PENGARUH SENTRIFUGASI SPERMATOZOA SAPI TERHADAP INTEGRITAS MEMBRAN, RESISTENSI DAN KELAYAKAN KONDISI PADA PROSES KAPASITAS IN VITRO

membahas tentang Pengaruh sentrifugasi spermatozoa sapi terhadap integritas membran, resistensi dan kelayakan kondisi pada proses kapasitas in vitr

Efektifitas Krioprotektan Selama Proses Pembekuan Spermatozoa Dengan metode Rapid Frezing Terbadap Gambaran sekuen Asam Amino Semen Sapi Beku Post Tbawing

Penelitian ini bertujuan untuk mengatasi teIjadinya mutasi ( kerusakan) DNA pada spennatozoa akibat proses pembekuan dengan mengoptimalkan peran krioprotektan. Meningkatkan angka fertilitas temak besar dan populasi temak ruminasia melalui program inseminasi buatan. Melalui kajian penelitian molekuler dimaksudkan dapat meningkatkan viabilitas dan kualitas semen beku untuk keperluan inseminasi buatan. Manfaat penelitian ini adalah dengan mengetahui efektivitas krioprotektan terhadap tingkat kerusakan yang ditimbulkan pada DNA spennatozoa sehingga dapat meningkatkan kualitas dari semen beku .. Penelitian ini penting mengingat pembekuan spennatozoa merupakan bagian dari proses penyimpanan spennatozoa untuk keperluan inseminasi buatan. Dewasa ini hasil inseminasi buatan beh!I11 mampu menopong percepatan perkembangan ternak, teIjadinya kegagalan pembuahan masih sering dijumpai dilapangan. Ha! ini dapat dilihat dari angk<: kebuntingan setelah dilakukan inseminasi buatan. Banyak faktor yang menyebabkan kegagCllan kebuntingan salah satunya kualitas semen beku akibat prosesing spennatozoa. Penelitian !ni meliputi pengukuran motilitas, viabilitas dan konselltrasi spennatozoa sapi setelah mengalami proses pemb~kuan, Pemeriksaan integritas membran spennotazoa sapi dengan metode Hypoosmotic Swelling Test, Isolasi DNA (NucleoSpin DNA II), Visualisasi RNA dengan menggunakan agarosa I % , Elektroforesis gel agarosa, Kuantifikasi konsentrasi DNA dengan menggunakan spektrofotometer, pemeriksaan mutasi DNA dengafl RT peR. Keluaran yang dihasilakan dari penditian ini adalah m~ngidentif:kasi kerusak:m DNA pada semen beku sehingga dapat mengoptima!isasi produksi semEn beku

Determination of Born Calves' Sex Based on Insemination Time in Dairy Cows

Former researchers found that there are differences of shape, cap size, motility ability, age, electricity and chemical characters between Y and X chromosome bearing sperm. Y sperm moves f aster, has smaller size but shorter life time within f emale reproduction tract. In opposite, X sperm is 3% fatter and has more round shape. Concerning its bigger shape, X sperm moves slower, but has longer life time in f emale reproductive tract. Based on that matter, this research was conducted to find out the sex of born calves depend on insemination time, early to inseminate, best time to inseminate and late to insem.inate. This research used 40 head of cows, divided by four groups; each group consists of 10 head. Control group was inseminated by sexed semen, first, second, third and forth group was inseminated by unsexing semen, respectively on early, the best and late time of insemination. Successfully pregnancy was obtained from the best time insemination, both by sexing and unsexing semen. While born calves sex were not significant different, meant almost the same, from. both semen. Research result showed insemination by both sexing and unsexing semen which was done in early time to inseminate will tend yield female calve

Unnatural Forced Moulting in The Laying Hen as Cause of Zoonosis from Salmonella Enteritidis

