Description of the First Dengue Outbreak in the City of Santo Tomé, Corrientes, 2016

NTRODUCCIÓN: Argentina sufrió diferentes brotes de dengue en las regiones más cálidas durante el verano de 2016. En la ciudad de Santo Tomé (Corrientes) se produjo el primer brote. En este marco, el objetivo del trabajo fue evaluar la distribución temporal y espacial de los casos de dengue en Santo Tomé, así como las acciones adoptadas para interrumpir la transmisión. MÉTODOS: Los casos sospechosos fueron detectados por el personal sanitario, se confirmaron las muestras por análisis serológico y se georreferenció cada caso positivo, que fue clasificado como autóctono o importado. Las acciones de prevención fueron: bloqueo larval; control focal y rociado espacial; evaluación de larvicidas; descacharrado; charlas, capacitaciones y asamblea barrial. RESULTADOS: De 148 pacientes sospechosos se confirmaron 52 entre las semanas epidemiológicas 3 y 22. La cepa circulante fue DENV 1. El 46% (24/52) de los casos fueron autóctonos y se concentraron en el barrio Sarmiento. El 21% (140/655) de las viviendas presentaron criaderos de culícidos, de los cuales el 84% (210/251) resultó positivo para Ae. aegypti. DISCUSIÓN: Santo Tomé tuvo todas las condiciones para que se registrara el brote de dengue: población susceptible, presencia del vector y arribo de casos importados. Si bien la distribución de casos fue homogénea durante todo el brote, en el barrio Sarmiento se vio una clara circulación viral, que pudo ser controlada mediante una tarea interdisciplinaria de acción y prevención.INTRODUCTION: During the summer of 2016 different outbreaks of dengue fever occurred in Argentina, and the city of Santo Tomé (Corrientes) had its first one. The objective of this work was to evaluate temporal and spatial distribution of dengue cases registered in the city as well as the actions carried out to interrupt the transmission. METHODS: Suspected cases were detected by health personnel, samples confirmed by serological analysis and each positive case georeferenced and classified as autochthonous or imported. The prevention actions were larval block; focal control and spatial spraying; evaluation of larvicides; elimination of water reservoirs; meetings, training and neighborhood assemblies. RESULTS: From 148 suspected patients, 52 were confirmed between epidemiological week 3 and 22. The circulating strain was DENV 1. Forty-six percent (24/52) of the cases were autochthonous, concentrated in Sarmiento neighborhood. Twenty-one percent (140/655) of the houses had mosquitoes breeding sites, of which 84 percent (210/251) were positive for Ae. aegypti. DISCUSSION: Santo Tomé city had all the conditions for dengue outbreak: susceptible population, presence of the vector and arrival of imported cases. Although the distribution of cases was homogeneous throughout the outbreak, Sarmiento neighborhood showed a clear viral circulation, which was controlled through an interdisciplinary work for action and prevention.Fil: Leporace, Marina. No especifíca;Fil: Lizuain, Arturo Andrés. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud. Centro Nacional de Diagnóstico e Investigaciones Endemo-epidémicas; ArgentinaFil: Villarquide, María Lucrecia. No especifíca;Fil: Galarza, Adriana Carolina. No especifíca;Fil: De Souza, Oscar. Municipalidad de Santo Tomé; ArgentinaFil: Rilo, María Cristina. No especifíca;Fil: Santini, Maria Soledad. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud. Centro Nacional de Diagnóstico e Investigaciones Endemo-epidémicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Inhibidores fisiológicos de la H+-ATPasa mitocondrial de tripanosomatideos

En el presente trabajo de tesis se realizó el estudio deinhibidores fisiológicos y farmacológicos de la H+-ATPasamitocondrial de tripanosomatídeos, con el fin de esclarecer elmecanismo de acción de la enzima de parásito, aportandomayores evidencias que permitan establecer posiblesdiferencias y similitudes con la enzima de mamífero. 1.- Se aisló y estudió el inhibidor peptidico (IF1) de la H+—ATPasdae T.cruzi y C.fasciculata. Los resultados obtenidosfueron los siguientes: a) Las partículas submitocondriales de T.cruzi y C.fasciculatafiltradas a través de una columna de Sephadex G-50, aumentaronsu actividad 3-4 veces, debido a la separación del IF1 de laenzima. El inhibidor de T.cruzi retenido en la columna de Sephadex G-50, se recuperó por aumento de la fuerza iónica delbuffer en presencia de DTT y EDTA. b) Para la obtención de IF1 de la H+—ATPasade fracciónmitocondrial de T.cruzi y C.fasciculata se procedió según elsiguiente esquemade trabajo: I.- ruptura mecánica de las células con perlas de vidrio. II.- centrifugación diferencial para la obtención de fracciónmitocondrial. III.— sonicación en buffer pirofosfato para la obtención departículas submitocondriales. IV.- tratamiento con colato y precipitación fraccionada con (NH4)2SO4 para la obtención de la H+-ATPasa. V.- calentamiento y precipitación alcohólica con el fin deaislar al inhibidor proteico. c) La actividad del inhibidor se puso de manifiesto cuando seincubaron particulas activadas en presencia de IFl, en unvolumen reducido para evitar la disociación y con el agregadode ATP-Mg para generar un estado conformacional transitorio dela enzima que permita la formación del complejo enzima-inhibidor. d) Los estudios de inhibición realizados determinaron laposibilidad de establecer interacciones entre la H+-ATPasa yel inhibidor de un mismo origen (interacciones homólogas),como asi también entre la enzima e inhibidor de distintosorígenes (interacciones heterólogas). Esto evidencia laexistencia de importantes analogías entre las H+-ATPasas y losinhibidores proteicos de distintas especies. e) Se observó inhibición de la fracción soluble de la enzima (F1-ATPasa) de T.cruzi indicando que no seria necesaria lapresencia de los componentes de membrana para que IF1interactúa con la subunidad catalitica. f) El inhibidor de C.fasciculata resultó ser sensible a lainactivación por tripsina, similar a lo observado para elinhibidor de higado de rata y de corazón bovino. g) Por filtración del inhibidor proteico a través de unacolumna de HPLC-C18 con gradiente de acetonitrilo, se obtuvoun pico máximoa 35% de acetonitrilo que presentó actividad deinhibidor. Dicho valor de gradiente se asemeja al de eluciónde IF1 de corazón bovino y de C.utilis. h) El peso molecular calculado para IF1 de C.fasciculata porelectroforesis en gel de poliacrilamida al 10 y 15% enpresencia de SDS fue 8000-8500 ± 1500. Dicho valor secorresponde a los publicados para IF1 de otros organismos. Los datos obtenidos demuestran que las caracteristicas delinhibidor proteico de T.cruzi y C.fasciculata son similares alas descriptas para otros inhibidores. 2) Se demostró la regulación de la cadena respiratoria y la H+-ATPasa mitocondrial de T.cruzi y C.fasciculata porpoliaminas. Los resultados se describen a continuación: a) Las fracciones mitocondriales de C.fasciculata aisladas enpresencia de putrescina, espermidina y espermina presentaronmayor velocidad de consumo de oxigeno y disminución de laactividad de hidrólisis de ATP. b) En partículas submitocondriales de T.cruzi y C.fasciculatase observó inhibición de la H+-ATPasa por incubación conespermina, efecto posiblemente atribuido a la formación delcomplejo ATP-espermina, debido a que la inhibición porespermina se revierte con el aumento de la concentración de Mg2+ en el medio de reacción. c) La cinética de inhibición de la H+-ATPasade partículassubmitocondriales de T.cruzi incubadas con espermina fue detipo no competitivo. La fracción soluble Fl-ATPasa de T.cruzino presentó inhibición. La inactivación por espermina de la H+—ATPasa de particulas submitocondriales de C.fasciculata fuede tipo competitivo y mixto, observándose aumento del Km ydisminución de la Vmax. En la fracción F1-ATPasa de la enzimade C.fasciculata se observó inhibición de tipo competitivo. d) Las células de T.cruzi cultivadas en ausencia depoliaminas, presentaron una marcada activación de la enzima H+-ATPasa. Los presentes datos indican que las poliaminas intervienenen los procesos de regulación de los niveles de energiaintracelulares de los tripanosomatideos similar a lo observadopara células de mamíferos. 3) Se estudió la actividad de la H+-ATPasa de C.fasciculatay L.seymouri en presencia de drogas. Los resultados obtenidosmuestran que: a) El crecimiento de C.fasciculata y L.seymouri fue inhibidopor el agregado al medio de cultivo del nitrofurano nifurtimoxy de la naftoquinona CG 8-935. b) La actividad de la H+—ATPasade fracción mitocondrialobtenida de C.fasciculata y de L.seymouri cultivadas con elagregado de droga al medio no presentó modificación. c) La incubación de partículas submitocondriales con elnitrofurano nifurtimox y con la naftoquinona CG 8-935directamente en el medio de medida, produjo la inhibición dela actividad de la H+-ATPasa de C. fasciculata, de L.seymouri yde T.cruzi. d) La incubación de la fracción mitocondrial de C.fasciculatay de L.seymouri con el sistema generador de oxi-radicalesxantina-xantina oxidasa no produjo inhibición de la H+-ATPasaa diferencia de lo observado con T.cruzi. e) La presencia de grupos -SH en la enzima H+-ATPasa de C.fasciculata y L.seymouri se puso de manifiesto incubando lafracción mitocondrial con reactivos específicos para grupossulfhidrilos (NEM, CMB y FMA). Los resultados demostraron quelos grupos -SH de la enzima de C.fasciculata se encuentranmenos expuestos a dichos reactivos que en la enzima de L.seymouri. En ambos casos el FMA fue el inhibidor másefectivo, seguido por CMB y NEM.Estos datos concuerdan con loobservado para la enzima de T.cruzi. Los datos obtenidos sugieren sutiles diferencias entre lasenzimas de C.fasciculata y L.seymouri, mientras que dichasdiferencias se acentúan aún más al compararse con la enzima de T.cruzi.Fil: Rilo, María Cristina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina