Gibberellins Regulate Ovule Integument Development by Interfering with the Transcription Factor ATS

[EN] Gibberellins (GAs) are plant hormones that regulate most plant life cycle aspects, including flowering and fruit development. Here, we demonstrate the implication of GAs in ovule development. DELLA proteins, negative GA response regulators, act as positive factors for ovule integument development in a mechanism that involves transcription factor ABERRANT TESTA SHAPE (ATS). The seeds of the della global mutant, a complete loss-of-function of DELLA, and the ats-1 mutant are remarkably similar, with a round shape, a disorganized testa, and viviparism. These defects are the result of an alteration in integuments that fail to fully develop and are shorter than in wild-type plants. ats-1 also shows some GA-related phenotypes, for example, higher germination rates and early flowering. In fact, ats-1 has elevated GA levels due to the activation of GA biosynthesis genes, which indicates that ATS inhibits GA biosynthesis. Moreover, DELLAs and ATS proteins interact, which suggests the formation of a transcriptional complex that regulates the expression of genes involved in integument growth. Therefore, the repression of GA biosynthesis by ATS would result in the stabilization of DELLAs to ensure correct ATS-DELLA complex formation. The requirement of both activities to coordinate proper ovule development strongly argues that the ATS-DELLA complex acts as a key molecular factor. This work provides the first evidence for a role of GAs in ovule and seed development.This work was supported by grants BIO2011-26302 and BIO2014-55946 from the Spanish Ministry of Science and Innovation and the Spanish Ministry of Economy and Competitiveness, respectively, and ACOMP/2013/048 and ACOMP/2014/106 from the Generalitat Valenciana to M.A.P.-A. R.S. received a PhD fellowship from the Spanish Ministry of Science and Innovation.Gómez Jiménez, MD.; Ventimilla-Llora, D.; Sacristán Tarrazó, R.; Perez Amador, MA. (2016). Gibberellins Regulate Ovule Integument Development by Interfering with the Transcription Factor ATS. Plant Physiology. 172(4):2403-2415. doi:10.1104/pp.16.01231S24032415172

PRODUCCIÓN DE NANOBODIES EN PLANTAS

Este proyecto se encuentra enmarcado en el campo del molecular farming, en el que las plantas se convierten en biofactorias de moléculas específicas, en este caso de mini-anticuerpos de llama (nanobodies o VHHs). Este trabajo busca la expresión en N. benthamiana de diferentes variantes de VHHs frente a la proteína VP6 de rotavirus, usando para ello el sistema de expresión transitoria Magnicon de Icon Genetics. En primer lugar se ensayó la expresión de una VHH denominada 2B3, probando diferentes localizaciones subcelulares. Los resultados se analizaron mediante Western-blot y Coomassie. Viendo que la expresión es posible, se pasó a la búsqueda de nuevas VHHs para su expresión en una misma planta. Se obtuvieron 3 nuevas VHHs, denominadas a1, a3 y b4, que se clonaron y se agroinfiltraron en N. benthamiana, tanto por separado como en conjunto. Para comprobar si tenía lugar la co-expresión simultánea de las 4 VHHs, y dado que poseen diferentes pIs, el resultado se analizó mediante un gel bidimensional. Los resultados obtenidos parecen indicar que es posible co-expresar en una misma planta varios nanobodies de forma simultánea. Además en este punto se procedió a la cuantificación de las VHH, siendo esta de una cantidad de VHH purificada de 41micrag/gFW. Para comprobar la actividad de las diferentes VHHs frente al antígeno VP6 se realizó un test antígeno-ELISA, en el que se obtuvo un resultado positivo con las 4 VHHs. Estos resultados indican que es posible utilizar el sistema Magnifection para la producción de combinaciones de nanobodies en hojas de N. benthamiana.Sacristán Tarrazó, R. (2009). PRODUCCIÓN DE NANOBODIES EN PLANTAS. http://hdl.handle.net/10251/14473Archivo delegad