Beclin 1

Beclin 1/ATG6/Vps30 (UniProtKB/Swiss-Prot Q14457) is a 450 amino-acids length protein, with three domains; BH3 (aminoacid 114 to 123), Coiled Coil domain (CCD; aminoacid 144 to 269) and the Evolutionarily Conserved Domain (ECD; aminoacid 244 to 337). BH3 proteins are part of the Bcl-2 family; they are pro-apoptotic damage sensors that play an important role in protecting against cancer (1). The BH3-only domain of Beclin 1 can interact with Bcl-2 and Bcl-XL (2;3). Both cellular and viral Bcl-2 (vBcl-2), or more specifically ER-targeted Bcl-2, inhibit Beclin 1-dependent autophagy by interfering with the Beclin 1-PtdIns 3-kinase interaction (PI3K) and the Beclin 1-associated PI3K activity (3,4). The interaction between Bcl-2 and Beclin 1 is greatly reduced upon starvation, which suggests that the dissociation of Bcl-2 from Beclin1 is important for activating autophagy. We demonstrated that, VMP1 (Vacuole Membrane Protein 1) displaces Bcl-2 from Beclin 1, partitioning Beclin 1 to the autophagic pathway (Molejon et al., Sci Rep. 2012; In press).Fil: Molejon, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; ArgentinaFil: Ropolo, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; ArgentinaFil: Vaccaro, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentin

A Novel E2F1-EP300-VMP1 Pathway Mediates Gemcitabine-Induced Autophagy in Pancreatic Cancer Cells Carrying Oncogenic KRAS

Autophagy is an evolutionarily preserved degradation process of cytoplasmic cellular constituents, which participates in cell response to disease. We previously characterized VMP1 (Vacuole Membrane Protein 1) as an essential autophagy related protein that mediates autophagy in pancreatic diseases. We also demonstrated that VMP1-mediated autophagy is induced by HIF-1A (hypoxia inducible factor 1 subunit alpha) in colon-cancer tumor cell lines, conferring resistance to photodynamic treatment. Here we identify a new molecular pathway, mediated by VMP1, by which gemcitabine is able to trigger autophagy in human pancreatic tumor cell lines. We demonstrated that gemcitabine requires the VMP1 expression to induce autophagy in the highly resistant pancreatic cancer cells PANC-1 and MIAPaCa-2 that carry activated KRAS. E2F1 is a transcription factor that is regulated by the retinoblastoma pathway. We found that E2F1 is an effector of gemcitabine-induced autophagy and regulates the expression and promoter activity of VMP1. Chromatin immunoprecipitation assays demonstrated that E2F1 binds to the VMP1 promoter in PANC-1 cells. We have also identified the histone acetyltransferase EP300 as a modulator of VMP1 promoter activity. Our data showed that the E2F1-EP300 activator/co-activator complex is part of the regulatory pathway controlling the expression and promoter activity of VMP1 triggered by gemcitabine in PANC-1 cells. Finally, we found that neither VMP1 nor E2F1 are induced by gemcitabine treatment in BxPC-3 cells, which do not carry oncogenic KRAS and are sensitive to chemotherapy. In conclusion, we have identified the E2F1-EP300-VMP1 pathway that mediates gemcitabine-induced autophagy in pancreatic cancer cells. These results strongly support that VMP1-mediated autophagy may integrate the complex network of events involved in pancreatic ductal adenocarcinoma chemo-resistance. Our experimental findings point at E2F1 and VMP1 as novel potential therapeutic targets in precise treatment strategies for pancreatic cancer.Fil: Ropolo, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Catrinacio, Cintia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Renna, Felipe Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Boggio, Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Orquera, Tamara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: González, Claudio Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. CEMIC-CONICET. Centro de Educaciones Médicas e Investigaciones Clínicas "Norberto Quirno". CEMIC-CONICET; ArgentinaFil: Vaccaro, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentin

The VMP1-Beclin 1 interaction regulates autophagy induction

Fil: Molejon, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Ciencias Fisiológicas; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina;Fil: Ropolo, Alejandro Javier. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Ciencias Fisiológicas; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina;Fil: Lo Ré, Andrea Emilia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Ciencias Fisiológicas; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina;Fil: Boggio, Veronica Ines. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina;Fil: Vaccaro, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina

Mitochondrial Dynamics and VMP1-Related Selective Mitophagy in Experimental Acute Pancreatitis

Mitophagy and zymophagy are selective autophagy pathways early induced in acute pancreatitis that may explain the mild, auto limited, and more frequent clinical presentation of this disease. Adequate mitochondrial bioenergetics is necessary for cellular restoration mechanisms that are triggered during the mild disease. However, mitochondria and zymogen contents are direct targets of damage in acute pancreatitis. Cellular survival depends on the recovering possibility of mitochondrial function and efficient clearance of damaged mitochondria. This work aimed to analyze mitochondrial dynamics and function during selective autophagy in pancreatic acinar cells during mild experimental pancreatitis in rats. Also, using a cell model under the hyperstimulation of the G-coupled receptor for CCK (CCK-R), we aimed to investigate the mechanisms involved in these processes in the context of zymophagy. We found that during acute pancreatitis, mitochondrial O2 consumption and ATP production significantly decreased early after induction of acute pancreatitis, with a consequent decrease in the ATP/O ratio. Mitochondrial dysfunction was accompanied by changes in mitochondrial dynamics evidenced by optic atrophy 1 (OPA-1) and dynamin-related protein 1 (DRP-1) differential expression and ultrastructural features of mitochondrial fission, mitochondrial elongation, and mitophagy during the acute phase of experimental mild pancreatitis in rats. Mitophagy was also evaluated by confocal assay after transfection with the pMITO-RFP-GFP plasmid that specifically labels autophagic degradation of mitochondria and the expression and redistribution of the ubiquitin ligase Parkin1. Moreover, we report for the first time that vacuole membrane protein-1 (VMP1) is involved and required in the mitophagy process during acute pancreatitis, observable not only by repositioning around specific mitochondrial populations, but also by detection of mitochondria in autophagosomes specifically isolated with anti-VMP1 antibodies as well. Also, VMP1 downregulation avoided mitochondrial degradation confirming that VMP1 expression is required for mitophagy during acute pancreatitis. In conclusion, we identified a novel DRP1-Parkin1-VMP1 selective autophagy pathway, which mediates the selective degradation of damaged mitochondria by mitophagy in acute pancreatitis. The understanding of the molecular mechanisms involved to restore mitochondrial function, such as mitochondrial dynamics and mitophagy, could be relevant in the development of novel therapeutic strategies in acute pancreatitis.Fil: Vanasco, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Ropolo, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Grasso, Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Ojeda, Diego Sebastian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Garcia, Maria Noe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Vico, Tamara Antonela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Orquera, Tamara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Quarleri, Jorge Fabian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Alvarez, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Vaccaro, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentin

Zymophagy, a novel selective autophagy pathway mediated by VMP1-USP9x-p62, prevents pancreatic cell death.

Autophagy has recently elicited significant attention as a mechanism that either protects or promotes cell death, although different autophagy pathways, and the cellular context in which they occur, remain to be elucidated. We report a thorough cellular and biochemical characterization of a novel selective autophagy that works as a protective cell response. This new selective autophagy is activated in pancreatic acinar cells during pancreatitis-induced vesicular transport alteration to sequester and degrade potentially deleterious activated zymogen granules. We have coined the term “zymophagy” to refer to this process. The autophagy-related protein VMP1, the ubiquitin-protease USP9x, and the ubiquitin-binding protein p62 mediate zymophagy. Moreover, VMP1 interacts with USP9x, indicating that there is a close cooperation between the autophagy pathway and the ubiquitin recognition machinery required for selective autophagosome formation. Zymophagy is activated by experimental pancreatitis in genetically engineered mice and cultured pancreatic acinar cells and by acute pancreatitis in humans. Furthermore, zymophagy has pathophysiological relevance by controlling pancreatitis-induced intracellular zymogen activation and helping to prevent cell death. Together, these data reveal a novel selective form of autophagy mediated by the VMP1-USP9x-p62 pathway, as a cellular protective response.Fil: Grasso, Daniel Hector. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ropolo, Alejandro Javier. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lo Ré, Andrea Emilia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Boggio, Verónica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; ArgentinaFil: Molejon, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Iovanna, Juan L.. Inserm; FranciaFil: Gonzalez, Claudio D.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; ArgentinaFil: Urrutia, Raúl. Mayo Clinic; Estados UnidosFil: Vaccaro, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Novel AKT1-GLI3-VMP1 pathway mediates KRAS oncogene-induced autophagy in cancer cells

Autophagy is an evolutionarily conserved degradation process of cytoplasmic cellular constituents. It has been suggested that autophagy plays a role in tumor promotion and progression downstream oncogenic pathways; however, the molecular mechanisms underlying this phenomenon have not been elucidated. Here, we provide both in vitro and in vivo evidence of a novel signaling pathway whereby the oncogene KRAS induces the expression of VMP1, a molecule needed for the formation of the authophagosome and capable of inducing autophagy, even under nutrient-replete conditions. RNAi experiments demonstrated that KRAS requires VMP1 to induce autophagy. Analysis of the mechanisms identified GLI3, a transcription factor regulated by the Hedgehog pathway, as an effector of KRAS signaling. GLI3 regulates autophagy as well as the expression and promoter activity of VMP1 in a Hedgehog-independent manner. Chromatin immunoprecipitation assays demonstrated that GLI3 binds to the VMP1 promoter and complexes with the histone acetyltransferase p300 to regulate promoter activity. Knockdown of p300 impaired KRAS- and GLI3-induced activation of this promoter. Finally, we identified the PI3K-AKT1 pathway as the signaling pathway mediating the expression and promoter activity ofVMP1upstream of the GLI3-p300 complex. Together, these data provide evidence of a new regulatory mechanism involved in autophagy that integrates this cellular process into the molecular network of events regulating oncogene-induced autophagy.Fil: Lo Ré, Andrea Emilia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Fernández Barrena, Maite G.. No especifíca;Fil: Almada, Luciana L.. No especifíca;Fil: Mills, Lisa D.. No especifíca;Fil: Elsawa, Sherine F.. No especifíca;Fil: Lund, George. No especifíca;Fil: Ropolo, Alejandro Javier. Universidad de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Molejon, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vaccaro, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fernandez Zapico, Martin Ernesto. No especifíca

Apoptosis y autofagia en las células estrelladas: Un nuevo potencial de los tocotrienoles en reducir la fibrogénesis asociada a la pancreatitis crónica

Objetivo: la eliminación selectiva de células estrelladas pancreáticas (PSC) activadas a través de la inducción de su propia muerte programada es un objetivo de interés terapéutico en pacientes con pancreatitis crónica. En este trabajo se investigaron los efectos de los tocotrienoles sobre la muerte de PSC activadas. Materiales y métodos: PSC activadas y quiescentes, y células acinaresde páncreas de rata fueron tratadas con diferentes derivados de la vitamina E, α-tocoferol, α-, β-, γ- y δ-tocotrienoles, y una fracción rica en tocotrienoles de aceite de palma. Resultados: la fracción rica en tocotrienoles (TRF), pero no α-tocoferol, redujo la viabilidad de PSC activadas mediante el establecimiento de un programa de muerte, independiente de la regulación del ciclo celular. Las PSC activadas murieron por apoptosis, como fue indicado por un incremento en lafragmentación de ADN y la activación de caspasas, y a través de autofagia, como demostró la formación de vacuolas autofágicas y la acumulación de LC3-II. En contraste con los α-tocoferoles, la TRF causó una intensa y sostenida despolarización de la membrana mitocondrial y una gran liberación de citocromo c. La inhibición de caspasas con zVAD-fmk suprimió la apoptosis inducida por tocotrienoles pero amplificó la autofagia. Sin embargo, el bloqueo del poro de transición de permeabilidad mitocondrial con ciclosporina A abolió completamente los efectos letales de los tocotrienoles sobre las PSC. La inducción de muerte por tocotrienoles fue restringida a las PSC activadas, ya que no causó apoptosis ni en las PSC quiescentes ni en las células acinares. Conclusiones: los tocotrienoles gatillan selectivamente la muerte de PSC activadas actuando sobre el poro de transición de permeabilidad mitocondrial.Los hallazgos revelan un nuevo potencial para los tocotrienoles en reducir la fibrogénesis asociada a la pancreatitis crónica.Fil: Ropolo, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Vaccaro, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentin

VMP1 is a new player in the regulation of the autophagy-specific phosphatidylinositol 3-kinase complex activation

We have elucidated a novel mechanism through which the autophagy-specific class III phosphatidylinositol 3-kinase (PtdIns3K) complex can be recruited to the PAS in mammalian cells, through the interaction between BECN1 and the vacuole membrane protein 1 (VMP1), an integral autophagosomal membrane protein. This interaction involves the binding between the C-terminal 20 amino acids of the VMP1 hydrophilic domain, which we have named the VMP1 autophagy-related domain (VMP1-AtgD), and the BH3 domain of BECN1. The association between these two proteins allows the formation of the autophagy-specific PtdIns3K complex, which activity favors the generation of phosphatidylinositol-3-phosphate (PtdIns3P) and the subsequent association of the autophagy-related (ATG) proteins, including ATG16L1, with the phagophore membranes. Therefore, VMP1 regulates the PtdIns3K activity on the phagophore membrane through its interaction with BECN1. Our data provide a novel model describing one of the key steps in phagophore assembly site (PAS) formation and autophagy regulation, and positions VMP1 as a new interactor of the autophagy-specific PtdIns3K complex in mammalian cells.Fil: Molejon, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina;Fil: Ropolo, Alejandro Javier. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina;Fil: Vaccaro, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Fisiopatología; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina

A novel HIF-1α/VMP1-Autophagic Pathway Induces Resistance to Photodynamic Therapy in Colon Cancer Cells.

Colon cancer is the third most frequent cancer and the fourth most common cause of cancer-related mortality worldwide and the standard therapy is surgical resection plus adjuvant chemotherapy. Photodynamic therapy (PDT) has been proposed as adjuvant therapy because it can prevent the tumor recurrence after surgical excision in colon cancer patients. Hypoxia is a common feature in solid tumor and leads to chemo/radio resistance. Recently, it has been shown that in response to hypoxia cell can induce HIF-1α-mediated autophagy to survive in this hostile microenvironment. Moreover, hypoxia and autophagy have been implicated in resistance to antitumor PDT. However, the molecular signals by which HIF-1α induces autophagy in PDT context has not been studied yet. Here we evaluate theinterplay between HIF-1α and autophagy as well as the underlying mechanism in the PDT resistance of colon cancer cells. Our study demonstrates that HIF-1α stabilization significantly increases VMP1-related autophagy through binding to hypoxia responsive elements in VMP1 promoter. We show that HIF-1α-induced utophagy increases colon cancer cell survival as well as decreses cell death after PDT. Moreover, here we demonstrate that HIF-1α-induced autophagy is mediated by VMP1 expression, since downregulation of VMP1 by RNA interference strategy reduces HIF-1α-induced autophagy and cell survival after PDT. In conclusion, PDT induces autophagy as a survival mechanism and the induction of the novel HIF-1α/VMP1/autophagic pathway may explain, at least in part, theresistance of colon cancer cells to PDT. The knowledge of the molecular mechanisms involved in PDT resistance may lead to more accurate therapeutic strategies.Fil: Rodriguez, Matias Exequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Catrinacio, Cintia Betiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Ropolo, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Rivarola, Viviana Alicia. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Vaccaro, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad Medicina. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentin