Análise histológica e histomorfométrica de um substituto ósseo em calvária de coelhos

Quando uma estrutura óssea apresenta um defeito em tamanho, forma, posição ou volume, a cirurgia reconstrutiva pode ser realizada para reconstruir a estrutura defeituosa. A extensão dos defeitos ósseos da região oral e maxilofacial varia desde pequenas reabsorções alveolares a grandes defeitos resultantes de patologias. Em cada uma dessas circunstâncias, a reabilitação da estrutura normal geralmente é possível com a utilização de enxertos ósseos, que têm sido utilizados há vários séculos, alcançando graus variados de sucesso, o que resulta em melhora estética e funcional. Os enxertos autógenos são considerados os melhores para a reconstrução óssea, porém causam desconforto para o paciente, pois necessitam de um segundo sitio cirúrgico para obtenção do enxerto. Substitutos ósseos sintéticos são uma boa opção para cirurgia de reconstrução óssea e o objetivo deste estudo é avaliar a reparação óssea utilizando o biomaterial aloplástico BoneSource (Stryker Co..Michigan,EUA). Para isso foram utilizados 10 coelhos, fêmeas, da raça Norfolk. Foi realizado um defeito ósseo em cada osso parietal de cada coelho, sendo que um foi preenchido com o biomaterial e o outro com o enxerto autógeno particulado e compactado retirado do osso parietal obtido na confecção das lojas ósseas. O sacrifício dos animais foi realizado nos períodos de 3 e 6 semanas (5 em cada período). A análise das amostras sobre microscopia óptica revelou que tanto nas cavidade cirúrgicas preenchidas por osso autógeno quanto nas preenchidas pelo biomaterial era possível notar neoformação óssea. Os dados obtidos da análise histomorfométrica foram analisados estatisticamente pela Análise de variância e pelo teste de Tukey, sendo que houve diferença estatística entre os tratamentos executados em um mesmo periodo de tempo. Ambos os tratamentos apresentaram um aumento na neoformação óssea ao longo do tempo

Evaluation of mandibular condyle fracture repair and facial symmetry in rats treated with methotrexate

O Metotrexato (MTX) é utilizado em altas doses no tratamento de neoplasias e em baixas doses como antiinflamatório. O objetivo deste estudo foi avaliar a reparação da fratura de côndilo mandibular e a simetria facial em ratos tratados com MTX. Foram utilizados 100 ratos, Wistar, machos que foram submetidos a procedimento cirúrgico utilizando modelo experimental de fratura de côndilo do lado direito. Os ratos foram distribuídos em quatro grupos e receberam os seguintes tratamentos: Controle - soro (um mL/semana); Dexametasona - dexametasona (0,15 mg/Kg); MTX Baixa dose - MTX (três mg/kg/semana); MTX Alta dose - MTX (30 mg/Kg). Os períodos de sacrifício foram de um dia, sete, 15, 30 e 90 dias de pós-operatório (n=cinco). O peso dos animais foi documentado. Foi realizada coleta de sangue para análise bioquímica de proteínas totais e fosfatase alcalina. Foi realizado exame radiográfico das cabeças em norma axial para análise cefalométrica. Foram realizadas mensurações lineares da maxila e mandíbula, bem como angulares do desvio mandibular. As amostras foram processadas histologicamente sendo obtidas lâminas com cortes no sentido coronal. Os dados quantitativos foram submetidos a análises estatísticas (=0,05). Os animais recuperaram peso ao longo do tempo, exceto no grupo MTX Alta dose. Os níveis séricos de proteínas totais mostraram aumento nos períodos iniciais e os de fosfatase alcalina queda nos períodos de formação do calo ósseo no tratamento com MTX. Houve redução no comprimento mandibular com alterações também na maxila e desvio progressivo da mandíbula em relação à base do crânio no grupo MTX Alta dose. A análise histológica revelou que houve reparo da fratura, pela formação de calo ósseo, e das estruturas da articulação sendo que no grupo MTX Alta dose ocorreu um retardo neste processo, havendo desvio do côndilo e em um espécime houve anquilose fibrosa. A histomorfometria revelou que a área de neoformação óssea foi menor no grupo MTX Alta dose. Foi concluído que o tratamento com MTX em alta dose teve efeito deletério na simetria facial de ratos submetidos à fratura do processo condilar e prejudicou a formação do calo ósseo e o reparo da articulação temporomandibular, com possível indução de anquilose fibrosa.low doses as an antiinflammatory. The aim of this study was to evaluate the healing of the mandibular condyle fracture and facial symmetry in rats treated with MTX. 100 Wistar male rats undergone surgery using an experimental model of mandibular condyle fracture of the right side. The rats were distributed in four groups and received the following treatments: Control Saline (1 ml/week); Dexamethasone dexamethasone (0,15mg/kg); MTX Low dose MTX (3 mg/kg/week); MTX High dose MTX (30 mg/kg). Animals were sacrificed at one, seven, 15, 30 and 90 days postoperatively (n=5). Animals body weight were recorded. Blood has been taken to provide the biochemical analysis of total proteins and alkaline phosphatase. Radiographic axial exams from the heads were provided to cephalometric analysis. Linear measures of jaw and mandible, as well as angular measures of the mandibular deviation were done. The samples were histologically processed and coronal sections were obtained. Quantitative data were submitted to statistical analysis (=0,05). The animals regained body weight over the time, except in MTX High dose group. Total protein serum levels demonstrated the increase in initial periods and the alkaline phosphatase levels showed decrease in the periods of bone callus formation. There was reduction in the mandibular length and also changes in the jaw and progressive deviation in the mandible in relation to the skull basis in the MTX High dose group. The histological analysis revealed that there were repair of the bone and temporomandibular joint although in the MTX High dose group there was a delay in this process, in wich there was deviation of the condyle and one specimen was fibrous ankylosis. Histomorphometry revealed that the new bone formation area was lower in MTX High dose group. It was concluded that treatment with high dose MTX had a deleterious effect on facial symmetry of rats submitted to fracture of the condylar process and damaged the bone callus formation and repair of the temporomandibular joint, with possible induction of fibrous ankylosis

Evaluation of the effect of cell sheet of human dental pulp stem cells, associated or not with photobiomodulation therapy, on experimental condyle fracture repair in rats

A fratura de côndilo da mandíbula (FC) é comum entre os traumas craniomaxilofaciais. Uma intervenção cirúrgica, associada à engenharia tecidual mediada por célulastronco da polpa dentária humana (hDPSC) e à terapia de fotobiomodulação (PBMT), poderiam ser aplicadas para buscar a regeneração da FC melhorando o desfecho do tratamento. O objetivo deste estudo será avaliar o efeito da utilização de Cell Sheets (CS) de células-tronco da polpa dentária humana (hDPSC), associada ou não à PBMT, no reparo de FC em ratos. hDPSC foram marcadas com BrdU, para realização do rastreamento celular, e induzidas a formação de CSs pela suplementação de vitamina C ao meio de cultura (As células foram caracterizadas por imunocitometria de fluxo). 72 ratos Wistar, machos, adultos foram distribuidos em quatro grupos experimentais com 18 espécimes cada. I: Controle - FC sem tratamento adicional; II: FC + PBMT; III: Cell Sheet - FC+CS envolvendo o traço de fratura; IV: Cell Sheet +PBMT. A PBMT foi realizada com laser de diodo AlGaAs (808 nm, 40 mW, 0,028 cm2 , 1,42 W/cm2 , 3 s, 4 J/cm2 e 0,12 J) 0, 48 e 96 horas após a cirurgia. O peso dos animais foi documentado. 15, 30 e 90 dias de pós-operatório (n=6) os animais foram eutanasiados e o crânio fixado e submetido a microtomografia computadorizada (MicroCT), análises histológica (H&E), histoquímica (Tricrômio de Masson e PicroSírius Red) e imunoistoquímica (cell tracking-BrdU). Os dados foram analisados estatisticamente (? = 0,05). Os animais recuperaram o peso corporal ao longo do tempo, exceto no grupo III (p = 0,818). Neste último grupo, os animais tiveram um efeito deletério na simetria facial. A CS também acelerou e aumentou a neoformação do reparo ósseo, resultando em um maior volume ósseo no período de 15 dias (p < 0.01). Houve aumento da presença de tecido de granulação e cartilaginoso na formação do calo e o processo condilar permaneceu desviado no grupo III em 90 dias. A presença de células positivas para BrdU foi confirmada por imunoistoquímica nos grupos III e IV. As células BrdU-positivas se apresentavam mais organizadas no grupo IV. Em conclusão, a CS de hDPSC melhora a neoformação óssea, porém prejudica a reorganização da articulação temporomandibular na FC. A associação de PBMT melhorou o reparo da fratura. Esses achados podem contribuir para o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento para o reparo ósseo.Mandibular condylar fractures (CF) are common in craniomaxillofacial traumatology. Surgical intervention with tissue engineering, mediated by stem cells harvested from human dental pulp (hDPSC), and photobiomodulation therapy (PBMT), could be applied to seek CF regeneration. The study aimed to evaluate the effect of cell sheets of hDPSC (CS), with or without PBMT, on the CF repair in rats. The hDPSC were collabeled with BrdU, to cell tracking, and induced 10 days by vitamin C (20?g/ml) into became CS (characterized by flow immunocytometry). An experimental model of CF was used. Seventy-two Wistar rats, adult, males were randomly distributed into 4 groups. I: CF (Control); II: CF+PBMT; III: CF+CS grafted involving the fracture line; IV: CF+CS+PBMT. PBMT was carried out with AlGaAs diode laser (808 nm, 40 mW, 0.028 cm2 beam area, 1 W/cm2 , 3 s, 4 J/cm2 , 0.12 J/point) at 0, 48 and 96 hours after surgery. Body weight were recorded. 15, 30 and 90 days postoperatively (n=6) the animals were euthanized. The skulls were fixed and submitted to micro-computed tomography (µCT), histologic (H&E, Masson\'s trichrome and PicroSirius Red stain), and immunohistochemistry (BrdU cell tracking) analysis. Data were analyzed statistically (? = 0.05). Animals regained body weight over time, except in group III (p = 0,818). In this latter group the animals had a deleterious effect on the facial symmetry. CS also accelerated bone repair, resulting in a higher bone volume at 15 days (p < 0.01). There was an increased presence of granulation and cartilaginous tissues in the forming callus and the condylar process remained deviated in the group III at 90 days. The presence BrdU-positive cells was confirmed by histological staining in groups III and IV. The BrdU-positeve cells were well organized in group IV. In conclusion hDPSC CS improve new bone formation however impaired the reorganization of temporomandibular joint in CF. The association of PBMT improved the fracture repair. These findings may contribute to the development of new strategies to bone regeneration

Facial symmetry evaluation after experimentally displaced condylar process fracture in methotrexate treated rats Avaliação da simetria facial após fratura experimental com desvio do processo condilar em ratos tratados com metotrexato

PURPOSE: To investigate the facial symmetry of high and low dose methotrexate (MTX) treated rats submitted to experimentally displaced mandibular condyle fracture through the recording of cephalometric measurements. METHODS: One hundred male Wistar rats underwent surgery using an experimental model of right condylar fracture. Animals were divided into four groups: A - saline solution (1mL/week); B - dexamethasone (DEX) (0,15mg/Kg); C - MTX low dose (3 mg/Kg/week); D - MTX high dose (30 mg/Kg). Animals were sacrificed at 1, 7, 15, 30 and 90 days postoperatively (n=5). Body weight was recorded. Specimens were submitted to axial radiographic incidence, and cephalometric mensurations were made using a computer system. Linear measurements of skull and mandible, as well as angular measurements of mandibular deviation were taken. Data were subjected to statistical analyses among the groups, periods of sacrifice and between the sides in each group (&#945;=0.05). RESULTS: Animals regained body weight over time, except in group D. There was reduction in the mandibular length and also changes in the maxilla as well as progressive deviation in the mandible in relation to the skull basis in group D. CONCLUSION: Treatment with high dose methotrexate had deleterious effect on facial symmetry of rats submitted to experimentally displaced condylar process fracture.<br>OBJETIVO: Avaliar a simetria facial de ratos tratados com metotrexato (MTX), em dose alta e baixa, submetidos à fratura experimental do processo condilar com desvio por meio de mensurações cefalométricas. MÉTODOS: Cem ratos Wistar machos foram submetidos a procedimento cirúrgico utilizando modelo experimental de fratura de côndilo do lado direito. Os animais foram distribuídos em quatro grupos: A - soro fisiológico (1mL/semana); B - dexametasona (DEX) (0,15mg/Kg); C - MTX baixa dose (3mg/Kg/semana); D - MTX alta dose (30mg/Kg). Os períodos de sacrifício foram de 1, 7, 15, 30 e 90 dias de pós-operatório (n=5). O peso dos animais foi documentado. Foram realizadas mensurações lineares da maxila e da mandíbula, bem como angulares do desvio mandibular. Os dados foram submetidos a análises estatísticas entre os grupos, períodos de sacrifício e entre os lados em cada grupo (&#945;=0,05). RESULTADOS: Os animais recuperaram peso ao longo do tempo, exceto no grupo D. Houve redução no comprimento mandibular com alterações também na maxila e desvio progressivo da mandíbula em relação à base do crânio no grupo D. CONCLUSÃO: O tratamento com metotrexato em alta dose teve efeito deletério na simetria facial de ratos submetidos à fratura do processo condilar