Caracterização fenotípica e molecular de cepas Klebsiella pneumoniae obtidas de amostras clínicas

Klebsiella pneumoniae, na condição de patógeno oportunista, causa infecções principalmente em recém-nascidos, idosos e pacientes imunocomprometidos por doenças crônicas como diabetes, etilismo, neoplasias, e tem exercido papel relevante nas infecções hospitalares. Pacientes internados em Unidades de Terapia Intensiva e os submetidos a procedimentos invasivos ou à terapia com antimicrobianos beta-lactâmicos, estão mais predispostos a processos infecciosos por K.pneumoniae. Os tratos urinário e respiratório são mais acometidos por este microrganismo, embora apresente, com freqüência, infecções relacionadas ao uso de cateter e sepses. Com o objetivo de caracterizar, fenotípica e molecularmente, 75 isolados de K.pneumoniae obtidos de diferentes materiais clínicos, foram analisados quanto ao perfil de suscetibilidade e produção de ESBL, bem como quanto à presença de fatores de virulência. Para tanto, foram estudados 25 isolados provenientes de pacientes hospitalizados portadores de infecções, 25 isolados de pacientes internados e colonizados por K.pneumoniae, 25 isolados procedentes de indivíduos saudáveis da comunidade extra-hospitalar. Entre os isolados hospitalares observou-se a produção de K.pneumoniae predominantemente com fenótipo mucóide, embora o gene kpsII, que codifica para cápsula do sorotipo K2 de Klebsiella, tenha sido encontrado em 8% desses isolados e em nenhuma amostra da comunidade. As cepas de K.pneumoniae investigadas, apresentaram elevada prevalência de ESBL (72%) entre os isolados hospitalares. A totalidade dos isolados comunitários mostrou perfil de sensibilidade acentuado e nenhuma produção de ESBL. As seqüências gênicas blaTEM e blaCTX-M foram predominantes entre os produtores de ESBL. Os genes fimA e fimH, que codificam fímbria tipo 1, tiveram distribuição eqüitativa (60%, 52% e 48%, respectivamente), entre os grupos, enquanto que os isolados de K.pneumoniae obtidos de infecção, mostraram maior prevalência do gene iutA , codificador do receptor para aerobactina. Da mesma forma, os genes mrkA e mrkD, que codificam para pilina e adesina da fímbria tipo 3 de Klebsiella, respectivamente, foram observados em maior prevalência entre os isolados hospitalares (84%). Conclui-se que isolados infecciosos de K.pneumoniae apresentaram maior número de genes envolvidos na patogenicidade, sugerindo que este microrganismo está capacitado a romper as barreiras naturais de defesa do hospedeiro.Klebsiella is well known to most clinicians as a cause of community-acquired bacterial pneumonia, ocurring particularly in chronic alcoholics. The majority of Klebsiella infections, however, are nosocomial. As opportunistic pathogens, Klebsiella ssp. primarily affect immunocompromised individuals who are hospitalized and suffrer from severe underlying diseases such as diabetes mellitus or chronic pulmonary obstruction. Nosocomial Klebsiella infections are largely caused by K.pneumoniae. The urinary tract is the most common site of infections. Klebsiella is the secon cause of nosocomial Gram-negative bacteremia. ln pediatric wards, nosocomial Klebsiella infections are especially troublesome, particularly in premature infants and intensive care unit patients. The aim of this study was to investigate the antibiotic-resistant strains, extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) producing strains, and virulence genes among 75 strains of K.pneumoniae isolated from nosocomial infections (25), hospitalized patients without infections (25), and from comity carriers outside of the hospital (25). Among the K.pneumoniae isolates obtained in the hospital there was a predominance of strains with a mucoid phenotype, even though the kpsII gene, which codes for the capsule found in the K2 Klebsiella serotype, was found only in 8% of these isolates, and in none of the samples obtained in the community. The K.pneumoniae nosocomial strains studied presented a high prevalence of ESBL production (72%). AII of the community obtained isolates presented a highly susceptible profile and none produces ESBL. Among ESBL producing strains, the blaTEM and the blaCTX-M genes were predominant. The fimA and fimH genes, that code for type 1 fimbriae showed an equitative distribtion between the groups, however, the nosocomial K.pneumoniae isolates presented a greater prevalence of the iutA gene, which codes for the aerobactin receptor. Likewise, the mrkA and mrkD genes that code for the type 3 Klebsiella fimbriae pilin and adhesin, respectively, were observed with a higher prevalence among nosocomial isolates. It can be concluded that K.pneumoniae clinicai infection isolates present a higher number of genes involved in pathogenicity, which suggests that this kind of isolate is able to break the natural defense barriers of the host organism

