Fungal peritonitis in patients on peritoneal dialysis: Twenty five years of experience in a teaching hospital in Argentina

ABSTRACT Fungal peritonitis is a rare but serious complication of peritoneal dialysis. The aim of this study was to analyze peritonitis rates, associated factors, clinical course, microbiological aspects, therapeutic regimens, and outcome of patients with fungal peritonitis in the dialysis center of a teaching hospital over the last 25 years. A hundred and eighty three episodes of peritonitis were detected and microbiologically documented in 57 patients. Fungi were identified in eight episodes (4.37%) occurring in seven female patients. The fungal peritonitis rate was 0.06 episodes/patient-year. Gram and Giemsa stains were positive in five out of eight dialysate fluids. The causative microorganisms were: Candida albicans in five episodes, and Candida parapsilosis, Candida glabrata, and Neosartorya hiratsukae in the remaining three. Antibiotics were administered to all but one patient, within 3 months before fungal peritonitis was detected. All patients required hospitalization, and antifungal therapy was administered in all episodes. The Tenckhoff catheter was removed in seven out of eight fungal peritonitis. All patients recovered from the fungal episodes. In the group of patients studied, it is concluded that recent exposure to antibiotics and female sex, were strongly associated with the development of fungal peritonitis by yeasts. The peritonitis caused by the environmental filamentous fungus did not require antibiotic pressure. Direct microscopy of the dialysate pellet was extremely useful for the prompt management of the fungal episode. Fungal peritonitis preceded by multiple episodes of bacterial peritonitis always determined the definitive dropout of the patient from the peritoneal dialysis program. Patients with de novo yeastrelated peritonitis could continue on the program. Key words: peritoneal dialysis, fungal peritonitis, peritonitis rates, causative microorganisms, Candida albicans, Candida spp. RESUMEN Peritonitis fúngica en pacientes en diálisis peritoneal: la experiencia de 25 años en un hospital universitario de la Argentina. La peritonitis fúngica es una complicación infrecuente pero grave de la diálisis peritoneal. Los objetivos de este trabajo fueron el análisis de las tasas de peritonitis, factores asociados, aspectos clínicos y microbiológicos, esquemas terapéuticos y evolución de los pacientes afectados. Se detectaron y documentaron microbiológicamente 183 episodios de peritonitis en 57 pacientes. Se identificaron hongos en ocho episodios (4,37%) en siete pacientes, todos ellos de sexo femenino. La tasa de peritonitis fúngica fue 0,06 episodios/paciente-año. Las coloraciones de Gram y Giemsa revelaron la presencia de microorganismos en cinco de los ocho líquidos de diálisis evaluados. Los microorganismos causales fueron Candida albicans en cinco episodios y Candida parapsilosis, Candida glabrata y Neosartorya hiratsukae en los otros tres. Todos estos pacientes, excepto uno, habían recibido antibióticos en los tres meses previos al episodio de peritonitis fúngica. El catéter de Tenckhoff fue extraído en siete de los ocho episodios. Todos los pacientes evolucionaron favorablemente. Concluimos que en la población estudiada el sexo femenino y la administración reciente de antibióticos estuvieron estrechamente relacionados con el desarrollo de peritonitis fúngicas por levaduras. Sin embargo, la peritonitis causada por el hongo filamentoso ambiental no requirió de la presión antibiótica. La microscopía del sedimento del líquido de diálisis fue útil en el manejo precoz del episodio. La peritonitis fúngica precedida por múltiples episodios de peritonitis bacteriana determinó siempre la exclusión definitiva del paciente del programa de diálisis peritoneal. Los pacientes con peritonitis de novo por levaduras, en cambio, pudieron continuar en él

Genotypic identification of methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci by polymerase chain reaction.

