT ONT EU POUR OBJECTIF DE TRANSFERER PAR VECTEUR ADENOVIRAL LE GENE DE L'ANF SUR UN MODELE GRAND MAMMIFERE LE CHIEN, AFIN D'AUGMENTER LA CONCENTRATION CIRCULANTE DU PEPTIDE ET D'ACCENTUER SES EFFETS PHYSIOLOGIQUES. CES TRAVAUX ONT ETE CONDUITS DANS LA PERSPECTIVE DE METTRE AU POINT UNE ALTERNATIVE AU TRAITEMENT CLASSIQUE DE L'INSUFFISANCE CARDIAQUE, LE CHIEN FAISANT L'OBJET DE CARDIOPATHIES SPONTANEES SE RAPPROCHANT, PAR DE NOMBREUX ASPECTS, DE CELLES OBSERVEES CHEZ L'HOMME. DANS UNE PREMIERE PARTIE, APRES AVOIR RAPPELE LE ROLE PHYSIOLOGIQUE DU FACTEUR ATRIAL NATRIURETIQUE (ANF) ET SON INTERVENTION DANS L'INSUFFISANCE CARDIAQUE, LES GRANDES CARACTERISTIQUES DES VECTEURS ADENOVIRAUX ET LEURS MODALITES DE TRANSFERT SONT DECRITES. DANS UNE DEUXIEME PARTIE, LES QUATRE GRANDES ETAPES DES TRAVAUX EXPERIMENTAUX SONT DETAILLEES. LA PREMIERE ETUDE A CONSISTE A TESTER ET COMPARER DIFFERENTES VOIES D'INOCULATION DE DEUX VECTEURS ADENOVIRAUX, L'ADMLP-ANF ET L'ADRSV-ANF, PORTEURS DU GENE DE L'ANF RESPECTIVEMENT SOUS LE CONTROLE DU PROMOTEUR MLP (MAJOR LATE PROMOTOR) ET DU PROMOTEUR RSV (DU VIRUS DU SARCOME DE ROUS). LA DEUXIEME ETUDE A EU POUR BUT D'EVALUER LES EFFETS PHYSIOLOGIQUES INDUITS PAR L'INOCULATION INTRA-HEPATIQUE D'ADRSV-ANF CHEZ LE CHIEN SAIN. L'ABSENCE D'EFFETS HEMODYNAMIQUES ET URINAIRES (ELEVATION DE LA NATRIURESE ET DIURESE) SIGNIFICATIFS A CONDUIT A POTENTIALISER L'ACTION DE TRANSDUCTION DE L'ADRSV-ANF EN REALISANT UNE INOCULATION INTRA-HEPATIQUE CONJOINTE D'ADRSV-ANF ET D'UN ADENOVIRUS RECOMBINANT PORTANT DANS LA PARTIE GAUCHE DE SON GENOME LA SEQUENCE VAI MODIFIEE, L'AD-VAR. (ETUDE 3). ENFIN, DANS LA PERSPECTIVE DE TRANSFERER LE GENE DE L'ANF DIRECTEMENT DANS LE REIN, SITE PRINCIPAL D'ACTION DU PEPTIDE, LA QUATRIEME ETUDE A CONSISTE A TRANSFERER PAR VECTEUR ADENOVIRAL, VIA L'URETERE OU VIA L'ARTERE RENALE, LE GENE RAPPORTEUR GALACTOSIDASE SOUS LE CONTROLE DES SEQUENCES REGULATRICES DU GENE IE (IMMEDIATE EARLY) DU CYTOMEGALOVIRUS HUMAIN (CMV). L'EFFICACITE DES DIFFERENTES VOIES D'INOCULATION A ETE COMPAREE ET LEUR INNOCUITE CONFIRMEE PAR EXAMEN HISTOLOGIQUE, PAR EVALUATION DYNAMIQUE DE LA FONCTION RENALE AINSI QUE PAR L'ANALYSE DE PARAMETRES BIOCHIMIQUES PLASMATIQUES ET URINAIRES.PARIS12-CRETEIL BU Multidisc. (940282102) / SudocSudocFranceF

La voie de signalisation Akt/mTOR (rôle physiopathologique etcible thérapeutique dans l'hypertension artérielle pulmonaire expérimentale)

Les travaux de la thèse portent sur l'implication de la voie de signalisation Akt (sérine/thréonine kinase Akt) et mTOR (mammalian target of rapamycin) dans la physiopathologie de l'hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) expérimentale. L'HTAP résulte d'une prolifération exagérée des cellules constitutives des vaisseaux pulmonaires, principalement les cellules musculaires lisses artérielles pulmonaires (CML-AP). De nombreux effecteurs biologiques et physiques préalablement identifiés agissent sur les CML-AP et participent à l'hyperplasie de celles-ci. Nous montrons que ces nombreux effecteurs convergent vers une voie de signalisation intracellulaire commune, la voie Akt/mTOR, qui de fait représente une cible thérapeutique pour le traitement de l'HTAP, et pourrait conditionner l'hyperplasie des CML-AP. mTOR est présent dans la cellule sous forme de deux complexes, mTORC1 et mTORC2, qui phosphorylent des substrats variés contrôlant la prolifération cellulaire. Les effecteurs de mTORC1 incluent les S6 kinases (S6K1 and S6K2) et les "eIF4E-binding proteins" (4EBP) alors que mTORC2 active la sérine/thréonine kinase Akt et parmi les kinases sous-jacentes, la kinase GSK3. La première étude est consacrée à l'évaluation des effets des inhibiteurs de protéases du VIH (ritonavir, amprenavir, nelfinavir) sur la progression de HTAP expérimentale, induite par la monocrotaline ou l'hypoxie. Nous montrons que ces deux formes d'HTAP sont associées à une activation de la voie Akt/mTOR dans les artères pulmonaires. Les traitements respectifs par les trois inhibiteurs des protéases du VIH durant 3 semaines induisent une réversibilité de l'HTAP, de l'hypertrophie ventriculaire droite et du remodelage des vaisseaux pulmonaires, de même qu'une inhibition de la phosphorylation d'Akt, de S6K et de GSK3. La prolifération des CML-AP induite par le PDGF ou le SVF 5%, associée à une augmentation de p-Akt et p-GSK3, est également bloquée par les inhibiteurs des protéases, de façon similaire et non additive à celle d'inhibiteurs spécifiques de la PI3 kinase et de GSK3. La conclusion est que ces traitements antirétroviraux inihibent la progression de l'HTAP en inhibant la voir Akt/mTOR dans les CML-AP. Cette proposition permettrait d'expliquer l'effet suspecté en clinique des traitements antirétroviraux sur l'HTAP compliquant l'infection par le VIH.Dans la seconde étude, nous montrons que les CML-AP en culture prélevées à partir de rats ayant développé une HTAP induite par la monocrotaline proliférent de façon exagérée en comparaison avec les cellules de rats témoins. Ce phénotype prolifératif est observé en présence de nombreux facteurs mitogènes parmi lesquels le SVF 5%, le PDGF, la sérotonine ou 5-HT, l'IGF1 ou l'IL1-beta, et est associé à une activation des substrats de mTORC1 et mTORC2. Le traitement in vitro par la rapamycine des CML-AP de rats avec HTAP établie permet d'inhiber la prolifération de ces cellules et de bloquer à la fois mTORC1 et mTORC2. De même, le traitement par la rapamycine de rats porteurs de l'HTAP préétablie pendant une semaine permet de normaliser la prolifération des CML-AP in vitro et in vivo et d'inhiber mTORC1 et mTORC2, effets non observés par l'Imatinib ou la Fluoxetine. De plus, le traitement des rats par la rapamycine prévient ou corrige l'HTAP induite par la monocrotaline de façon plus importante que l'Imatinib ou la Fluoxétine.Ces résultats indiquent donc que l'activation de la voie Akt/mTOR, très étroitement associée au développement de l'HTAP expérimentale, pourrait expliquer le phénotype prolifératif anormal des CML-AP inhérent à la pathologie, et ainsi représenter une cible thérapeutique de choix pour le traitement de l'HTAP humaine.The major objectives of research described in this thesis is focused on the cell signaling pathway of Akt (serine/threonine kinase Akt) and mTOR (mammalian target of rapamycin) in the patho-physiology of experimental pulmonary arterial hypertension (PAH). PAH occurs as a result ofhyperplasia of the components of pulmonary vessels, principally the pulmonary arterial smooth muscle cells (PA-SMCs). Numerous previously identified biological and physical effectors act on the PA-SMCs and participate in PA-SMC hyperplasia. Here we show studied that these different effectors converge into a common intracellular signaling pathway, Akt/mTOR signaling pathway, which represents actually a therapeutic target for PAH treatment, and could be involved in the hyperplasia of PA-SMCs. In cells mTOR, is presented in the form of two complexes, mTORC1 and mTORC2, which phosphorylate various substrates controlling the cellular proliferation. The effectors of mTORC1 include the S6 kinases (S6K1 and S6K2) and eIF4E-binding proteins (4EBP), meanwhile mTORC2 activates the serine/threonine kinase Akt and the underlying kinases, e.g. GSK3 kinase.The first study is devoted to evaluate the effects of the protease inhibitors of HIV (ritonavir, amprenavir, nelfinavir) on experimental PAH development induced by monocrotaline or hypoxia. We studied that the two forms of PAH are associated with an activation of Akt/mTOR signaling pathway in pulmonary arteries. The treatment by the three protease inhibitors of HIV during 3 weeks causes reversibility in experimental PAH with decreased right ventricular hypertrophy and pulmonary vascular remodeling as well as inhibition of phosphorylation of Akt, S6K and GSK3. The proliferation of PA-SMCs stimulated by PDGF or FCS 5%, which is associated with an increased p-Akt and p-GSK3, is also blocked by the proteases inhibitors, in a similar and non additive way like the specific inhibitors of PI3 kinase and GSK3. We conclude that the antiretroviral treatments significantly inhibits PAH development by inhibiting Akt/mTOR signaling pathway in PA-SMCs. This proposition allows explaining the effect of antiretroviral treatments of PAH accompanied with HIV in patients.In the second study, we studied that the cultured PA-SMCs extracted from the rats with monocrotaline induced-PAH(MCT-PAH) proliferates faster as compared to control. This proliferative phenotype is observed in the presence of different mitogenic factors including FCS 5%, PDGF, 5-HT, IGF1 or IL-1b, and is associated with an activation of the substrates of mTORC1 and mTORC2. Treatment with rapamycin in the PA-SMCs extracted from the rats with PAH in vitro inhibits the proliferation and also blocks the activation of mTORC1 and mTORC2. The treatment by rapamycin in the rats with PAH during one week allows normalizing the proliferation of PA-SMCs in vitro and inhibiting the activation of mTORC1 and mTORC2 in vivo. These effects were not observed when treated with imatinib or fluoxetine. Moreover, treatment with rapamycin prevents or reverse MCT induced PAH more significantly than that by imatinib or fluoxetine.These results indicate that the activation of Akt/mTOR signaling pathway isclosely related to experimental PAH development, which can explain the abnormal proliferative phenotype of PA-SMCs involved in the patho-physiology of PAH, and represent a therapeutic target for the treatment of PAH in human.PARIS-EST-Université (770839901) / SudocPARIS12-Bib. électronique (940280011) / SudocSudocFranceF