The aims of this reseach is to give information to the farmers and people about the bad consequences of consuming the poultry products that use unnatural forced moulting. The research was carried out by examining Salmonella enteritidis bacteria in the laying hens feces after treatment. The laying hens devided in three groups and treatment with unnatural forced moulting, dietary feed carried out during 2, 3 and 4 days, and the another group given natural forced moulting treatment by 200 ig/ml each hen á Prl single dose compared with the group without dietary feed and á Prl. The result showed that unnatural forced moulting with dietary feed during 2, 3 and 4 days decrease laying hen immune function. It was founded Salmonella enteritidis in laying hens feces after treatment. The Salmonella enteritidis can be the causal factor of zoonosis for human

The Success of Embryo Transfer in Dairy Cattle Recipient Using Beef Cattle Embryos

A field research on “The Success of Embryo Trans fer in Dairy Cattle Recipient using Beef Cattle Embryos” has been conducted. Prior to the research, selection of dairy cow recipients has been done. It has been selected, from three different farm locations i.e. Bendul Merisi Farm: 9 head; Teaching Farm 5 head and Wonocolo 6 had. The 20 recipients have been estrous synchronized prior to embryos transferred. Blood samples were collected three times i.e.: at onset of estrous, at receiving embryo (day 7) and day 21 after estrous, to measure the concentration of progesterone as the parameters. Further parameters were non return rate and pregnancy rate. Pregnancy detection was done by rectal explorati on on day 90 after transferred of embryos. Result shows 11 head (55%) dairy cow recipients get pregnant. They are 3 heads from Teaching Farm (60%), 4 heads (44.44%) from Bendul Merisi Farm and 4 heads (66.66%) from Wonocolo Farm In conclusion, dairy cow recipients can accept embryos derived from beef cattle. Key words : Embryo Transfer, Beef Cattle Embryo, Dairy Cattle Recipien

Penambahan Sari Air Laut (Nigarin) Dalam Pengencer Skim Kuning Telur Terhadap Viabilitas Dan Motilitas Spermatozoa Sapi Limousin Post Thawing

This research was · aimed to determine of Seawater Extract (Nigarin) adding effect on viability and motility Limousin bull sperm in post thawing examination in skim milk-egg yolk extender. This research used fresh samples of Limousin bull semen collected by using artificial vagina, then divided into 4 treatments. The control treatment (PO), Limousin bull semen with skim milk-egg yolk extender without Seawater Extract (Nigarin) adding. The treatment groups (Pl , P2, and P3), Limousin bull semen with skim milk-egg yolk extender + Seawater Extract (Nigarin) 0.109 µL, 0.426 µL and 1.09 µL, respectively. Data analyses using Analysis of Variant {ANOVA) One Way followed with Duncan to determine significant differences between treatments. Result showed that 1.09 µL Seawater Extract (Nigarin) in skim milk-egg yolk extender is the best consentration to increase viability and motility Limousin bull semen post thawing in this research. Keywords:Limousin bull sperm, egg yolk skim milk extender, Nigarin, motility, viabilit

The Excellence of Performance, Semen Quality and Testosterone Levels on Bull in Teaching Farm, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga

Study on performance, semen quality and testosterone levels of 2 young bulls (age range 3-5 years) Limousine and Simental and 2 old bulls (age range 6-8 years) types Limousin and Simental have been carried out in the Teaching Farm, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga. This study aimed to determine the performance, semen quality and testosterone levels can be used as a guideline whether or not the ejaculate of young and old bulls should be continued into frozen semen. Performance tests were carried out using measuring sticks and weight bands, semen quality tests included macroscopic and microscopic tests, semen concentration using a spectrophotometer and testosterone test using the Sandwich-ELISA method. The mean results of the performance test in young bulls were, while the mean for older bulls were: body weight 700 kg; hump height 136.5 cm; circumferens of chest 213 cm; body length 171 cm and scrotal circumference 35.5 cm. The performance test for old bulls is body weight 840 kg; hump height 143 cm; circumferens of chest 225.5 cm; body length 177.5 cm and scrotal circumference 40.25 cm. Mean macroscopic of semen examination for young bulls, mean volume 8 cc; milky white color; characteristic odor; The degree of acidity was 6.5 and mucous consistency, while for the old bulls the volume was 6.85; milky white color; characteristic odor; 6.5 degrees of acidity and mucous consistency. The mean microscopic examination for young bulls was mass movement ++ / +++; individual movement 80/3; concentration 745.5 million / ml; abnormalities 3% and 92.25% viability, for old bulls: movement mass ++ / +++; individual movement 77.5 / 3; concentration 1291.5 millon / ml; abnormalities 5% and viability 90%. Examination of serum testosterone levels using the Sandwich-ELISA technique was obtained by an average of 1.299 ± 0.1598 ng/ml in young bulls and 1.101 ± 0.1502 ng/ml in older bulls. This study concluded that young bulls and old bulls in the Teaching Farm, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga in terms of performance, semen quality and testosterone levels are suitable for processing into high quality frozen semen