A rapid method for the detection of methicillin resistance in staphylococci was developed. The method was based on the polymerase chain reaction (PCR) and primers that targeted the internal region of the coding frame of the mec gene. The amplification reaction was carried out with crude cell lysates as a source of target DNA and provided data in less than 5 h. Seventy-four isolates of coagulase-negative staphylococci were tested by PCR, DNA hybridization with a probe derived from the mec gene, and an agar dilution susceptibility assay. PCR results showed a 100% correlation with the susceptibility assay carried out with high inocula (10(8) CFU) and incubation at 32 degrees C for 48 h. PCR was more sensitive and specific than DNA hybridization in detecting methicillin resistance in coagulase-negative staphylococci. The former technique identified the mec gene in all the strains which were phenotypically resistant but which did not hybridize with the probe. Identification of methicillin-resistant strains by PCR offers a very specific, sensitive, and rapid alternative to traditional susceptibility tests and DNA hybridization as a guide for the treatment of infections caused by staphylococci

Detection of penicillin-binding proteins immunologically related to penicillin-binding protein 5 of Enterococcus hirae ATCC 9790 in Enterococcus faecium and Enterococcus faecalis

Penicillin-binding protein (PBP) 5 of Enterococcus hirae ATCC 9790 belongs to the class of the high-molecular mass, low-affinity PBPs which have been correlated with penicillin resistance in most Enterococcus species. Polyclonal antibodies were raised against PBP 5 and used to detect immunologically related membrane proteins in E. faecium and E. faecalis strains. Several strains of both species were found to have a membrane protein of similar molecular mass to E. hirae PBP 5 which reacted with the antibodies. Some E. faecium strains did not react with antibodies but their derivatives with increased penicillin minimal inhibitory concentrations did. In some E. faecalis strains the lack of a PBP 5-related protein was associated with failure to select stable penicillin-resistant derivatives

Fungal peritonitis in patients on peritoneal dialysis: Twenty five years of experience in a teaching hospital in Argentina Peritonitis fúngica en pacientes en diálisis peritoneal: la experiencia de 25 años en un hospital universitario de la Argentina

Fungal peritonitis is a rare but serious complication of peritoneal dialysis. The aim of this study was to analyze peritonitis rates, associated factors, clinical course, microbiological aspects, therapeutic regimens, and outcome of patients with fungal peritonitis in the dialysis center of a teaching hospital over the last 25 years. A hundred and eighty three episodes of peritonitis were detected and microbiologically documented in 57 patients. Fungi were identified in eight episodes (4.37%) occurring in seven female patients. The fungal peritonitis rate was 0.06 episodes/patient-year. Gram and Giemsa stains were positive in five out of eight dialysate fluids. The causative microorganisms were: Candida albicans in five episodes, and Candida parapsilosis, Candida glabrata, and Neosartorya hiratsukae in the remaining three. Antibiotics were administered to all but one patient, within 3 months before fungal peritonitis was detected. All patients required hospitalization, and antifungal therapy was administered in all episodes. The Tenckhoff catheter was removed in seven out of eight fungal peritonitis. All patients recovered from the fungal episodes. In the group of patients studied, it is concluded that recent exposure to antibiotics and female sex, were strongly associated with the development of fungal peritonitis by yeasts. The peritonitis caused by the environmental filamentous fungus did not require antibiotic pressure. Direct microscopy of the dialysate pellet was extremely useful for the prompt management of the fungal episode. Fungal peritonitis preceded by multiple episodes of bacterial peritonitis always determined the definitive dropout of the patient from the peritoneal dialysis program. Patients with de novo yeastrelated peritonitis could continue on the program.La peritonitis fúngica es una complicación infrecuente pero grave de la diálisis peritoneal. Los objetivos de este trabajo fueron el análisis de las tasas de peritonitis, factores asociados, aspectos clínicos y microbiológicos, esquemas terapéuticos y evolución de los pacientes afectados. Se detectaron y documentaron microbiológicamente 183 episodios de peritonitis en 57 pacientes. Se identificaron hongos en ocho episodios (4,37%) en siete pacientes, todos ellos de sexo femenino. La tasa de peritonitis fúngica fue 0,06 episodios/paciente-año. Las coloraciones de Gram y Giemsa revelaron la presencia de microorganismos en cinco de los ocho líquidos de diálisis evaluados. Los microorganismos causales fueron Candida albicans en cinco episodios y Candida parapsilosis, Candida glabrata y Neosartorya hiratsukae en los otros tres. Todos estos pacientes, excepto uno, habían recibido antibióticos en los tres meses previos al episodio de peritonitis fúngica. El catéter de Tenckhoff fue extraído en siete de los ocho episodios. Todos los pacientes evolucionaron favorablemente. Concluimos que en la población estudiada el sexo femenino y la administración reciente de antibióticos estuvieron estrechamente relacionados con el desarrollo de peritonitis fúngicas por levaduras. Sin embargo, la peritonitis causada por el hongo filamentoso ambiental no requirió de la presión antibiótica. La microscopía del sedimento del líquido de diálisis fue útil en el manejo precoz del episodio. La peritonitis fúngica precedida por múltiples episodios de peritonitis bacteriana determinó siempre la exclusión definitiva del paciente del programa de diálisis peritoneal. Los pacientes con peritonitis de novo por levaduras, en cambio, pudieron continuar en él