Investigação de enfermagem sobre o uso de cateteres venosos em clientes hospitalizados

Através do presente estudo pode-se concluir que a cateterização intravenosa foi efetuada em 59,4% da amostra por acesso venoso dificultado; em 100% da amostra foi efetuado curativo fechado, sendo que a troca do curativo foi feita a cada 48 horas em 89,8% da amostra; o tempo de permanência do cateter intravenoso foi de até 10 dias em 52% dos casos, sendo que o cateter foi retirado em 34,8% por suspensão da medicação e problemas técnicos, respectivamente. O microrganismo de maior incidência foi Stophylococcus aureus em 20,3% da amostra analisada

Nasal bacteriological flora: a study among medical residents of Londrina University Hospitais – Parana State – Brazil <br> Flora bacteriana nasal: estudo entre médicos residentes dos Hospitais Universitários de Londrina – Paraná

There is little information about the growth of pathogenic microorganism of the nasal flora in tropical countries since most investigations were held in places with other climate. We identified the nasal flora bacteria of the medical residents of Londrina State University Hospitals. The method is the same that was described previously. The study was carried out in 88 medical residents and the results are presented in tables. It is possible confirm that the majority of the residents has 2 or more pathogenic bacteria in nasal flora with antibiotic resistance for penicillin (29%), erythromycin (19%), terramycin (12%) and cloranfenicol (9%). The resistance of the bacteria is low for the new antibiotics like ciprofloxacin, oxacilin, rifamphycin and the cephepyme.   As publicações sobre a flora bacteriana nasal em pessoas normais são poucas e a maioria foi realizada em países de clima temperado. O objetivo é identificar esta flora entre os médicos residentes dos hospitais da Universidade Estadual de Londrina. A coleta foi realizada com zaragatoa, e a identificação dos germes utilizou-se do método descrito anteriormente. O material consiste de 88 residentes e os resultados são apresentados em forma de tabelas. Podemos afirmar que a maioria dos médicos residentes dos Hospitais universitários de Londrina é portador de mais de 2 germes patogênicos na fossa nasal, com alta resistência aos antibióticos testados, como a penicilina (29%), eritromicina (19 %), terramicina 12%, cloranfenicol 9%. Os germes apresentaram resistência menor aos antibióticos mais novos de 2% para a ciprofloxacina, oxacilina, rifampicina e a cefepime. O estafilococo coagulase negativo, considerado flora normal, também mostrou resistência elevada

Estudos de sensibilidade de bactérias isoladas em 1981 em materiais obtidos de pacientes atendidos no Hospital Universitário Regional do Norte do Paraná

  Análise de dados referentes ao padrão de sensibilidade a diversos antimicrobianos de todos os microrganismos isolados em culturas feitas pelo setor de Microbiologia Clinica do Laboratório Clinico do Hospital Universitário Regional do Norte do Paraná, no ano de 1981, provenientes tanto de infecções comunitárias quanto hospitalares encontradas em pacientes ambulatoriais e hospitalizados. Os resultados mostram um elevado padrão de sensibilidade das bactérias Gram negativas à amicanica, mostrando-se este um antimicrobiano que deve a todo custo ser reservado para tratamento de infecções hospitalares ou infecções sistêmicas muito graves; elevado padrão de sensibilidade das cefalosporinas e rifampicinas às cepas isoladas de Staphylococcus aureus, superior ao encontrado para oxacilina, e elevado índice de resistência às ampicilinas entre quase todos os microrganismos isolados

