Percepção dos riscos ocupacionais por profissionais de um laboratório de imunodiagnóstico

Introdução: os profissionais que trabalham nas áreas das ciências biológicas e saúde, no exercício de suas atividades ocupacionais, e os usuários dos serviços de atenção à saúde estão expostos a diversos riscos que, quando não perceptíveis e controlados, podem causar acidentes. Objetivo: descrever a percepção do risco ocupacional e as condições no ambiente de trabalho dos profissionais de um laboratório de imunodiagnóstico em uma instituição brasileira pública de ensino superior. Metodologia: estudo descritivo quantitativo que contou com participação voluntária de profissionais (N=19, 86% do total dos vinculados ao serviço). Os dados foram obtidos através de um questionário estruturado para registro da percepção dos grupos de riscos ambientais físico, químico, biológico, ergonômico e de acidentes no âmbito ocupacional, com base na Portaria 25 de 1994 e Norma Regulamentadora 15 do Ministério do Trabalho e Emprego, assim como, a disponibilidade de equipamentos de proteção individual e coletiva. Resultados: nos registros dos grupos de risco inerentes ao processo de trabalho, o biológico foi o mais presente, devido ao manuseio de amostras sanguíneas e suas frações. Quanto as condições de trabalho, os profissionais informaram que há disponibilidade de equipamentos de proteção adequados e que os mesmos são utilizados nos respectivos setores para contenção e minimização dos riscos. Conclusão: os profissionais demonstraram percepção dos riscos aos quais estão expostos. O laboratório adota a legislação vigente e as exigências de segurança e qualidade. Ações que promovem a minimização da exposição aos riscos ocupacionais devem ser continuadas para manutenção e promoção da saúde destes trabalhadores

Seroepidemiology of hepatitis B in individuals born between1945-1985 on a brazilian regional metropolis

 Background: hepatitis B prevalence can be influenced by social/cultural behavior and the Baby Boomer (BB) generation(1945-1964) may have been more susceptible to this infection. Objectives: We investigated the seroprevalence of markers for HBV infection and vaccination and its association with main risk factors. Methodology: a random sample of individuals aged 30-70 years old in a public clinical laboratory from a metropolitan area of Bahia/Brazil were tested for HBsAg/Total Anti-HBc/Anti-HBs/Anti-HBc-IgM and a socio-demographic questionnaire was applied. Results: of the650 participants, 349 were 51-70 yo (BB) and 301 were non-BB. The prevalences were HBsAg (2.3%), Total Anti-HBc (17.1%) and Anti-HBs (27.4%). Anti-HBcIgM (2.7%) was performed in 112 participants sera who had contact/infection with HBV. The laboratory profiles were characterized as susceptibility (68%), vaccine response (14.8%) and contact/infection with HBV (17.2%). BB participants were more susceptible and less vaccinated than non-BB. The higher frequency of contact/infection status was observed in the BB generation. Statistically significant differences were found for the contact/infection status in males(50,9%) illicit drug use (11,6%), syringe/needle sharing (7,1%), and blood transfusion (10,7%). Non-BB with contact/ infection profile reported more tattoo/piercing and BB reported higher use of glass syringes. Conclusion: the majority of the study population was susceptible to infection but participants older than 50 years showed both, a higher frequency of this profile and also a higher frequency of contact/infection status, thus suggesting the need for greater health care attention for this age group

Produção de sonda de DNA diretamente biotinilada com N-hidroxisuccinimida biotina ester (BNHS).

The use of DNA probes in gene analyses in a solid phase has expanded from research to routine diagnosis in medicine or veterinary plant breeding and forensic science. Those probes have been used since the introduction of the hybridization technique described as southern blotting, which involves the immobilization of electrophorectically separated fragments of DNA onto a filter, followed by hybridization to specific DNA probe sequence. Another technique described as dot hybridization is less complex than the conventional southern blotting; no electrophoretic step is required and it is less demanding on DNA quality because no digestion with restriction enzyme is performed. The most commonly used label in those probes is the radioisotopic 32Phosphorus, which needs authorization for using; it is expensive, hazardous, and has extremely short lifetime besides its high sensitivity. A lot of alternatives to 32P label have been used, with direct or secondary labels. Among them, the biotin-labeled probes have shown great advantages and have successfully been used in specialized and well equipped laboratories. This study reports a modification of the classical method described for DNA probes coupled by hidrazide biotin (REISFELD, 1987). In our work we have used biotinyl-N-hydroxysuccinimide ester (BNHS) in dimtehylformamide to label cytosine residues of available single-strended DNA segments extracted from Corynebacterium pseudotuberculosis. The variation in the rate of biotin and DNA as well as its specificity and sensibility were carefully tested and criteriously analyzed by adsorption genomic DNA of C. pseudotuberculosis and other DNAs in nitrocelullose paper followed by incubation with previously mentioned biotinilated probes, peroxidase avidine and revealed with peroxide hidrogen and 4-cloro alpha naphtol. The results showed that the produced DNA probe have the desired good characteristics. This alternative method, which can be employed with the DNA of other microorganisms, may produce, in an easier way, non- radioactive probes, making that procedure less expensive, more rapid and safer since the nick translation is not necessary, neither the use of radioactive products nor the use of hidrazide. This specific probe can be used on the diagnosis of C. pseudotuberculosis infection in goats and sheep.A utilização de sondas de DNA para análise genômica em fase sólida tem se expandido e ultrapassado as áreas da pesquisa, estendendo-se ao terreno do diagnóstico de rotina nas áreas de medicina humana e animal, bem como nas ciências forenses. Estas sondas têm sido utilizadas desde o surgimento da primeira técnica de hibridização descrita com o southern blotting, que envolve a imobilização, em filtros de papel, de fragmentos de DNA separados eletroforeticamente. Outra técnica descrita como o dot-hibridização é menos complexa do que o southern convencional por não requerer o passo prévio de eletroforese e por ser menos exigente quanto à qualidade do DNA, já que dispensa a digestão com enzima de restrição. A marcação mais comum para estas sondas é o fósforo radioisótopo (32P), que, apesar de sua alta sensibilidade, apresenta os inconvenientes de risco físico, necessidade de autorização para manipulação de radioisótopos, alto custo e uma vida média muito curta. Uma série de alternativas para o 32P têm sido utilizadas, com marcas diretas ou secundárias, entre elas a biotina, que tem mostrado grandes vantagens e tem sido usada também em laboratórios especializados e bem equipados. Este trabalho descreve uma modificação do método clássico descrito para sondas de DNA acopladas por biotina hidrazida. Utilizamos a N-hidroxisuccinimida biotina (BNHS) em dimetilformamida, para marcar resíduos de citosina disponíveis em segmentos de fita simples de DNA extraído de Corynebacterium pseudotuberculosis. A variação da proporção de biotina e de DNA, bem como sua especificidade e sensibilidade, foram cuidadosamente testadas e criteriosamente analisadas através de ensaios de hibridização, adsorvendo-se DNA cromossômico do C. pseudotuberculosis e outros DNAs em papel de nitrocelulose, seguindo-se a incubação com as sondas biotiniladas descritas,avidina-peroxidase e revelação com 4-cloro-1-naftol. Os resultados mostraram que a sonda de DNA produzida tem as características favoráveis esperadas. Desde que não é necessário o nick translation nem a utilização de material radioativo ou mesmo de hidrazida, sondas deste tipo podem ser utilizadas no auxílio do diagnóstico de infecções por C. pseudotuberculosis e outros microorganismos