A 15 year-review of peritoneal dialysis-related peritonitis: Microbiological trends and patterns of infection in a teaching hospital in Argentina Peritonitis en diálisis peritoneal: características microbiológicas y patrones de infección a lo largo de 15 años en un hospital universitario en Argentina

This study reports the infectious peritonitis rates in 44 patients on peritoneal dialysis in three different systems over the last 15 years, covering clinical outcomes, exit-site infections, tunnel infections, causative microorganisms, and the history of susceptibility of organisms causing peritonitis, in order to establish our center-specific selection of empiric therapy. Two microbiological procedures were herein used: method A, where 100 ml of dialysate were centrifuged and cultured in standard media and into blood-culture bottles; and method B, where 10 ml were directly injected into blood-culture bottles. Swabs from the exit-site or tunnel were taken when purulent drainage was observed. There were 96 episodes of peritonitis during 110.43 patient-years (0.87 episodes/patient-year). Sensitivity of method A was 96.88% (93/96 episodes) versus 81.25% (78/96) of method B (p= 0.001). Gram stain sensitivity was 36.46%. The etiologic agents were 64 (56.64%) gram-positive cocci, 22 (19.47%) gram-negative fermentative rods, 20 (17.7%) gram-negative non fermentative rods, 5 (4.43%) yeasts, 1 (0.88%) micelial fungus, and 1 (0.88%) anaerobic rod. Fifty-five exit-site infections were documented (0.5 episodes/patient-year). Ceftazidime and imipenem showed excellent activity on gram-negative rods. There were 92.3% of methicillin-susceptible Staphylococcus aureus but only 33.3% of methicillin-susceptible coagulase- negative staphylococci; vancomycin was active against 100% of the gram-positive cocci. The clinical outcomes of peritonitis were 73 initial cure, 19 catheter removal and four related deaths. The empiric therapy in our center should be vancomycin plus ceftazidime or imipenem. Once the etiological agent and its susceptibility pattern are known, the deescalating therapy must be applied to avoid the emergence and spread of vancomycin-resistant microorganisms.<br>Se comunican las tasas de peritonitis infecciosa de 44 pacientes en tres sistemas diferentes de diálisis peritoneal durante los últimos 15 años. Se evaluaron evolución clínica, infecciones del sitio de salida y del túnel, y los microorganismos causales y su sensibilidad, a fin de seleccionar la mejor terapia empírica para nuestro centro. Se realizaron dos procedimientos microbiológicos, método A: 100 ml del dializado fueron centrifugados y cultivados por métodos convencionales y en frascos para hemocultivo; método B: 10 ml fueron directamente inoculados en frascos para hemocultivo. Los hisopados del sitio de salida y del túnel fueron realizados cuando se observó supuración. Se registraron 96 episodios de peritonitis en 110,43 paciente-años (0,87 episodios/paciente-año). La sensibilidad del método A fue 96,88% versus 81,25% del método B (p = 0,001). La sensibilidad de la coloración de Gram fue 36,46%. La distribución de los agentes etiológicos fue la siguiente: 64 (56,64%) cocos gram-positivos, 22 (19,47%) bacilos gram-negativos fermentadores, 20 (17,7%) bacilos gram-negativos no fermentadores, 5 (4,43%) levaduras, 1 (0,88%) hongo micelial, 1 (0,88%) bacilo anaerobio. Fueron documentadas 55 infecciones del sitio de salida (0,5 episodios/paciente-año). La ceftazidima y el imipenem mostraron una excelente actividad sobre los bacilos gram-negativos. La sensibilidad a meticilina fue de 92,3% para Staphylococcus aureus y 33,3% para estafilococos coagulasa negativos; la vancomicina fue activa frente al 100% de los cocos gram-positivos. La evolución clínica de las peritonitis fue: 73 curas, 19 remociones de catéter y cuatro muertes relacionadas. La terapia empírica en nuestro centro debería ser vancomicina más ceftazidima o imipenem. Una vez conocidos el agente etiológico y su sensibilidad, se debería aplicar la terapia de desescalonamiento para evitar la emergencia y diseminación de microorganismos resistentes a la vancomicina