Estudos de sensibilidade de bactérias isoladas em 1981 em materiais obtidos de pacientes atendidos no Hospital Universitário Regional do Norte do Paraná <br>Sensitivity studies of bacteria isolated in 1981 in materials obtained from patients treated at the Regional University Hospital of Northern Paraná

Análise de dados referentes ao padrão de sensibilidade a diversos antimicrobianos de todos os microrganismos isolados em culturas feitas pelo setor de Microbiologia Clinica do Laboratório Clinico do Hospital Universitário Regional do Norte do Paraná, no ano de 1981, provenientes tanto de infecções comunitárias quanto hospitalares encontradas em pacientes ambulatoriais e hospitalizados. Os resultados mostram um elevado padrão de sensibilidade das bactérias Gram negativas à amicanica, mostrando-se este um antimicrobiano que deve a todo custo ser reservado para tratamento de infecções hospitalares ou infecções sistêmicas muito graves; elevado padrão de sensibilidade das cefalosporinas e rifampicinas às cepas isoladas de Staphylococcus aureus, superior ao encontrado para oxacilina, e elevado índice de resistência às ampicilinas entre quase todos os microrganismos isolados.This article presents the isolated microorganisms sensibility at the Microbiology Section of the Clinical Laboratory of the Hospital Universitário Regional do Norte do Parana, as well as the percentile of positiviness concerning the clinical material evaluated

Microbiological analysis of the central venous catheter tips from hospitalized patients at Hospital Universitário of Universidade Estadual de Londrina <br> Análise microbiológica de pontas de cateteres venosos centrais provenientes de pacientes internados no Hospital Universitário da Universidade Estadual de Londrina

Central Venous Catheters (CVC) are used in intravenous therapy in order to facilitate diagnosis and treatment. They allow medicine administration, parenteral nutrition and also vascular access in hemodialysis. However, the use of these catheters offers risks of systemic and local infection, including endocarditis and bacteremia. The aim of this study was to isolate microorganisms from CVC utilizing the semiquantitative culture technique, and to identify them through conventional biochemical tests and an automated system. For the study, 198 CVC tips were evaluated and 105 (53%) were considered positive, that is, showed microbial growth ³ 15 CFU. The microorganisms found were the following: 63.8% Grampositive bacteria, 30.5% Gram-negative bacteria, and 5.7% yeast. The most isolated were: coagulasenegative Staphylococci (35.2%), Staphylococcus aureus (25.7%), Klebsiella pneumoniae (8.5%), Pseudomonas aeruginosa (7.6%), Acinetobacter baumannii (7.6%) and Candida albicans (4.7%). The increase of infection cases related to catheter has been observed worldwide reflecting the increase of invasive medical procedures used to treat patients. This work allowed the identification of the microorganisms most frequently isolated from CVC tips at a teaching hospital in the region of Londrina- PR. The identification of these microorganisms is extremely important in order to optimize the treatment of the infections and to establish methods of prevention. Cateteres venosos centrais (CVC) são utilizados na terapia intravenosa com a finalidade de facilitar o diagnóstico e o tratamento do paciente, pois permitem a administração de medicamentos, nutrição parenteral, além de serem usados como acesso vascular para hemodiálise. Entretanto, o uso desses cateteres oferece riscos de infecção local e sistêmica, incluindo endocardite e bacteremia. O presente estudo teve por objetivo isolar microrganismos de CVC, utilizando a técnica de cultura semi-quantitativa, e identificar os mesmos, mediante provas bioquímicas convencionais e por sistema automatizado. Neste estudo, 198 pontas de CVC foram avaliadas e 105 (53%) foram consideradas positivas, ou seja, apresentaram crescimento microbiano ³ 15 UFC. Os microrganismos encontrados foram os seguintes: 63,8% de bactérias Gram-positivas; 30,5% de bactérias Gram-negativas e 5,7% de leveduras. Os microrganismos predominantes foram: Staphylococci coagulase-negativa (35,2%), Staphylococcus aureus (25,7%), Klebsiella pneumoniae (8,5%), Pseudomonas aeruginosa (7,6%), Acinetobacter baumannii (7,6%) e Candida albicans (4,7%). O aumento da incidência de infecção relacionada a cateter tem sido observado mundialmente, e decorre do aumento de procedimentos médicos invasivos, utilizados para o tratamento de pacientes. Este estudo possibilitou identificar os microrganismos predominantes em pontas de CVC, em um hospital escola da região de Londrina-PR. A identificação destes microrganismos é de extrema importância para otimizar o tratamento da infecção e estabelecer medidas preventivas

Hemólise produzida por Candida tropicalis isoladas de amostras clínicas Hemolysis produced by Candida tropicalis isolates from clinical samples

INTRODUÇÃO: Leveduras do gênero Candida são responsáveis pela maioria das infecções fúngicas em humanos. Candida tropicalis tem sido uma das mais comumente isoladas dentre as espécies não-albicans. O objetivo foi analisar a hemólise in vitro promovida por isolados clínicos de C. tropicalis provenientes de sangue e outras amostras clínicas de pacientes internados no Hospital Universitário da UEL, PR-Brasil. MÉTODOS: Foi avaliada a hemólise promovida por 28 isolados clínicos de C. tropicalis, sendo os isolados agrupados em classes de acordo com os níveis de hemólise. RESULTADOS: A maioria dos isolados de sangue apresentou hemólise fraca (+), enquanto as classes de hemólise forte (+++) e muito forte (++++) foram as predominantes nos isolados de outras amostras clínicas como urina, lesão de unha e secreção traqueal, embora não tenham sido detectadas diferenças estatísticas (p>0,05). CONCLUSÕES: Isolados de C. tropicalis, obtidos de diferentes amostras clínicas, apresentam capacidade de promover hemólise in vitro.<br>INTRODUCTION: Yeasts belonging to the genus Candida are responsible for the majority of fungal infections in humans. Candida tropicalis has been one of most commonly isolated non-albicans species. To analyze in vitro hemolysis promoted by clinical isolates of C. tropicalis obtained from blood and other clinical samples from hospitalized patients at the University Hospital of Londrina State University, Paraná, Brazil. METHODS: The hemolysis promoted by 28 clinical isolates of C. tropicalis was evaluated, and the isolates were grouped into classes according to the hemolysis levels. RESULTS: The majority of the blood isolates showed weak hemolysis (+), while the classes of strong hemolysis (+++) and very strong hemolysis (++++) predominated among isolates from other clinical samples such as urine, nail lesions and tracheal secretions. However, no statistical differences were detected (p> 0.05). CONCLUSIONS: Isolates of C. tropicalis obtained from different clinical samples showed a capacity to promote in vitro hemolysis

Comparison of Vitek-2 automated identification system and PCR-ITS for species characterization of clinical isolates of Candida spp

Serious infections caused by genus Candida have become a challenge in the diagnostic question, in order to detect and identify the etiologic agent of agile, precise and standardized form in manner clinical laboratories. The prediction of susceptibility to antifungal agents, and the need to generate epidemiological data highlight the importance of routine identification of yeast species involved in infections. Among the 200 Candida species already described, C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei and C. lusitaniae are most often related with infections in humans. All of the phenotypic methods of identification of Candida have limitations, especially the characterization of the species not C. albicans, however, the application of molecular methods may reflect the increased cost and spent time for obtain results on laboratory. In order to evaluate the implementation of the automated system Vitek 2 ID - YST (bioMerieux) combined with the use of chromogenic agar in the routine identification of Candida species were tested 44 isolates from invasive infection by inoculation of chromogenic agar and automated panel and realization DNA amplification for the internal transcribed spacer regions of rRNA 1 and 2 (ITS - PCR). Oligonucleotides specific species were used and the size of the amplified product was correlated to other results. The automated system identified 95.4 % of the isolates when in association with colonial features observed in chromogenic medium, however, the use of PCR -ITS or more sensitive methodologies would be needed to solve the other results, ambiguous and erroneous