Breeding performance of Indonesian beef cattle as recipients for embryo transfer

The objective of this study was to evaluate the breeding performance of Indonesian beef cattle (Ongole cross) as recipients for embryo transfer using Limousin embryos. As a result, the pregnancy rate was 35% (7 out of 20 cows). There was a significant difference (P<0.01) in the serum progesterone concentration between the nonpregnant and pregnant cows at the time of the embryo transfer (day 7 after the estrus). The pregnancy rate in the Indonesian beef cows was low, which may be due to their insufficient genetic quality and/or low physical conditions caused by the poor management, like a low-nutrition diet. The low progesterone concentration in the nonpregnant cows on day 7 may be associated with the failure of embryo implantatio

Efektifitas Krioprotektan Selama Proses Pembekuan Spermatozoa Dengan metode Rapid Frezing Terbadap Gambaran sekuen Asam Amino Semen Sapi Beku Post Tbawing

Penelitian ini bertujuan untuk mengatasi teIjadinya mutasi ( kerusakan) DNA pada spennatozoa akibat proses pembekuan dengan mengoptimalkan peran krioprotektan. Meningkatkan angka fertilitas temak besar dan populasi temak ruminasia melalui program inseminasi buatan. Melalui kajian penelitian molekuler dimaksudkan dapat meningkatkan viabilitas dan kualitas semen beku untuk keperluan inseminasi buatan. Manfaat penelitian ini adalah dengan mengetahui efektivitas krioprotektan terhadap tingkat kerusakan yang ditimbulkan pada DNA spennatozoa sehingga dapat meningkatkan kualitas dari semen beku .. Penelitian ini penting mengingat pembekuan spennatozoa merupakan bagian dari proses penyimpanan spennatozoa untuk keperluan inseminasi buatan. Dewasa ini hasil inseminasi buatan beh'!I11 mampu menopong percepatan perkembangan ternak, teIjadinya kegagalan pembuahan masih sering dijumpai dilapangan. Ha! ini dapat dilihat dari angk<: kebuntingan setelah dilakukan inseminasi buatan. Banyak faktor yang menyebabkan kegagCllan kebuntingan salah satunya kualitas semen beku akibat prosesing spennatozoa. Penelitian !ni meliputi pengukuran motilitas, viabilitas dan konselltrasi spennatozoa sapi setelah mengalami proses pemb~kuan, Pemeriksaan integritas membran spennotazoa sapi dengan metode Hypoosmotic Swelling Test, Isolasi DNA (NucleoSpin DNA II), Visualisasi RNA dengan menggunakan agarosa I % , Elektroforesis gel agarosa, Kuantifikasi konsentrasi DNA dengan menggunakan spektrofotometer, pemeriksaan mutasi DNA dengafl RT peR. Keluaran yang dihasilakan dari penditian ini adalah m~ngidentif:kasi kerusak:m DNA pada semen beku sehingga dapat mengoptima!isasi produksi semEn beku

PRODUKSI PROTEIN TYROSIN KINASE HASIL ISOLASI SPERMATOZOA SAPI : Alternatif Meningkatkan Kualitas Produksi Semen Beku

Upaya meningkatkan daya reproduktivitas ternak sapi perah salah satunya adalah dengan teknik Inseminasi Buatan yang telah lama dan sudah diterima oleh masyarakat peternak. Dengan teknik Inseminasi Buatan akan memperbaiki mutu genetik ternak sapi perah dengan membuat semen beku yang berasal dari pejantan unggul, hal ini merupakan salah satu Cara meningkatkan efisiensi reproduksi. Proses pembekuan semen ini juga menimbulkan kendala antara lain Post Thawing Motility (PTM) hanya berkisar 40%, selanjutnya akibat pembekuan dan proses thawing akan mengakibatkan kerusakan akrosoir spermatozoa, kerusakan membran sel dan penurunan sumber energi yang pada akhirnya menyebabkan penurunan motilitas dan metabolisme sel spermatozoa. Kerusakan seluler dari membran plasma spermatozoa sangat terkait dengan kondisi integritas membran, motilitas dan kemampuan spermatozoa untuk membuahi sel telur. Kondisi di atas sangat menentukan angka fertilitas dan produksi embrio in. Fertilisasi dimulai dengan peristiwa pengenalan spesilik sel yang melibatkan membran plasma spermatozoa dengan konstituen glikoprotein zona pelusida (ZP3) Mernbran plasma spermatozoa terdiri dad lipid dan protein. Protein membran ini yang mempunyai peranan dalam proses fertilisasi yakni melalui adhesi spermatozoa � zona pelusida dan mediator utama pengenalan garnet ini adalah tyrosin kinase . Penelitian ini bertujuan untuk melakukan karakterisasi dan isolasi protein tyrosin kinase dari membran spermatozoa sapi peral, sebagai bahan bioaktif yang dapat digunakan untuk meningkatkan kecepatan fusi spermatozoa-zona pelusida dan tujuan jangka panjang adalah menunjang program tnseminasi buatan untuk meningkatkan kualitas dan kuantitas ternak sapi perah. Subyek penelitian ini adalah protein tyrosin kinase yang diperoleh dari hasil pemisahan membran spermatozoa, identifikasi protein membran dengan SDS-PAGe dan isolasi protein tyrosin kinase dengan Elusi. Penelitian ini meliputi aspek-aspek : Pemisahan protein membran plasma spermatozoa sapi perah dengan teknik sentrifugasi Identifikasi PTK dari membran plasma spermatozoa sapi perah dengan SDS PAGE Isolasi PTK dengan teknik elektro elusi Pembuatan anti-PTK pada kelinci lokal jantan serta pengukuran nilai Optical Dens/0 (OD) dengan Indirect ELISA Pengujian laboratoris isolat PTK yang ditambahkan dalam media TCM 199 sebagai media fertilisasi in vitro yang digunakan dalam proses fertilisasi in vitro Sampel yang digunakan dalam penyediaan isolat protein tyrosin kinase adalah semen sapi perah sebanyak 160 ml dari 20 kali pengambilan selanjutnya dilakukan pemisahan dengan sentrifugasi untuk memisahkan pellet (spermatozoa) dengan supernatan (plasma semen). Pellet yang diperoleh dilakukan identifikasi protein dengan SDS-PAGE untuk mendapatkan pita-pita protein, selanjutnya pita-pita protein yang menunjukkan beat molekul 95 kDa dipotong dan dilakukan elusi untuk mendapatkan isolat protein tyrosin kinase. Pembuatan antibodi terhadap protein tyrosin kinase (PTK) digunakan 5 ekor kelinci lokal jantan. satu ekor digunakan sebagai kontrol yaitu disuntik dengan PBS + CFA masing-masing dengan dosis 150 µl/Sc, Perlakuan 2 (P2) sebanyak 2 ekor disuntik dengan PTK + CFA masing-masing dengan dosis 100 µl/Sc, dan Perlakuan 3 (P3) sebanyak 2 ekor disuntik