Utilidad de los marcadores moleculares en el diagnóstico de nódulos tiroideos con citología indeterminada

Los nódulos tiroideos representan un problema clínico a nivel mundial debida a su alta prevalencia. La importancia clínica de su estudio radica en excluir malignidad, que ocurre entre el 7-15% de los mismos. El método estándar de oro para el diagnóstico de los mismos es el análisis citológico de la punción aspiración con aguja fina. Sin embargo, hasta un 30% de estos presentan citologías indeterminadas (Bethesda III o IV). Con un resultado histopatológico benigno en, aproximadamente tres de cada cuatro de estos casos, la cirugía diagnóstica (tiroidectomía parcial o lobectomía) resultaen un inconveniente ya que expone al paciente a innecesarios riesgos quirúrgicos. En el caso de lesiones malignas, una tiroidectomía en una segunda etapa es a menudo indicada, lo que se asocia con costos adicionales y mayores riesgos de complicaciones quirúrgicas. Es por esto que se requiere de una herramienta con mayor precisión para determinar la benignidad o malignidad de un nódulo tiroideo con citología indeterminada. En este contexto el análisis molecular del tejido tiroideo se convierte en un poderoso complemento para el diagnóstico preoperatorio de los nódulos tiroideos con citología indeterminada, ya que entre el 60 al 70% de los cánceres de tiroides albergan al menos una mutación genética conocida.Thyroid nodules represent a clinical problem worldwide due to its high prevalence. The clinical importance lies in excluding malignancy, which occurs between 7-15% of them. The cytological analysis is the gold standard for the diagnosis. However, up to 30% of these have indeterminate cytologies (Bethesda III or IV). In these patients, diagnostic surgeries are performed. With a benign histopathological result in approximately three out of four of these cases, surgery results in an inconvenience since it exposes the patient to unnecessary surgical risks. In the case of malignant lesions, a thyroidectomy in a second stage is often indicated, which is associated with additional costs and increased risks of surgical complications. A more precise method is needed to determine the benignity or malignancy of a thyroid nodule with indeterminate cytology. In this context, molecular analysis of thyroid tissue becomes a powerful complement for the preoperative diagnosis of thyroid nodules with indeterminate cytology, since between 60 to 70% of thyroid cancers harbor at least one known genetic mutation.Fil: Ricci, V.. Sociedad Argentina de Endocrinología y Metabolismo; ArgentinaFil: Repetto, Esteban Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentin

Moderate exercise prevents insulin resistance and changes in adrenocortical morphology and function in rats fed a sucrose-enriched diet

