Efeito da adição da cantaxantina na produção de embriões bovinos in vitro

Neste trabalho três concentrações diferentes de um antioxidante natural não enzimático (Cantaxantina) foram adicionadas ao meio de maturação in vitro, dois experimentos foram realizados, no primeiro experimento grupos de complexo cumulus-oócitos foram maturados de acordo com os seguintes tratamentos: Controle(C) sem adição de Cantaxantina (155 oócitos), Tratamento (T1), com adição de 1 μM de Cantaxantina ( 153 oócitos), Tratamento 2 (T2) com 0.5 μM de Cantaxantina (153 oócitos) e Tratamento 3 (T3) com 0.25 μM de Cantaxantina (153 oócitos), 24h após a maturação , os oócitos foram desnudados, fixados em solução contendo 3 partes de Etanol absoluto e uma parte de Ácido Glacial Acético por 48 horas em temperatura ambiente. Após a fixação, os oócitos foram colocados em uma solução de Etanol absoluto por 10 minutos e logo após foram corados com Lacmoid a 1% para visualizar os estágios de desenvolvimento nuclear. Os oócitos que mostraram o fuso de metáfase II e/ou o primeiro corpúsculo foram classificados como oócitos maturados. A taxa de maturação nuclear não mostrou diferença significativa entre os tratamentos (P>0.05), a porcentagem dos oócitos que atingiram à MII foi C, T1, T2, e T3, 74.8%, 74.17%, 78%, e 77.9% respectivamente. Apesar de não ter sido observado diferença estatística entre os tratamentos, o Tratamento T2 apresentou maior taxa de oócitos com maturação nuclear, por esse motivo foi utilizada na segunda etapa do experimento para comparação com o grupo controle. No segundo experimento foram utilizados 118 e 113 oócitos nos grupos Controles e Tratamento, respectivamente, com o objetivo de avaliar o efeito da Cantaxantina no desenvolvimento embrionário in vitro. Os dados foram analisados utilizando o procedimento logistc e software (2002). Não houver diferença estatística (P>0.05), entre taxas de clivagem 48 horas após a fertilização in vitro (C:72.9%, e T2: 76%), da mesma forma a taxa de blastocistos (C:44.9%, e T2: 39.8%), não apresentou diferença significativa (P>0.05). No que concerne os estágio de desenvolvimento embrionário 168 horas após a fertilização in vitro, as taxas de blastocisto inicial (C:2.54 %, e T2: 8.84%), e blastocisto (C:11 %, e T2: 3.53%) mostraram diferença estatística (P0.05), entre C, e T2, em relação a Blastocisto expandido(17,79% e 1355%) Blastocisto eclodido (19,46% e 7.97%); os resultados deste trabalho demonstraram que a utilização da Cantaxantina no meio de maturação não incrementar a produção de embriões produzidos in vitro.In this work three different concentrations of a natural nonenzymatic antioxidant (Canthaxanthin) were added to in vitro maturation medium, the work consisted of two experiments, in the first experiment groups of oocyte-cumulus complex were matured, without Canthaxanthin, (Control Group C, 155 oocytes), with 1 μM (T1 Group, 153 oocytes), with 0.5 μM (T2 Group, 153 oocytes), and with 0.25 μM (T1 Group, 153 oocytes), 24h after in vitro maturation, the oocytes of each group were denuded, fixed, then stained with Lacmoid 1% to visualize the oocytes´ nuclei, the oocytes that showed the metaphase II spindle and/or the first polar body were classified as maturated oocytes, the nuclear maturation rate did not show significant difference between the experimental groups (P>0.05), the percentage of the oocytes that reached the MII was C, T1, T2, and T3, 74.8%, 74.17%, 78%, and 77.9%, respectively, the concentration of 0.5 μM (T2) showed the highest nuclear maturation rate among the experimental groups, so it was utilized in the second experiment. In the second experiment two groups were utilized (C, and T2 118, and 113, respectively), to verify the effect of Canthaxanthin on the in vitro embryonic development, neither the cleavage rates (C:72.9%, and T2: 76%), nor the total blastocyst rates (C:44.9%, and T2: 39.8%) showed significant difference (P>0.05), after the classification of embryonic development stages (168 hpi), the early blastocyst rate (C:2.54 %, and T2: 8.84%), and the blastocyst rate (C:11 %, and T2: 3.53%) showed a significant differences (P<0.05), but the other stages did not show significant differences (P<0.05), (C, and T2, expanded blastocyst, and hatched blastocyst, 17.8%, 13.6%, and 19.5%, 8% respectively); the results of our work showed that the Canthaxanthin did not affect the nuclear maturation of the in vitro matured oocytes, or the in vitro embryo production.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPE

PARÂMETROS SEMINAIS DE CAPRINOS TRANSGÊNICOS E NÃO TRANSGÊNICOS PARA O FATOR ESTIMULANTE DE COLÔNIA DE GRANULÓCITOS HUMANO

The goat species has become an excellent animal model aiming at the production of recombinant proteins in milk. Obtaining transgenic founder males is important, as they make it possible to increase the number of transgenic offspring by simply using artificial insemination. The objective of this work was to compare the seminal parameters of male transgenic (TG) and non-transgenic (NTG) goats for the human Granulocyte Colony Stimulating Factor (hG-CSF). For this purpose, weekly semen samples were collected from all animals through an artificial vagina. The following parameters were evaluated: volume, mass motility, sperm concentration, progressive individual motility (MIP), vigor and sperm pathologies. Statistical differences were observed only for volume and MIP, which had higher values ​​(p&lt;0.05) in TG animals. It was also observed, in both groups, a small percentage of spermatic pathologies (&lt;2%), with no statistical difference (p&gt;0.05). In conclusion, the presence of the transgene did not affect semen quality, favoring and contributing to the formation of a transgenic herd.A espécie caprina tornou-se um excelente modelo animal objetivando a produção de proteínas recombinantes no leite. A obtenção de machos fundadores transgênicos é importante, pois os mesmos permitem aumentar o número de crias transgênicas pelo simples uso da inseminação artificial. Este trabalho teve por objetivo, comparar a parâmetros seminais de machos caprinos transgênicos (TG) e não transgênicos (NTG) para o Fator Estimulante de Colônia de Granulocítos humano (hG-CSF). Para tanto, semanalmente, foram colhidas amostras de sêmen de todos os animais através de vagina artificial. Foram avaliados os seguintes parâmetros: volume, motilidade massal, concentração espermática, motilidade individual progressiva (MIP), vigor e patologias espermáticas. Foram observadas diferenças estatísticas somente para volume e MIP, os quais tiveram valores superiores (p&lt;0,05) nos animais TG. Observou-se também, em ambos os grupos, um pequeno percentual de patologias espermáticas (&lt;2%), sem diferença estatística (p&gt;0,05). Em conclusão, a presença do transgene não afetou a qualidade do sêmen favorecendo e contribuindo para formação de um rebanho transgênico