Susceptibility trends of Bacteroides fragilis group isolates from Buenos Aires, Argentina Tendencias en el perfil de sensibilidad de aislamientos del grupo Bacteroides fragilis obtenidos en Buenos Aires, Argentina

The aim of this study was to analyze the susceptibility trends to seven antibiotics of Bacteroides fragilis group isolates based on three survey studies performed by the Committee of Anaerobic Bacteria between 1989 and 2002. Fifty three, 82 and 65 B. fragilis group isolates were collected during each period. The antimicrobial agents included were: ampicillin, ampicillin-sulbactam (2:1), cefoxitin, piperacillin, imipenem, clindamycin, and metronidazole. Minimal inhibitory concentrations (MICs) were determined according to the reference agar dilution method described by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, formerly NCCLS). The most active antibiotics for B. fragilis and non- B. fragilis species throughout the three periods were: imipenem with 99.1 and 100% of activity, respectively, and metronidazole with 100% of activity. The susceptibility to ampicillin-sulbactam showed a decrease, from 100% to 90.3% and to 82.4 % in the last period, for both B. fragilis and non-B. fragilis species, respectively. The overall susceptibility rates for cefoxitin, piperacillin, and clindamycin were significantly different between B. fragilis and non-B. fragilis species (84.2% vs. 56.5%; 85.9% vs. 66.7% and 88.8% vs. 64.7%, respectively, p< 0.05). Cefoxitin was the antibiotic that showed more variations as regards periods and species. The susceptibility rates for clindamycin were low, about 60%, for non-B. fragilis species during the last two periods. The variations observed in the susceptibility patterns of the B. fragilis group isolates emphasize the need to continue monitoring the emergence of resistance in order to guide the election of the most appropriate antibiotic therapy scheme for anaerobic infections.<br>El objetivo de este estudio fue evaluar las variaciones en el perfil de sensibilidad frente a siete antimicrobianos de aislamientos del grupo Bacteroides fragilis, mediante el análisis de tres relevamientos realizados por la Subcomisión de Bacterias Anaerobias de la Asociación Argentina de Microbiología (años 1989-1991, 1996-1998 y 1999-2002). En los citados períodos se recolectaron 53, 82 y 65 aislamientos del grupo B. fragilis. Se evaluó la actividad de: ampicilina, ampicilina-sulbactama (2:1), cefoxitina, piperacilina, imipenem, clindamicina y metronidazol. La concentración inhibitoria mínima (CIM) se determinó utilizando el método de dilución en agar, según las normas del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, anteriormente NCCLS). En los tres períodos considerados, los antibióticos más activos frente a aislamientos de la especie B. fragilis como así también frente a aislamientos pertenecientes a otras especies del grupo B. fragilis fueron imipenem, con 99,1 y 100% de actividad, respectivamente, y metronidazol, con 100% de actividad. Con ampicilina-sulbactama se observó a lo largo del tiempo una disminución de la sensibilidad, desde el 100% en el primer período hasta un 90,3 y 82,4% en el último, para B. fragilis y para especies del grupo distintas de B. fragilis, respectivamente. Cuando se consideraron los tres períodos juntos, se observaron diferencias significativas entre la especie B. fragilis y los restantes aislamientos del grupo para cefoxitina, piperacilina y clindamicina (84,2% vs. 56,5%; 85,9% vs. 66,7% and 88,8% vs. 64,7%, respectivamente, p< 0.05). Cefoxitina fue el antibiótico que mostró mayores variaciones a través del tiempo y entre especies. Las tasas de sensibilidad a clindamicina fueron bajas (alrededor del 60%) entre los aislamientos no pertenecientes a la especie B. fragilis durante los últimos dos períodos. Las variaciones observadas en los perfiles de sensibilidad del grupo B. fragilis muestran la necesidad de vigilar periódicamente la emergencia de resistencia a los antimicrobianos, a fin de orientar el tratamiento de las infecciones por bacterias anaerobias