Introducción: niveles elevados de glucocorticoides se asocian a las alteraciones somáticas y bioquímicas presentes en los pacientes y en animales con insulinorresistencia (IR). Hemos demostrado previamente que la IR inducida por una dieta rica en sacarosa (DRS) induce cambios morfológicos y funcionales a nivel adrenocortical y que estas alteraciones pueden evitarse mediante la administración simultánea de un agonista PPAR-γ. Objetivos: en el presente estudio evaluamos el impacto de un protocolo de ejercicio moderado sobre las alteraciones morfológicas y funcionales adrenocorticales asociadas con el desarrollo de IR inducida por una DRS administrada durante siete semanas.Metodología. Resultados: los animales (ratas Wistar macho adultas) tratados con la DRS (agregado de sacarosa al 30% en el agua de bebida) mostraron un incremento del peso corporal y de los panículos adiposos, así como de los niveles séricos de glucosa, insulina y triglicéridos. La respuesta glucémica a la administración de insulina i.p. se vio claramente menoscabada. Se observó una infiltración lipídica de la corteza adrenal, con aumento de la expresión de proteínas esteroidogénicas y marcadores de inflamación (IL-1β, TNF-α, iNOS, COX-2) y un incremento marcado de la corticosteronemia basal. El protocolo de ejercicio consistió en correr en una cinta continua adaptada especialmente durante un máximo de 7 min/día. Este ejercicio moderado previno la aparición de los cambios somáticos y bioquímicos característicos del estado de IR y la infiltración lipídica adrenocortical, revirtiendo además los cambios inflamatorios y normalizando la corticosteronemia. Conclusiones: nuestros resultados subrayan el rol deletéreo del consumo exagerado de carbohidratos simples conteniendo fructosa y sugieren que el ejercicio moderado podría tener efectos adicionales cuando se emplea en el tratamiento de la IR.Introduction: a sustained elevation of glucocorticoid production has been associated with the somatic and biochemical changes observed in insulin-resistant patients and in animal models of insulin resistance (IR) as well. We previously demonstrated that sucrose-induced IR affects adrenocortical morphology and function, and that these abnormalities could be prevented by the administration of an insulin-sensitizing PPAR-γ agonist. Objetives: in this study, we analyzed the impact of moderate exercise on changes in adrenocortical function and morphology associated with the development of IR, generated in male adult rats by the addition of 30% sucrose to the drinking water for 7 weeks. Methodology. Results: body and adipose tissue weights increased in sucrose-treated animals, who also displayed higher glycemic and insulinemic levels as well as hypertriglyceridemia. An altered glycemic response to an i.p. insulin test was also detected. Adrenal glands showed a neutral lipid infiltration and increased expression levels of StAR, CYP11A1, IL-1β, TNF-α, iNOS and COX-2. Furthermore, sucrose-treated animals exhibited higher basal corticosterone levels. Exercise training sessions consisted of running on an adapted motorized treadmill for up to 7 min/day. This moderate exercise protocol fully prevented the instauration of the IR-associated somatic and metabolic changes as well as the lipidic infiltration of the adrenal glands, and reversed the inflammatory changes and the increase in corticosterone output. Conclusions: our results underline the negative impact of high dietary fructose consumption, and suggest that moderate exercise could exert additional beneficial effects when employed as a therapeutic strategy in the management of IR.Fil: Martinez Calejman, Camila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Mercau, María Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Repetto, Esteban Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Astort, Francisco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Arias, Pablo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Cs.médicas. Escuela de Cs.médicas. Cátedra de Fisiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cymeryng, Cora Betriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Melatonin prevents early pituitary dysfunction induced by sucrose-rich diets

While physiological levels of glucocorticoids are required to ensure proper functions of the body, consistently high levels may engender several deleterious consequences. We have previously shown an increase in the activity of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis in rats fed sucrose-rich diets (SRD). The main goal of this study was to analyze the processes involved in the modulation of the pituitary production of ACTH by SRD, and to test melatonin as a possible therapeutic agent for the prevention of the HPA axis dysfunction. Male Wistar rats were fed standard chow and either SRD (30% sucrose in the drinking water) or plain water for three weeks. Melatonin was administered as subcutaneous pellets. Results showed that SRD treatment induced an increase in systemic ACTH and corticosterone levels and a decrease in melatonin levels. In the pituitary gland, we also detected an increase in the expression levels of proopiomelanocortin (POMC) that was accompanied by increased levels of: lipoperoxides, nitro-tyrosine modified proteins, catalase, heme oxygenase-1, interleukin-1β mRNA, and by an increase in the tissue number of inflammatory cells (F4/80 and Iba-1 positive cells). Melatonin treatment prevented all these systemic and pituitary changes as well as the increase in POMC expression induced by incubation of AtT-20 corticotrophs with conditioned media obtained from stimulated macrophages. In conclusion, stimulation of POMC/ACTH production in rats fed a SRD could involve the generation of oxidative stress and inflammation in the pituitary gland. Melatonin treatment prevented these effects and normalized the activity of the HPA axis.Fil: Mercau, María Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Calanni, Juan Salvador. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Aranda, Marcos Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Caldareri, Lilian Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Rosenstein, Ruth Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Repetto, Esteban Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Cymeryng, Cora Betriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Clinical Performance of Two Methods for Detecting Anti SARS-CoV-2 Antibodies

Evaluating the clinical performance of available methods to detect antibodies against Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus-2 (SARS-CoV-2) has become a primordial issue in clinical laboratories. The aim of this study was to evaluate the clinical performance of two methods for SARS-CoV-2 antibodies detection, an automated Chemiluminescent Immunoassay (CLIA) and an immunochromatographic Lateral-Flow Assay (LFA) in patients with positive reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Performance for CLIA method was Positive Agreement (PA) 56.6% and Negative Agreement (NA) 96,6% for IgM and PA 85.8%/NA 90,2% for IgG. Performance for LFA method was PA 56.2% and NA 100% for IgM and PA 95.5% and NA 100 % for IgG. LFA general agreement IgG was better than CLIA. In both methods, significant differences in Kappa index are observed when IgG and IgM are compared. When evaluating the data from a clinical perspective, we found that both method performance for IgM detection may not meet the expected requirements for their clinical utility and could lead to an inappropriate medical decision. The findings of this study show that both immunoassay methods might be reliable for assessing immunological response in COVID-19 patients. Our results also confirm that IgG measurement could be helpful, especially for epidemiological studies in our population. These results provide evidence to justify epidemiological studies in our population.Fil: Jacobsen, Dario Gustavo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Gonzalez, D.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Fisiopatología y Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Jamardo, J.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Ibar, C.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Pugliese, L.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Fortuna, F.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Carrizo, E.. Coordinadora de Salud Misionar; ArgentinaFil: Caro, E. M.. Laboratorio Biogenar; ArgentinaFil: Perazzi, Beatriz Elizabeth. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Fisiopatología y Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Repetto, Esteban Martín. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Reboredo, G.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Fabre, B.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Fisiopatología y Bioquímica Clínica; Argentin

Adrenocortical response to sepsis in insulin resistant animals

Adrenal insufficiency in patients with insulin resistance(IR) could affect the body´s response to stressful situations. Administrationof sucrose in the drinking water (DRS), to rodents, constitutes a valid modelfor human IR as it reproduces many of its characteristics. The aim of thepresent study was to analyze the HPA axis response in DRS-treated ratssubjected to a ligation and cecal puncture procedure (CLP), a very wellcharacterized sepsis model.Adult male Wistar rats were randomly distributed in sixgroups: Control, DRS, Control-Sham, Control-CLP, DRS-Sham and DRS-CLP. Rats inDRS groups received 30% sucrose for 15 weeks. IR was determined during the 10thweek by an insulin tolerance test. Sham or CLP surgeries were performed duringthe 15th week. For the following 24 hours before sacrifice, animalswere observed and body temperature was measured. Results indicate that surgery induces a significant increasein serum corticosterone levels in all groups (p<0.0001). Compared to Control-Sham, corticosterone levelswere higher in the C-CLP, DRS-SHAM and DRS-CLP groups (p<0.01) while only the DRS-CLP group showed higher circulatingACTH levels (p<0.01). Histologicalexamination of H&E stained tissues showedan area of ​​greater vascularization in the adrenal cortex of the DRS-CLP groupcompared to others. eNOS mRNA levels, as determined by RT-qPCR were higher inthe DRS-CLP group compared to others. In summary, regardless of circulating ACTH levels, DRS treatmentprevented the CLP-dependent increase in corticosteronemia. Taking into accountthe key role of glucocorticoids in the stress response, animals presenting anattenuated glucocorticoid output during sepsis may have a worse prognosis.Fil: Caldareri, Lilian Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Wiszniewski, Morena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Vecino, Carolina Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Repetto, Esteban Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Gonzalez, Susana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaLXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; IX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas y VI Reunión Científica Regional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de LaboratorioMar del PlataArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalSociedad Argentina de BiologíaSociedad Argentina de ProtozoologíaAsociación Argentina de NanomedicinasAsociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratori

Impaired HPA axis function in diabetes involves adrenal apoptosis and phagocytosis

