Estudios de Microbiota urinaria en personas asintomáticas y sintomáticas ¿Qué tienen los microorganismos para decir?

La vejiga urinaria se consideraba un órgano estéril, sin embargo se ha demostrado la existencia de una microbiota urinaria. Nos propusimos evaluar la presencia bacterias en la orina de personas asintomáticas y con patología u sintomáticas utilizando distintos métodos de cultivo, de bacterias intracelulares de vejiga. Las muestras se sembraron mediante urocultivo estándar -UcE- y expandido - EQUC- en distintas condiciones de cultivo y atmosféricas. La presencia de bacterias intracelulares se evaluó con una técnica de lisis celular y cultivo y mediante microscopía láser confocal (MLC). Los microorganismos presentes con diferentes morfologías en los distintos medios se identificaron por MALDI-TOF. Se recolectaron por la técnica de chorro medio 114 muestras de orina (51 de sexo femenino -7 niñas- y 63 de sexo masculino -14 niños-), de 69 asintomáticos y 45 sintomáticos. En UcE hubo crecimiento bacteriano en 91/114 muestras (79,8 %), 57 asintomáticos (83%) y 34 sintomáticos (75,6%). En EQUC, hubo crecimiento en 107/114 (94%) asintomáticos (97,1%) y 40 sintomáticos (88,9%). En asintomáticos y sintomáticos, el EQUC permite detectar crecimiento en un 15% más en relación al UcE (p=0,28 y p=0,0001). Se observaron bacterias intracelulares por la técnica de cultivo en 54/114 muestras de orina, 26/67 asintomáticos (38 %) y 28/45 sintomáticos (62 %), p=0,013. Hasta el momento se analizaron por ambas técnicas (cultivo y MLC) 87 muestras, en 38 (44%) se evidenciaron bacterias intracelulares (19/56 asintomáticos y 19/3 sintomáticos, p = 0,0023). La identificación de los microorganismos reveló u heterogeneidad de especies bacterianas presentes tanto en personas asintomáticas como sintomáticas. De las bacterias intracelulares se observó predominancia d Escherichia coli, seguido por Stenotophomonas maltophilia, Enterococcus faecalis y Proteus mirabilis. Estos estudios demuestran la presencia de bacterias en la orina de personas sanas y con sintomatología, e incluso de bacterias intracelulares. Si bien estos resultados son preliminares pueden establecer la predisposición a tener alguna patología del tracto urinario e incluso pueden sentar las bases para futuras terapias de re-establecimiento de la microbiota urinaria posterior a terapias antimicrobianas o en casos infecciones recurrentes.ANI

Presence of intracellular bacterial communities in uroepithelial cells, a potential reservoir in symptomatic and non-symptomatic people

Abstract Background Urinary tract infection is one of the most common infections in humans, affecting women in more proportion. The bladder was considered sterile, but it has a urinary microbiome. Moreover, intracellular bacteria (IB) were observed in uroepithelial cells from children and women with urinary tract infections (UTIs). Here, we evaluated the presence of IB in urine from healthy people and patients with UTI symptoms. Methods Midstream urine was self-collected from 141 donors, 77 females and 64 males; 72 belonged to the asymptomatic group and 69 were symptomatic. IB was characterized by a culture-dependent technique and visualized by confocal microscopy. Urine was also subjected to the classical uroculture and isolated bacteria were identified by MALDI-TOF. Results One-hundred and fifteen uroculture were positive. A significant association was observed between the presence of symptoms and IB (P = 0.007). Moreover, a significant association between the presence of IB, symptoms and being female was observed (P = 0.03). From the cases with IB, Escherichia coli was the most frequent microorganism identified (34.7%), followed by Stenotrophomonas maltophilia (14.2%), Staphylococcus spp (14.2%), and Enterococcus faecalis (10.7%). Intracellular E. coli was associated with the symptomatic group (P = 0.02). Most of the intracellular Staphylococcus spp. were recovered from the asymptomatic group (P = 0.006). Conclusions Intracellular bacteria are present in patients with UTI but also in asymptomatic people. Here, we report for the first time, the presence of S. maltophilia, Staphylococcus spp., and Enterobacter cloacae as intracellular bacteria in uroepithelial cells. These findings open new insights into the comprehension of urinary tract infections, urinary microbiome and future therapies. Uroculture as the gold standard could not be enough for an accurate diagnosis in recurrent or complicated cases