Regeneração periodontal: Presente e futuro

O periodonto é o órgão que envolve e sustenta o dente. A periodontite é uma doença inflamatória de elevada prevalência em cães e seres humanos e que, quando não tratada, pode conduzir à esfoliação dentária e colocar em risco a vida do doente devido às manifestações sistémicas decorrentes.Os tratamentos que atualmente se usam revelam-se, muitas vezes, ineficazes. A Engenharia de Tecidos emergiu, recentemente, como uma potencial terapia alternativa e que visa a regeneração ad integrum da arquitetura do tecido e recuperação da sua função biológica

Hipertiroidismo felino: Abordagem diagnóstica e terapêutica na região da grande Lisboa

O hipertiroidismo é agora a doença endócrina mais comum no gato. O motivo pelo aumento anual do número de casos desta doença deverá prender-se com um Maior disponibilidade e utilização correcta dos meios complementares que permitem emitir um diagnóstico definitivo, mas também com o aumento de exposição da população de gatos aos factores predisponentes. Assim, este trabalho, utilizando uma base de dados proveniente de um CAMV na região da Grande Lisboa e um inquérito realizado a 31 Médicos Veterinários (MVs) que exercem a sua prática clínica nesta região do país, visou compreender melhor a abordagem global ao problema. Concluiu-se que, nesta região, a sintomatologia e a idade dos gatos são os principais motivos que levam à suspeita de hipertiroidismo felino e que levam à realização frequente de medições da concentração sérica de T4. No entanto, após um diagnóstico definitivo de hipertiroidismo, a maioria dos MVs não recomenda um tratamento curativo, como por exemplo o iodo radioactivo, o qual é desconhecido da maioria dos profissionais inquiridos, ou a tiroidectomia, mas sim uma abordagem terapêutica visando controlar a doença sem no entanto impedir a sua progressão como sendo o metimazol ou as dietas de prescrição

The Facial Reconstruction of a Mesolithic Dog, Muge, Portugal

This paper presents the facial reconstruction of a Mesolithic dog whose skeleton was recovered from the Muge shell middens (Portugal) in the 19th century. We used the anatomical deformation approach based on a collection of computer tomography images as an attempt to reconstruct the Muge dog’s head appearance. We faced a few challenges due to the level of bone displacement and the absence of some cranium anatomical parts, as well as accurate information on soft tissue thickness for modern dogs. This multidisciplinary study combined anatomical, veterinary, zooarchaeological, artistic and graphic aspects to allow for the facial reconstruction of the Muge dog. Albeit an approximation, it confers a recognition to this prehistoric finding.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

New tissue-engineered matrix for periodontal regeneration based on a biodegradable material combined with canine adipose-derived stem cells

Tese de Doutoramento em Ciências VeterináriasO periodonto é o órgão que envolve e sustenta o dente, sendo constituído pelo osso alveolar que forma o alvéolo dentário, o cemento que envolve a raiz do dente, o ligamento periodontal que estabelece a ligação entre os dois tecidos anteriores formando uma articulação e a gengiva. A periodontite é uma doença inflamatória de elevada prevalência em cães e seres humanos e que, quando não tratada, pode conduzir à esfoliação dentária e colocar em risco a vida do doente devido às manifestações sistémicas decorrentes pela dispersão sanguínea de mediadores inflamatórios e microrganismos patogénicos. Os tratamentos que atualmente se usam para tratar esta patologia revelam-se muitas vezes ineficazes. A Engenharia de Tecidos emergiu, recentemente, como uma potencial terapia alternativa. Esta abordagem consiste no fornecimento de um biomaterial de suporte semeado com células estaminais que visa a regeneração ad integrum da arquitetura e da função biológica do tecido afetado. As células estaminais mesenquimatosas de origem oral e dentária têm a capacidade de regenerar os tecidos periodontais. No entanto, as células provenientes destes locais pressupõem uma morbilidade significativa associada ao local da colheita e possuem um baixo rendimento celular em comparação com fontes não-orais, como por exemplo o tecido adiposo. As células estaminais derivadas do tecido adiposo (ASCs) possuem um grande potencial de aplicação em terapias celulares devido à sua facilidade de colheita e baixa morbidade associada, ao alto rendimento de células isoladas e à capacidade demonstrada para se diferenciarem em inúmeras linhagens celulares. O principal objetivo da presente Tese consistiu no desenvolvimento de uma nova abordagem de Engenharia de Tecidos para o tratamento de defeitos periodontais com base numa matriz biodegradável combinada com ASCs. Partindo do conhecimento de que o cão é o modelo animal mais relevante para estudar a doença periodontal em humanos, pretende validar-se esta estratégia de Engenharia de Tecidos em modelo canino antes da aplicação translacional para a Medicina Humana, sem descuidar nunca que esta doença assume também grande importância na Medicina Veterinária. Tendo isto em consideração, o trabalho desenvolvido nesta Tese teve como principais objetivos: Otimizar a colheita e o isolamento de ASCs caninas (cASCs) provenientes de diferentes regiões anatómicas e caracterizar a sua estaminalidade e o seu potencial osteogénico em diferentes passagens; Avaliar a resposta à implantação de cASCs em modelo subcutâneo de murganho saudável; Desenvolver e caracterizar um material de suporte (scaffold) biodegradável de dupla camada que vise a regeneração de defeitos periodontais; Avaliar o potencial in vitro do scaffold de dupla camada desenvolvido para uso em Engenharia de Tecidos através da sua cultura com cASCs; Avaliar a funcionalidade in vivo do scaffold para a regeneração óssea, utilizando um modelo de defeito mandibular em rato. A fim de alcançar os objetivos propostos, numa primeira etapa, as amostras de tecido adiposo canino foram colhidas a partir de duas localizações anatómicas diferentes, a saber, tecido subcutâneo e tecido omental, e o isolamento das cASCs foi posteriormente otimizado. A estaminalidade destas células e o potencial de diferenciação osteogénica foram analisadas ao longo das diferentes passagens através de RT-PCR em tempo real e histologia. Posteriormente, as mesmas cASCs foram xenotransplantadas em murganho, a fim de avaliar a resposta xenogénica do hospedeiro contra as mesmas. Concomitantemente, desenvolveu-se um scaffold composto por uma mistura de amido e poli-ε-caprolactona e compreendendo duas camadas: uma malha tridimensional de fibras (“fiber mesh”) funcionalizadas com grupos silanol para promover a osteogénese ao nível do osso alveolar, e uma membrana obtida por evaporação de solvente com o intuito de atuar como barreira contra a migração de epitélio gengival para o interior do defeito periodontal. Os scaffolds obtidos foram extensivamente caracterizados quanto às suas propriedades mecânicas, ao comportamento de degradação e à eficácia da técnica de funcionalização. De seguida, os scaffolds foram semeados com cASCs a fim de avaliar a funcionalidade in vitro das construções obtidas. Como forma de avaliar a capacidade dos scaffolds desenvolvidos para promover a regeneração óssea, estes foram implantados num defeito circular de tamanho crítico induzido na mandíbula do rato, e a formação de novo osso foi determinada após oito semanas de implantação. Em geral, a estaminalidade e o potencial de diferenciação osteogénica das cASCs decresceu ao longo de passagens. Além disso, demonstrou-se também que a origem anatómica do tecido adiposo tem um efeito significativo nas duas características analisadas. Após a injeção de cASCs num hospedeiro xenogénico (murganho), não foi observada nenhuma resposta inflamatória local exuberante contra as mesmas. A caracterização físico-química do scaffold desenvolvido demostrou que esta matriz apresenta uma morfologia, composição da superfície, comportamento de degradação e propriedades mecânicas adequadas para auxiliar a regeneração periodontal. Os estudos biológicos com cASCs revelaram o potencial que ambas as camadas têm de permitir a adesão e proliferação celular, bem como de promover a diferenciação osteogénica na malha funcionalizada. Nos defeitos mandibulares experimentais, o scaffold funcionalizado com grupos silanol induziu uma maior formação de osso novo em comparação com a membrana comercial de colagénio e com os defeitos vazios. Além disso, a face composta pela membrana evitou o crescimento do tecido epitelial e conjuntivo para o interior do defeito, o qual é um dos requisitos para o sucesso da regeneração guiada de tecidos. Em resumo, este trabalho demonstrou que o tecido adiposo canino fornece uma fonte alternativa de células estaminais com capacidade de diferenciação osteogénica e que estas não induzem uma resposta inflamatória exuberante no hospedeiro xenogénico. Estes resultados, juntamente com o potencial observado do scaffold desenvolvido