Purpose: The aim of the present study was to analyze the involvement of oxidative stress and inflammation in the modulation of glucocorticoid production in the adrenal cortex of diabetic rats. Methods: Male Wistar rats were treated with or without streptozotocin (STZ, an insulinopenic model of diabetes) and either α-lipoic (90 mg/kg ip.), α-tocopherol (200 mg/kg po.) or with STZ and supplemented with insulin (STZ + INS: 2.5U/day) for 4 weeks. Oxidative/nitrosative stress parameters and antioxidant enzymes were determined in adrenocortical tissues. Apoptosis and macrophage activation were evaluated by immunohistochemistry (TUNEL and ED1 + ). Basal and ACTH-stimulated corticosterone production were assessed by RIA and plasma ACTH levels were determined by an immunometric assay. Results: Diabetic rats showed a diminished response to exogenous ACTH stimulation along with higher basal corticosterone and lower plasma ACTH levels. In the adrenal cortex we determined an increase in the levels of lipoperoxides, S-nitrosothiols, nitric oxide synthase activity and nitro-tyrosine modified proteins while catalase activity and heme oxygenase-1 expression levels were also elevated. Antioxidant treatments were effective in the prevention of these effects, and in the increase in the number of apoptotic and phagocytic (ED1 + ) cells detected in diabetic rats. No changes were observed in the STZ + INS group. Conclusions: Generation of oxidative/nitrosative stress in the adrenal cortex of diabetic rats leads to the induction of apoptosis and the activation of adrenocortical macrophages and is associated with an elevated basal corticosteronemia and the loss of the functional capacity of the gland.Fil: Repetto, Esteban Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Wiszniewski, Morena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Bonelli, Ana L.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Vecino, Carolina Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Martinez Calejman, Camila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Arias, Pablo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Cymeryng, Cora Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires; Argentin

Moderate exercise prevents functional remodeling of the anterior pituitary gland in diet-induced insulin resistance in rats: Role of oxidative stress and autophagy

A sustained elevation of glucocorticoid production, associated with the establishment of insulin resistance (IR) could addto the deleterious effects of the IR state. The aimofthis study is to analyze the consequences of long-term feeding with a sucrose-rich diet (SRD) on Pomc/ACTH production, define the underlying cellular processes, and determine the effects of moderate exercise (ME) on these parameters. Animals fedastandard chow withorwithout 30% sucrose in the drinking water were subjected to ME. Circulating hormone levels were determined, and pituitary tissues were processed and analyzed by immunobloting and quantitative real-time PCR. Parameters of oxidative stress (OxS), endoplasmic reticulum stress, and autophagy were also determined. Rats fed SRD developed a decrease in pituitary Pomc/ACTH expression levels, increased expression of antioxidant enzymes, and induction of endoplasmic reticulum stress and autophagy. ME prevented pituitary dysfunction as well as induction of antioxidant enzymes and autophagy. Reporter assays were performed in AtT-20 corticotroph cells incubated in the presence of palmitic acid. Pomc transcription was in hibited by palmitic acid-dependent induction of OxS and autophagy, as judged by the effect of activators and inhibitors of both processes. Long-term feeding with SRD triggers the generation of OxS and autophagy in the pituitary gland, which could lead to a decline in Pomc/ACTH/glucocorticoid production. These effects could be attributed to an increase in fatty acids availability to the pituitary gland. ME was able to prevent these alterations, suggesting additional beneficial effects of ME as a therapeutic strategy in the management of IR.Fil: Mercau, María Elisa. Virginia Tech University; Estados Unidos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Repetto, Esteban Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; ArgentinaFil: Perez, Matías N.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; ArgentinaFil: Martinez Calejman, Camila. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Sanchez Puch, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; ArgentinaFil: Finkielstein, Carla V.. Virginia Tech University; Estados UnidosFil: Cymeryng, Cora Betriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentin

Role of CREB on heme oxygenase-1 induction in adrenal cells: Involvement of the PI3K pathway

In addition to the well-known function of ACTH as the main regulator of adrenal steroidogenesis, we have previously demonstrated its effect on the transcriptional stimulation of HO-1 expression, a component of the cellular antioxidant defense system. In agreement, we hereby demonstrate that, in adrenocortical Y1 cells, HO-1 induction correlates with a significant prevention of the generation of reactive oxygen species induced by H2O2/Fe2+. ACTH/cAMP-dependent activation of redox-imbalanced related factors such as NRF2 or NFκB and the participation of MAPKs in this mechanism was, however, discarded based on results with specific inhibitors and reporter plasmids. We suggest the involvement of CREB in HO-1 induction by ACTH/cAMP, as transfection of cells with a dominant-negative isoform of CREB (DN-CREB-M1) decreased, while overexpression of CREB increased HO-1 protein levels. Sequence screening of the murine HO-1 promoter revealed CRE-like sites located at −146 and −37 of the transcription start site and ChIP studies indicated that this region recruits phosphorylated CREB (pCREB) upon cAMP stimulation in Y1 cells. In agreement, H89 (PKA inhibitor) or cotransfection with DN-CREB-M1 prevented the 8Br-cAMP-dependent increase in luciferase activity in cells transfected with pHO-1[−295/+74].LUC. ACTH and cAMP treatment induced the activation of the PI3K/Akt signaling pathway in a PKA-independent mechanism. Inhibition of this pathway prevented the cAMP-dependent increase in HO-1 protein levels and luciferase activity in cells transfected with pHO-1[−295/+74].LUC. Finally, here we show a crosstalk between the cAMP/PKA and PI3K pathways that affects the binding of p-CREB to its cognate element in the murine promoter of the Hmox1 gene.Fil: Astort, Francisco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Repetto, Esteban Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Rocha Viegas, Luciana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Mercau, María Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Sanchez Puch, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Finkielstein, C. V.. Polytechnic Institute and State University; Estados UnidosFil: Pecci, Adali. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Cymeryng, Cora Betriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Evaluation of an automated chemiluminescent immunoassay for salivary cortisol measurement. Utility in the diagnosis of Cushing's syndrome

The aim of the current study was to validate an automated chemiluminescent immunoassay for cortisol quantification in saliva and to determine the cut-off level for Cushing´s Syndrome diagnosis in an adult population. The salivary cortisol levels from healthy individuals and patients previously diagnosed with Cushing´s Syndrome were measured with Siemens Immulite 2000 ® automatic chemiluminescent enzyme-immunoassay analyser with a brief modification. The limit of quantification was 3,4 nmol/L. The assay also demonstrated a high level of accuracy, as determined by linearity under dilution and recovery tests. Using this methodology, levels higher than 5.7 nmol/L is indicative of Cushing´s Syndrome with a diagnostic sensitivity and specificity of 90,5% and 97.4% respectively. The assay validated in the present study could be used in the clinical laboratories for the evaluation of cortisol levels in patients in which Cushing´s Syndrome is suspected.Fil: Repetto, Esteban Martín. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gonzalez, Diego Javier. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Jacobsen, Dario. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Smithuis, Fernando. TCba Salguero Centro de Diagnóstico; ArgentinaFil: Jamardo, Juan. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Cano, Mariel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Aranda, Claudio. TCba Salguero Centro de Diagnóstico; ArgentinaFil: Oneto, Adriana. TCba Salguero Centro de Diagnóstico; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Berg, Gabriela Alicia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fabre, Bibiana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentin

Hair cortisol: A new tool for evaluating stress in programs of stress management

Aims: Longitudinal and experimental studies have shown that chronic stress contributes to the onset and progression of different diseases. Although it is not possible to eliminate stress completely, people can learn to manage it by participating in different kinds of stress management interventions. This study examined the effectiveness of stress management interventions on neuroendocrine responses in stressed students and health professionals, by measuring hair cortisol in comparison to salivary cortisol. Main methods: Salivary and hair cortisol measurements were performed in 37 subjects (31 women, 6 men; mean age 34.0 ± 10.6) who attended to a Coping Stress and Quality of Care Program at the University of Buenos Aires. Cortisol was measured at the beginning and at the end of the program. The State-Trait Anxiety Inventory STAI was used to evaluate state and trait anxiety. Key findings: In subjects who completed the program, no differences were observed in salivary cortisol levels between the first and the last session. However, in these subjects, hair cortisol obtained in the last session was significantly lower than hair cortisol in the first session. Significance: Hair cortisol appears to be a better biomarker than salivary cortisol for evaluation of the effectiveness of a stress reduction program and it seems to be a better indicator of stress system dysregulation as well.Fil: Iglesias, Silvia Liliana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Jacobsen, Darío. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Gonzalez, Diego Javier. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Azzara, Sergio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Repetto, Esteban Martín. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Jamardo, Juan. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Garín Gómez, Sabrina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Mesch, Viviana Rosa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Berg, Gabriela Alicia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fabre, Bibiana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin