Effect of Previous Incubation of Aeromonas hydrophila in Wastewater Prior to Its Transfer Into Marine Water Microcosms

The occurrence of the mesophilic motile Gram negative non enterobacterial species A. hydrophila in the wild is a major problem that deserves to be resolved since it is a potentially pathogen able to enter into a non-culturable state on routine bacteriological plating media. These non-culturable forms can be detected by several direct or indirect visualization methods. This species has frequently been isolated from pathological forms in fish farming marine areas, especially near wastewater discharges. Consequently, we studied A. hydrophila in marine water microcosms placed during a 24 hour period in treated waste waters and compared with the homologous strain not placed in the same conditions. Thus, two kinds of microcosms were prepared using filtered and autoclaved marine water or waste water, inoculated by A. hydrophila and maintained at 25°C in darkness. The results obtained indicated that A. hydrophila population incubated at 25°C in marine water declined rapidly (3.21 log units in plate count number) during the first three days. Additionally, we noted that A. hydrophila incubated in marine water after a previous treatment in waste water declined progressively to 2.74 log units (in plate count number). Nevertheless, we showed no significant variations of the number of total bacterial cells for A. hydrophila developed in marine water after prior treatment in waste water, despite the appearance of the VBNC form. During this state, rods of normal size, elongated cells and cocci were obtained. Concomitantly, we determined several changes in biochemical and antimicrobial patterns of stressed A. hydrophila, notably the acquisition of adipate metabolization and an increase of resistance to antimicrobial compounds, especially for A. hydrophila incubated in marine water after treatment in waste water.A. hydrophila (mésophile, Gram négative, mobile) compte parmi les espèces non entérobactériennes opportunistes du milieu aquatique. Son isolement ou son dénombrement en milieu marin selon les méthodes classiques est compromis par l’acquisition de la forme viable non cultivable (VNC) chez la bactérie dont la visualisation repose sur des méthodes moins usuelles, notamment la cytométrie en image ou en flux. En pathologie aquacole, A. hydrophila compte parmi les espèces les plus fréquemment isolées, notamment dans les zones de rejets. Le présent travail a été effectué en vue d’étudier la survie d’A. hydrophila en eau de mer après transit en eaux usées domestique. Ainsi, deux types de microcosmes ont été utilisés, le premier rempli d’eau de mer filtrée, stérile et placé à 25 °C à l’obscurité; le second est rempli d’eau usée filtrée, stérile et placée pendant 24 h à l’obscurité avant transfert en eau de mer. Les caractéristiques intrinséques : cultivabilité, forme cellulaire, profils biochimiques et antibiotypiques ont été suivis au cours de ce stress. Les résultats obtenus indiquent que la cultivabilité d’A. hydrophila placée directement dans l’eau de mer diminue rapidement durant les trois premiers jours d’incubation (3,21 Ulog). Aussi, nous avons noté une réduction progressive de la cultivabilité d’A. hydrophila placée en eau de mer après transit en eaux usées (2,74 Ulog). Néanmoins, le nombre de cellules totales ne montre pas de variation significative tout le long de la période de suivi (30 jours), avec l’apparition de la forme Viable Non Cultivable (VNC). Au cours de ce stress, nous avons observé des cellules de formes bacillaires, allongées et arrondies réduites. Parallèlement, nous avons trouvé qu’A. hydrophila ayant séjourné en eau de mer (avec ou sans passage en eaux usées) a subi différentes modifications ayant porté aux caractéristiques biochimiques et antibiotypiques, dont les plus remarquables sont la capacité à métaboliser l’adipate et l’acquisition de nouvelles résistances aux antibiotiques, notamment après passage en eaux usées

Étude de l’influence des facteurs environnementaux sur la distribution de différentes populations bactériennes dans une station mytilicole de la lagune de Bizerte (Nord-Tunisie)

La présente étude a été effectuée en vue d’évaluer l’effet des fluctuations des paramètres abiotiques sur la distribution de différentes populations bactériennes viables dans la station mytilicole la plus productrice de la lagune de Bizerte (Nord‑Tunisie). Le suivi a été établi pendant une année (septembre 2004 ‑ août 2005) au niveau des neuf tables du site.Les dénombrements bactériens des coliformes totaux (CT), des entérocoques fécaux (EF), des Vibrionaceaes (VB) et des bactéries hétérotrophes cultivables (BHC) ont été effectués pour l’eau de surface, les moules (Mytilus galloprovincialis) ainsi que pour les sédiments. Ces charges bactériennes ont été corrélées à la température de l’eau, l’oxygène dissous, la salinité, le pH, la pluviométrie et l’ensoleillement, mesurés périodiquement en tout point du site.Le suivi des paramètres bactériologiques a révélé une présence assez importante de charges bactériennes pendant toute la période d’étude, notamment dans les moules et les sédiments, avec une distribution temporelle saisonnière. L’étude statistique a montré des corrélations positives, d’une part, entre les charges en polluants fécaux et la pluviométrie et, d’autre part, entre les charges en Vibrionaceaes et la salinité et la température.Ces résultats révèlent l’effet anthropique bactérien au niveau du site mytilicole : les rejets continentaux en hiver et la remontée des bactéries autochtones en période estivale ont une influence considérable sur la mytiliculture et son devenir dans la lagune de Bizerte.The present study aimed to assess the influence of abiotic parameters on the distribution of various viable bacterial populations in the most productive mussel farming area in the Bizerte Lagoon (Northern Tunisia). A monitoring survey was carried out over one year (September 2004 ‑ August 2005), within all the farming tables at the station. Bacterial enumerations of total coliforms (CT), fecal enterococci (EF), Vibrionaceae (VB) and cultivable heterotrophic bacteria (BHC) were carried out for surface water, mussels (Mytilus galloprovincialis) and sediments. These bacterial counts were correlated with water temperature, dissolved oxygen, salinity, pH, rainfall and sunshine, which were periodically measured at all points within the sampling area.The survey of the bacteriological parameters revealed high bacterial counts during the whole monitoring period, especially in the mussels and sediments, as well as seasonal variability. Statistical analyses revealed positive correlation between the loads of fecal pollutants and rainfall during the winter period, and between the loads of Vibrionaceae and salinity and temperature during the summer period.These results highlight the negative anthropogenic bacterial effect within the mussel farming areas: sewage discharges in winter, and the growth of autochthonous pathogenic bacteria during the summer period, have a considerable influence on the mussel culture in the Bizerte Lagoon

Evaluation of the Antibacterial Activity of New Dermaseptin Derivatives against <i>Acinetobacter baumannii</i>

Nosocomial infections represent one of the biggest health problems nowadays. Acinetobacter baumannii is known as an opportunistic pathogen in humans, affecting people with compromised immune systems, and is becoming increasingly important as a hospital-derived infection. It is known that in recent years, more and more bacteria have become multidrug-resistant (MDR) and, for this reason, the development of new drugs is a priority. However, these products must not affect the human body, and therefore, cytotoxicity studies are mandatory. In this context, antimicrobial peptides with potential antibacterial proprieties could be an alternative. In this research, we describe the synthesis and the bioactivity of dermaseptins and their derivatives against Acinetobacter baumannii. The cytotoxicity of these compounds was investigated on the HEp-2 cell line by MTT cell viability assay. Thereafter, we studied the morphological alterations caused by the action of one of the active peptides on the bacterial membrane using atomic force microscopy (AFM). The cytotoxicity of dermaseptins was concentration-dependent at microgram concentrations. It was observed that all tested analogs exhibited antibacterial activity with Minimum Inhibitory Concentrations (MICs) ranging from 3.125 to 12.5 μg/mL and Minimum Bactericidal Concentrations (MBCs) ranging from 6.25 to 25 μg/mL. Microscopic images obtained by AFM revealed morphological changes on the surface of the treated bacteria caused by K4S4(1-16), as well as significant surface alterations. Overall, these findings demonstrate that dermaseptins might constitute new lead structures for the development of potent antibacterial agents against Acinetobacter baumannii infections