para acomodar a proliferação e diferenciação das cASCs cultivadas e para promover a regeneração de osso in vivo, permite propor esta construção como uma alternativa às técnicas atualmente utilizadas na regeneração periodontal, tanto no homem como no cão.Periodontium is the organ which involves and sustains the tooth and it is constituted by the alveolar bone which forms the dental alveolus, the cementum which surrounds the tooth root, the periodontal ligament, which connects them and form a joint, and the gingiva. Periodontitis is an inflammatory pathology highly prevalent in both dogs and humans that, when not treated, can lead to tooth exfoliation and also to life threatening systemic implications due to the blood dispersion of inflammatory mediators and pathogenic microorganisms. The routine clinical therapies currently used to treat periodontal defects are often ineffective. Tissue Engineering has emerged as a valuable alternative approach aiming to regenerate ad integrum the architecture and the biological function of the damaged tissue by providing the repair site with a suitable supportive biomaterial seeded with stem cells. Mesenchymal stem cells from oral and dental origin have the ability to regenerate the periodontium; however, harvesting cells from these sites implies significant local tissue morbidity and low cell yield, as compared to non-oral sources, such as the adipose tissue. Adipose-derived stem cells (ASCs) hold a great potential in cell based therapies for their easiness of harvesting with low morbidity, generating high yields of cells with capacity to differentiate into several lineages. The main goal of this Thesis was to develop a new Tissue Engineering approach for the treatment of periodontal defects, based on an innovative biodegradable supportive matrix combined with ASCs. As the dog is the most relevant animal model to study human periodontal disease and, simultaneously, an important subject in Veterinary Medicine, we envisioned to validate this Tissue Engineering strategy in a canine model prior to the translation of this strategy for human application. With this in mind, the work aimed to achieve the following distinct objectives: Optimize harvesting and isolation of canine ASCs (cASCs) from different anatomical regions and characterize their stemness and osteogenic potential at different passages; Evaluate the response to the implantation of cASCs in a healthy mice subcutaneous model; Develop and characterize a double layer biodegradable scaffold meeting the requirements to achieve different functionalities, targeting regeneration of periodontal defects; Evaluate the potential of the developed double layer scaffold for Tissue Engineering by culturing it with cASCs, Assess the in vivo functionality of the scaffold for bone regeneration, using a rat mandibular defect model. In order to achieve the proposed objectives, in a first stage, canine adipose tissue samples were harvested from two different anatomical sites, namely subcutaneous and omental adipose tissue, and the isolation of cASCs was optimized. The stemness and the osteogenic differentiation potential of these cells were analyzed along passages using real time RT-PCR and staining procedures. Subsequently, the same stem cells were xenotransplanted (into a mouse model) in order to evaluate the response of the xenogenic host against the cASCs. Concomitantly, a double layer scaffold made of a blend of starch and poly (ε-caprolactone) was designed, comprising a 3D fiber mesh functionalized with silanol groups to promote osteogenesis and a solvent casting membrane aiming to act as a barrier against the migration of gingival epithelium into the periodontal defect. The obtained scaffolds were extensively characterized regarding their mechanical properties, degradation behaviour and effectiveness of the functionalization. Ultimately, the scaffolds were seeded/cultured with cASCs to assess the in vitro functionality of the obtained constructs. Finally, to assess the ability of the developed scaffold to promote bone regeneration, these were implanted in a circular critical size defected induced in rat mandible, and the formation of new bone was quantified after 8 weeks of implantation. In general, the stemness and osteogenic differentiation potential of the cASCs was found to decrease along increasing passages. Additionally, it was shown that the anatomical origin of the adipose tissue has a significant effect in the osteogenic differentiation ability of these cells. After the injection of cASCs in a xenogenic host (mouse), it was proved that no significant local immunogenic response was detected against them. The physicochemical characterization of the newly developed double layer scaffold showed that this matrix presents a morphology, surface composition, degradation behaviour and mechanical properties suitable for assisting periodontal regeneration. The biological studies with cASCs revealed the potential of both layers to allow cellular adhesion and proliferation, and also to promote the osteogenic differentiation on the functionalized fiber mesh. In the induced mandibular defect, the functionalized scaffold with silanol groups was shown to enhance higher new bone formation in comparison to a collagen commercial membrane and to empty defects. Moreover, the membrane layer was observed to avoid the epithelial and connective tissue ingrowth, which is one of the main requirements for guided tissue regeneration. In summary, this work demonstrated that the canine adipose tissue provides an alternative source of stem cells with the ability to differentiate into different cellular lineages and which do not induce an in vivo inflammatory response in the xenogeneic host. These findings together with the observed potential of the developed scaffold to accommodate the proliferation and differentiation of the cultured cASCs and to enhance in vivo bone regeneration allows to propose this tissue-engineered matrix for periodontal regeneration as an alternative to the techniques currently used in the dentistry field, both in human and in veterinary medical practice

Neoplasias da Cavidade Oral do Cão: Estudo Retrospectivo de 14 Anos

Dissertação de Mestrado em Medicina VeterináriaAs lesões proliferativas da cavidade oral são relativamente frequentes em carnívoros domésticos, mas, felizmente, muitas dessas lesões são benignas. A cavidade oral é a sede de 6% de todos os tumores no cão, sendo a quinta localização para o aparecimento de neoplasias nesta espécie animal. Como a natureza exacta de qualquer lesão só pode ser determinada pelo exame histopatológico, a obtenção de uma biópsia é fundamental para o diagnóstico de todas as lesões proliferativas. No Laboratório de Anatomia e Histopatologia da UTAD, realizámos um estudo retrospectivo dos animais com tumores da cavidade oral, no período compreendido entre 1 de Janeiro de 1995 e 31 de Março de 2009, considerando variáveis como o comportamento biológico, o sexo, a idade e a raça. Num total de 161 análises realizadas a neoplasias da cavidade oral, observámos 104 neoplasias benignas (64,6%) e 57 neoplasias malignas (35,4%). De entre os 104 tumores benignos, observaram-se 96 epúlides (92,2%) [57 epúlides fibromatosas (59,4%); 28 epúlides ossificantes (29,1%); 10 epúlides acantomatosas (10,4%) e 1 epúlide de células gigantes (1%)], 5 papilomas (4,8%), 2 fibromas (2%) e 1 ameloblastoma (1%). No conjunto das 57 neoplasias malignas, registaram-se 26 melanomas (45,5%) [19 pigmentados (73,1%) e 7 amelânicos (26,9%)], 19 fibrossarcomas (33,3%), 7 carcinomas espinocelulares (12,3%), 3 linfomas (5,3%), 1 histiocitoma (1,8%) e 1 mastocitoma indiferenciado (1,8%). Após a avaliação estatística dos nossos dados, e tendo descontado as análises em que não houve informação, podemos afirmar que as lesões neoplásicas tiveram maior incidência no sexo masculino (99 casos, 61,5%) do que no sexo feminino (56 casos, 34,8%) e maior incidência aos 6 anos de idade (25 casos, 15,5%). Os tumores benignos foram reportados em maior número na classe etária entre os 2 e os 8 anos de idade; já os malignos foram-no nos animais com idade superior a 8 anos. Quanto à raça, as mais afectadas foram os Boxers (47 casos, 29,2%), os cães sem raça definida (44 casos, 27,3%), os Caniches (9 casos, 5,6%) e os Cocker Spaniel (8 casos, 5%), de um total de 23 raças puras diferentes.Oral proliferative lesions are relatively common in domestic carnivores but, fortunately, a lot of these lesions are benign. The oral cavity is place of 6% of all tumours in dogs, being the sixth most important localization of neoplasias in this specie. As the exact nature of any lesion can only be determined by histopathological examination, taking a biopsy is mandatory to achieve diagnosis of all proliferative lesions. At the UTAD Histopathology Laboratory, we performed a retrospective study of the animals with oral cavity tumours, in the period from 1 January of 1995 until 31 March of 2008, considering variables such as biological behaviour, gender, age and breed. From 161 oral tumours on dogs oral, we reported 104 benign neoplasias (64,5%) and 57 malignant neoplasias (35,4%). Among 104 benign tumours, we observed 96 epulides (92,2%) [57 fibromatous epulides (59,4%); 28 ossifying epulides (29,1%); 10 acanthomatous epulides (10,4%) e 1 giant cells epulis (1%)], 5 papilomas (4,8%), 2 fibromas (2%) e 1 ameloblastoma (1%). Within the 57 malignant neoplasias, we reported 26 melanomas (45,5%) [19 pigmented (73,1%) e 7 amelanotic (26,9%)], 19 fibrosarcomas (33,3%), 7 squamous cell carcinomas (12,3%), 3 lymphomas (5,3%), 1 histiocitoma (1,8%) e 1 undifferentiated mastocitoma (1,8%). After the statistic evaluation of our data, discarding the analyses without information, we can affirm that the neoplastic lesions had more incidence in males (99 cases, 61,5%) than in females (56 cases, 34,8%) and had more incidence in the 6-years-old animals (25 cases, 15,5%). The benign tumours were higher reported between the 2 and 8 years of age, whereas the malignant were in the dogs with more than 8 years of age. Regarding the breed, the most affected ones were Boxers (47 cases, 29,2%), mongrels (44 cases, 27,3%), Poodles (9 cases, 5,6%) and Cocker Spaniel (8 cases, 5%), among 23 different pure breeds

Morphometrical Study of the European Shorthair Cat Skull Using Computed Tomography

This study aimed to perform a morphometric analysis of the skull of the European shorthair cat by using computed tomographic images. Thirty-seven computed tomography (CT) studies of healthy cats’ heads were used for linear measurements and index calculations of the skull and cranium. The following values were determined: skull length = 8.94 ± 0.45 cm, cranial length = 8.21 ± 0.42 cm, nasal length = 0.73 ± 0.17 cm, cranial width = 4.28 ± 0.26 cm, cranial index = 52.18 ± 3.75%, internal height of cranium = 2.88 ± 0.29 cm, external height of cranium = 3.35 ± 0.12 cm, internal length of the cranium = 5.53 ± 0.28 cm, external length of the cranium = 6.32 ± 0.28 cm, internal cranium index = 45.62 ± 4.77%, external cranium index = 53.06 ± 2.07%, internal cranium and skull index = 61.93 ± 2.38%, external cranium and skull index = 70.70 ± 1.72%, width of the foramen magnum = 1.34 ± 0.07 cm, height of the foramen magnum = 1.01 ± 0.09 cm, and foramen magnum index = 75.37 ± 5.76%. It was also found that the population was homogeneous, with the exception of nasal length (NL), and that there was a sexual dimorphism present, with males exhibiting higher dimensions. This work contributed to characterizing the morphometry of the cranium and skull of the domestic cat, a knowledge of utmost importance for the diagnosis and treatment of conditions affecting this complex anatomical region

Canine oral cavity neoplasias - Brief review

ABSTRACT. Requicha J.F., Pires M. dos A., Albuquerque C.M. & Viegas C.A. [Canine oral cavity neoplasias - Brief review.] Neoplasias da cavidade oral do cão - Breve revisão. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 37(1):41-46, 2015. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Lusófona de Humanidades e Tecnologias, Campo Grande, 1749-024 Lisboa, Portugal e Department of Veterinary Sciences, School of Agriculture and Veterinary Sciences, University of Trás-os-Montes e Alto Douro, P.O. Box 1013, 5001-801 Vila Real, Portugal. E-mail: [email protected] Oral proliferative lesions are relatively common in domestic carnivores but, fortunately, a lot of these lesions are benign. The oral cavity is place of 6% of all tumours in dogs, being the sixth most important localization of neoplasias in this specie. The non-odontogenic tumors arise from structures of the oral cavity, except from dental tissue, and they are mostly malignant. Odontogenic tumors are those originated from the dental structures. In the case of tumors of non-odontogenic, will be described the oral papillomatosis, the melanoma, the squamous cell carcinoma, and the fibrosarcoma. Among the odontogenic tumors, the focus will be on the epulides, ameloblastoma, odontoma and dentigerous cysts

Toll-like receptor 9 gene in periodontal disease : promising biomarker

© 2018 Elsevier B.V. All rights reserved.Periodontal Disease is an infectious and inflammatory disorder triggered mainly by periodontopathogenic bacteria, however, as a multifactorial disease, several factors modulate its progression, namely, genetic factors. Toll-like receptors (TLR) recognize molecular patterns present in pathogens and trigger an immune response against them. Thus, sequences variants in TLR genes seem to have the potential to modify the predisposition to Periodontal Disease and its progression. Based on this fact, TLR9 gene were analysed in a case-control study. DNA was obtained from 90 dogs (50 control and 40 cases) and a fragment of TLR9 gene was amplified by PCR and sequenced. The variants were identified by comparison with the dog wild type sequences. Our results suggest that rs375556098 and rs201959275 polymorphisms in the TLR9 gene are good candidates to become biomarkers of the canine predisposition to Periodontal Disease. It's important to notice that these polymorphic sites exist in Human exactly in the same codon. Since the dog is the best animal model to replicate the pathophysiological mechanisms of human Periodontal Disease, these results can potentially be extrapolated to humans.Part of this work was supported by the FEDER/COMPETE/POCI - Operational Competitiveness and Internationalization Programme, under Project POCI-01-0145-FEDER-006958 and the Portuguese Foundation for Science and Technology (FCT) - under the project UID/AGR/04033/2013.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

The potential of computed tomography in odontometry: application to a Mesolithic dog

A large odontometric reference database is essential for a clear and reliable differentiation between the teeth of dogs and wolves found in archaeological contexts. However, the data compilation of skeletal material is a slow process because access to dog remains may be difficult. The expansion of a dental database could benefit from computed tomography (CT) scans performed on live dogs during medical appointments and archived in veterinary clinics. To enable it, however, the reliability and accuracy of digital measurements must first be validated. This is the main objective of this paper. We tested the accuracy of dental measurements obtained from CT scans of deceased modern dogs and one Mesolithic dog. CT measurements were obtained using multi-planar reconstruction (MPR) (bi-dimensional images) and three-dimensional volume rendering (3D VR), either using bone or soft tissue windows. Then, measurements were compared with data obtained with a conventional caliper (Fischer Darex®, France). The sample comprised 25 maxillary fourth premolars and 17 maxillary canines. Measurements included the mesiodistal length (MDL) and the vestibular palatine width (VPW). Intra- and inter-observer variations were assessed by calculating the technical error of measurement (TEM). This approach was also used to assess the level of agreement between both techniques, complemented by a Bland-Altman analysis. Intra-observer (TEM = 0.52% to 5.98%) and inter-observer variations (TEM = 3.15% to 7.14%) were relatively small for most standard measurements, windows, and CT approaches. In the case of the MPR approach, the soft tissue window provided less observer variation on the fourth premolar; the same occurred for the bone window regarding the canine. The soft tissue window generally provided less observer variation with the VR approach. CT and caliper agreement ranged from 2.89% to 7.31% (MPR), and from 2.92% to 9.42% (3D VR). At least 91% of the CT measurements were within the Bland-Altman 95% confidence interval. We were able to carry out a thorough odontometric study of the Muge dog skull – a specimen dated to the Mesolithic period, using the MPR approach (with both bone and soft tissue windows). Both the MPR and VR CT scan approaches were validated, thus confirming digital data as an alternative way to generate more comprehensive odontometric references.info:eu-repo/semantics/publishedVersio