Regional differences in the number and type of myenteric neurons of the ileum of rats: a comparison of techniques of the neuronal evidentiation Diferenças regionais no número e tipo de neurônios mientéricos do íleo de ratos: comparação entre técnicas de evidenciação neuronal

We carried out this study with the purpose of analyzing the density of neurons of the myenteric plexus in the mesenteric, intermediate and antimesenteric regions of the ileum of rats. Whole-mounts stained with four different techniques were employed. Through countings under optic microscope in an area of 8.96 mm² we found the following neuronal means with the techniques of Giemsa, NADH-diaphorase histochemistry, NADPH-diaphorase and acetylcholinesterase, respectively: mesenteric region 2144.40±161.05, 1657.80±88.23, 473.80±19.62, 905.25±22.40; intermediate region 1790.60±128.24, 1265.20±141.17, 371.30±27.84, 770.25±33.12; antimesenteric region 1647.0±76.67, 981.80±68.04, 298.50±22.75, 704.50±69.38. We conclude that there is a variation of neuronal density around the intestinal circumference and this fact independs on the technique used to stain the neurons, and that in a single region the neuronal density varies with the technique employed. We also call attention for the identification of the site were countings were carried out, so that the results of research in this area are not compromised.<br>Realizamos este estudo com o objetivo de analisar a densidade de neurônios do plexo mientérico nas regiões mesentérica, intermediária e antimesentérica do íleo de ratos. Empregamos preparados de membrana corados por 4 diferentes técnicas. Através de contagens sob microscópio óptico em uma área de 8,96 mm² encontramos com as técnicas de Giemsa, histoquímica da NADH-diaforase, NADPH-diaforase e acetilcolinesterase, respectivamente as seguintes médias neuronais: região mesentérica 2144,40±161,05, 1657,80±88,23, 473,80±19,62, 905,25±22,40; região intermediaria 1790,60±128,24, 1265,20±141,17, 371,30±27,84, 770,25±33,12; região antimesentérica 1647,0±76,67, 981,80±68,04, 298,50±22,75, 704,50±69,38. Concluimos que há uma variação na densidade neuronal ao redor da circunferência intestinal, e este fato independe da técnica utilizada para marcar os neurônios, e que em uma mesma região, a densidade neuronal varia com a técnica utilizada. Também chamamos a atenção para que seja indicado o local onde as quantificações serão realizadas, para que não haja comprometimento dos resultados em pesquisa nesta área

Morphological and quantitative study of the myenteric plexus of the ascending colon of rats subjected to proteic desnutrition Estudo morfológico e quantitativo do plexo mientérico do colo ascendente de ratos submetidos a desnutrição protéica

We carried out this study with the purpose of contributing on the effects of the proteic desnutrition on the morphological aspects and quantitative analysis of the neurons in the myenteric plexus of the ascending colon of adult Rattus norvegicus. Twenty adult rats were divided into two groups; in one of them, we offered a normal ration with proteic level of 22% (control group) and in the other, a ration with a proteic level of 8% (experiment group) during 120 days. We did the whole-mount preparations for the ascending colon and stained them with the Giemsa technique and the histochemical technique of NADH-diaphorase. The rats with proteic desnutrition showed a body weight, on average, to be 35.1% less than those of the control group, and the colon was on average, 26.8% shorter and 6.7% narrower. Thus, it was to be expected that the colon of animals with proteic desnutrition had a neuronal density 31.62% greater than the rats of the control group. Nevertheless, the difference with the Giemsa technique was on average 18.4%, demonstrating a mean neuronal loss of 13.25%.Realizamos este estudo com o objetivo de analisar os efeitos da desnutrição protéica sobre os aspectos morfológicos e quantitativos dos neurônios do plexo mientérico do colo ascendente de Rattus norvegicus adultos. Vinte ratos adultos foram divididos em 2 grupos, sendo que para um dos grupos ofertamos ração normal, com teor protéico de 22% (controle) e para o outro ração com teor protéico de 8% durante 120 dias. Elaboramos os preparados de membrana do colo ascendente e coramos pelo método de Giemsa e pela técnica histoquímica da NADH-diaforase. Os ratos com desnutrição protéica apresentaram peso corporal em média 35,1% menor que os do grupo controle, e o colo era em média 26,8% mais curto e 6,7% mais estreito. Esperava-se que o colo dos animais desnutridos possuíssem uma densidade neuronal 31,62% maior que o dos animais normonutridos; no entanto, a diferença com a técnica de Giemsa foi em média de 18,4%, demonstrando uma perda média de 13,25% dos neurônios

Neurônios NADH-diaforase positivos do jejuno de ratos adultos (Rattus norvegicus) desnutridos: aspectos quantitativos NADH-diaphorase positive neurons of the jejunum of disnurtured adult rats (Rattus norvegicus): quantitative aspects

Temos por objetivo contribuir com informações sobre os aspectos quantitativos dos neurônios mioentéricos NADH-diaforase positivos do jejuno de ratos submetidos a desnutrição protéica. Foram utilizados 10 ratos (90 dias de idade), divididos em grupos: controle (n=5, ±278g) e desnutrido (n=5, ±280g). Nos 120 dias seguintes, os ratos do grupo controle receberam ração com teor protéico de 22%, os do grupo desnutrido, 8%. Ao final deste período, os ratos do grupo controle pesaram ±394,4g e os desnutrido ±273,5g.O jejuno foi submetido à técnica histoquímica da NADH-diaforase para evidenciação de células nervosas em preparado de membranas. Foram contados os neurônios presentes em 80 campos microscópicos em ambos os grupos. Verificaram-se no controle ±674,6 neurônios e no desnutrido ±1326,8 neurônios; A dieta não alterou a organização dos neurônios entretanto, levou a um menor desenvolvimento corporal nos animais desnutridos, contribuindo para que os neurônios destes sofressem menor dispersão e apresentassem maior densidade por mm².<br>We aim at contributing with information on the quantitative aspects of the NADH-diaphorase positive myenteric neurons of the jejunum of adult rats subjected to protein desnutrition. Ten rats aging 90 days were divided into two groups: control (n=5, ±278 g) and disnurtured (n=5, ±280 g). In the following 120 days, the rats from the control group had chow with 22% protein level, and those from the disnurtured group, with 8% protein level. After this period, the control rats weighted ±394.4g and the disnurtured ±273.5g. The jejunum was subjected to the histochemical technique of the NADH-diaphorase to stain nerve cells in whole-mounts. The neurons found in 80 microscopic fields of both groups were counted. In the control ±674.6 neurons were observed, and ±1326.8 neurons were counted in the disnurtured group. The low-protein diet did not alter the organization of the neurons, but led to a smaller body growth in the disnurtured animals, preventing neuronal dispersal and leading to a greater density per mm²

Morphologic and quantitative study of the myenteric neurons of the jejunum of malnourished rats (Rattus norvegicus) Estudo morfológico e quantitativo dos neurônios mientéricos do jejuno de ratos desnutridos (Rattus norvegicus)

We studied the effects of maternal proteic desnutrition on the neurons of the myenteric plexus of the jejunum of rats from Rattus norvegicus species. It was used litters of female rats which received diet with normal proteic level during gestation and lactation (group NN), normal diet during gestation and hypoproteic diet during lactation (group ND); hypoproteic diet during gestation and normal diet during lactation (group DN); hypoproteic diet during both gestation and lactation (group DD). After weaning all the animals received diet of normal proteic level until the 60th day of age, when they were killed. The jejunum of the animals was subjected to whole-mount preparations stained by the method of Giemsa and used for the morphologic and quantitative analyses of the neurons of the myenteric plexus. We verified that maternal proteic malnutrition does not cause decrease on the number of myenteric neurons per unit area of jejunum in rats, but elicits mechanisms which assure that, when the animal again receives normal proteic level diet (22%) there occurs storage of proteic material on the cytoplasm of the neurons, thus rendering them larger and strongly basophylic.<br>Estudamos os efeitos da desnutrição protéica materna sobre os neurônios do plexo mientérico do jejuno de ratos da espécie norvegicus. Utilizamos filhotes de ratas que receberam dieta com teor protéico normal durante a gestação e a lactação (grupo NN), dieta normoprotéica durante a gestação e hipoprotéica durante a lactação (grupo ND); dieta hipoprotéica durante a gestação e normoprotéica durante a lactação (grupo DN); dieta hipoprotéica durante a gestação e lactação (grupo DD). Após o desmame todos os animais receberam dieta com teor protéico normal até os 60 dias de vida ocasião em que foram sacrificados. Preparados de membrana do jejuno foram corados pelo método de Giemsa e foram utilizados para análises morfológicas e quantitativas dos neurônios do plexo mientérico. Verificamos que a desnutrição protéica materna não provoca redução no número de neurônios mientéricos por área do jejuno de ratos, porém desencadeia mecanismos que fazem com que quando o animal volta a receber dieta com teor protéico normal (22%) ocorra acúmulo de material protéico no citoplasma dos neurônios, o que os torna maiores e fortemente basofílicos

Neuron number in the myenteric plexus of the ascending colon of rats: a comparative study using two staining techniques Número de neurônios no plexo mientérico do colon ascendente de ratos: estudo comparativo usando duas técnicas de coloração

We carried out this study with the purpose of comparing the neuronal density in antimesocolic and intermediate regions of the colon of rats. We used the ascending colon of ten seven-months old Wistar rats. With the Giemsa method we found 29046 neurons/cm² on the antimesocolic region and 30968 neurons/cm² on the intermediate regions. With the NADH-diaphorase technique 12308 neurons/cm² on the antimesocolic regions and 8798 neurons/cm² on the intermediate regions were evidenced. The number of NADH-diaphorase positive neurons is significantly less than the number of Giemsa-stained neurons, and that this difference is enhanced on the intermediate regions of the intestinal circumference. Therefore, to compare the number of neurons of an intestinal segment of a same species at the same age, it is necessary to take into consideration the technique employed and the region of the intestinal circumference from where the sample was obtained.<br>Realizamos este estudo com o objetivo de comparar a densidade neuronal evidenciada nas regiões antimesocólica e intermediária do colo de ratos. Utilizamos o colo ascendente de 10 ratos Wistar com 7 meses de idade. Encontramos com o método de Giemsa 29046 neurônios/cm² na região antimesocólica e 30968 neurônios/ cm² nas regiões intermediárias. Com a técnica histoquímica da NADH-diaforase encontramos 12308 neurônios/ cm² na região antimesocólica e 8798 neurônios/cm² nas regiões intermediárias. O número de neurônios NADH-diaforase positivos é significantemente menor que o número de neurônios corados com o método de Giemsa, sendo que esta diferença se acentua nas regiões intermediárias da circunferência intestinal. Portanto, para comparar o número de neurônios de um segmento intestinal de uma mesma espécie e numa mesma idade, é necessário levar em consideração a técnica empregada e a região da circunferência intestinal em que se obteve a amostra