dengan PTK + CFA masing-masing dengan dosis 150 1allSc, booster dilakukan dua kali yaitu pada minggu ke-3 dan minggu ke-7. pengambilan darah (bleeding) dilakukan mulai minggu ke 1, minggu ke 3 s/d minggu ke 11, yang diambil dari vena auricularis. Serum yang diperoleh digunakan untuk uji spesifisitas secara kualitatif dengan metode dot blot dan secara kuantitatif dengan Indirect Elisa. Uji laboratoris isolat PTK dilakuan secara invitro menggunakan oosit yang telah dimaturasi dan semen sear sapi perah yang telah dikapasitasi. Selanjutnya isolat PTK ditambahkan dalarn TCM-199. PO (kontrol) media TCM tanpa penambahan PTK, P1: TCM + i t1 PTK, P2 : TCM + 3 µl PTK, P3 : TCM + 5 pi PTK dan P4 : TCM + 7 µl PTK. Kemudian dibuat 5 tetes mikro 50 µ1 yang mengandung TCM pada masing-masing perlakuan dalam cawan petri, keMudian ditambahkan oosit dan spermatozoa. Kemudian inkubasi dalam inkujator CO2 dan diamati kecepatan fusi spermatozoa-ZP selama 1, 2 dan 3 jam. Rancangan penelitian yang digunakan adalah rancangan acak lengkap sedangkan data kuantitatif dari nilai OD berdasarkan pembacaan dengan Elisa Reader dianalisis dengan Anova. Sedangkan kecepatan fusi spermatozoa- ZP diuji dengan Kruskal Wallis. Hasilnya terlihat gradasi warna biru keunguan yang lebih gelap terdapat pada bleeding ke 4/minggu ke-4 setelah booster I. Selanjutnya gradasi warna lebih gelap juga terlihat pada bleeding ke-8lminggu ke-8 dan bleeding ke-9/minggu ke-9 setelah booster II. Hail ini menunjukkan bahwa konsentrasi antibodi terhadap PTK sangat tinggi path bleeding ke-4, ke-8 dan ke-9 dibandingkan dengan bleeding ke-3,5,6,7, dan 10 karena setelah dilakukan booster maka akan menimbulkan respon imun meningkat. Uji spesifisitas secara kuantitatif dengan Indirect Elisa. Berdasarkan uji statistik menggunakan Kruskal Wallis, kecepatan fusi spermatozoa-zona pelusida pada P1 (39,67),P2 (48,78) ,P3 (57,89) dan P4 (64,72) berbeda nyata dengan PO (16,44) (p&lt;0,05). Sedangkan antara P1, P2 dan P3 secara statistik tidak berbeda nyata (p&gt;0,05). Pada PO (kontrol) tanpa penambahan PTK dalam TCM tampak kumulus oophorus yang mengelilingi oosit masih sangat kompleks dan ikatan antar sel kumulus sangat erat. Hal ini berbeda dengan PI (penambahan 1% PTK dalam TCM), P2 (penambahan 3% PTK dalam TCM) dan P3 (penambahan 5% PTK dalam TCM) terlihat ikatan antar sel-sel kumulus sudah mulai renggang sehingga memudahkan sel spermatozoa mencapai zona pelusida. Sedangkan pada P4 (penambahan 7% PTK dalam TCM) ikatan antar sel-sel kumulus merenggang dan terlepas sehingga set-sel spermatozoa dapat mencapai zona pelusida balikan telah ada yang rnasuk ke dalam ruang perivitelin. Kesimpulan yang dapat diambil dari hash penelitian ini adalah bahwa protein tyrosin kinase (PTK) dapat diisolasi dari membran plasma spermatozoa sapi dengan metode Elusi, Isolat PTK dapat menimbulkan respon imun (antibodi terhadap PTK) pads kelinci jantan dan penambahan isolat PTK dalam TCM dapat meningkatkan kecepatan fusi spermatozoa-zona pelusida. Dari hash penelitian ini dapat disarankan untuk menambahkan isolat PTK dalam media yang digurakan dalam prosesing semen beku yang bertujuan untuk meningkatkan post thawing motility dan pada akhirnya dapat meningkatkan angka kebuntingan pada ternak khususnya sapi pera