Polinização de pepino, Cucumis sativus L. (Cucurbitales: Cucurbitaceae), pelas abelhas sem ferrão Scaptotrigona aff. depilis moure e Nannotrigona testaceicornis lepeletier (Hymenoptera: Meliponini) em casas de vegetação

When for a successful fruit development the fertilization of flowers is necessary, bees can be used as crop-pollinators in greenhouses. In the present study, we investigated the effectiveness of the stingless bees Scaptotrigona aff. depilis Moure and Nannotrigona testaceicornis Lepeletier as pollinators of cucumber plants (Cucumus sativus var. caipira) in greenhouses during the Brazilian winter season. The study was conducted in four greenhouses (GH), of which two greenhouses contained bee colonies to ascertain pollination of the cucumber plants (GH I, with S. aff. depilis, GH II, with N. testaceicornis), whereas the other two greenhouses (GH III, GH IV) had no bee colonies and served as control groups. Furthermore, we planted cucumbers in an open field plot (OA) where pollination by any/various visiting insects could occur. Each of the experimental areas measured 87.5 m². Without pollination (GH III, GH IV), the plants produced a low number of cucumbers, and the fruits were smaller and less heavy than in those experimental areas where pollination occurred. In the open field area, not protected against unfavorable climatic conditions, the plants produced fewer flowers than the plants in the greenhouses. The highest cucumber yield (with the highest amount of perfect fruits) was found in those greenhouses which housed the stingless bees as pollinators (GH I, GH II). Our results demonstrate that stingless bees can be successfully and efficiently used as pollinators of greenhouse cucumbers during the winter season.Quando a fertilização de flores é necessária para o desenvolvimento de frutos, abelhas podem ser utilizadas como polinizadores sob cultivo protegido. No presente estudo, a efetividade das abelhas sem ferrão Scaptotrigona aff. depilis Moure e Nannotrigona testaceicornis Lepeletier como polinizadoras de pepino (Cucumis sativus var. caipira) foi investigada sob cultivo protegido durante o inverno. O estudo foi conduzido em quatro casas de vegetação (GH), das quais duas continham colônias de abelhas para averiguar a polinização dos pepinos (GH I, com S. aff. depilis, GH II, com N. testaceicornis), e duas (GH III, GH IV) não continham colônias e serviram como grupos controle. Além disso, pepinos foram plantados numa área aberta (AO) onde polinização por vários insetos poderia ocorrer. Sem polinização (GH III, GH IV), as plantas produziram menor número de pepinos, e os frutos eram menores e menos pesados do que aqueles nas áreas experimentais onde a polinizacão ocorreu. Na área aberta, não protegida contra condições climáticas desfavoráveis, as plantas produziram menos flores do que as plantas nas casas de vegetação. A maior produção de pepinos (com a maior quantidade de frutos perfeitos) foi encontrada nas casas de vegetação com as abelhas como polinizadoras (GH I, GH II). Os resultados demonstraram que abelhas sem ferrão podem ser usadas com sucesso e eficiência como polinizadoras de pepinos sob cultivo protegido durante o inverno.FAPESPCoordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nivel Superior (CAPES)CNP

Métodos subsidiários para o diagnóstico da Leishmaniose tegumentar americana (LTA): comparação dos resultados do seqüenciamento de DNA e da PCR-RFLP para determinação da espécie de leishmania em amostras cutâneo-mucosas

FUNDAMENTOS: Métodos moleculares têm-se mostrados mais eficazes para o diagnóstico da LTA. OBJETIVOS: Comparar os resultados da intradermorreação de Montenegro (IRM), presença de leishmania em biópsia (Bc), reação de imunofluorescência indireta (Rifi), seqüenciamento de DNA e PCR-RFLP (-restriction fragment lenght polymorphism) para o diagnóstico da LTA. MÉTODOS: Foram estudados 152 pacientes com LTA. Para a PCR em Bc, utilizaram-se primers específicos para seqüência de 120bp do kDNA do minicírculo comum a todas as espécies de leishmanias. O produto da PCR, utilizado para seqüenciamento e para restrição enzimática com Hae III, foi comparado às culturas L. (L.) amazonensis e L. (V.) braziliensis. RESULTADOS: Houve predomínio do sexo masculino (75%), da cor branca (80%) e da profissão urbana (48%). A idade variou de três a 77 anos, com 56,5% entre 21 e 50 anos. 65,8% eram do Estado de São Paulo, prevalecendo a forma cutânea (79,6%). A IRM foi positiva em 73,4%, e a Rifi em 59,7%, enquanto a Bc evidenciou presença de leishmania em 30,6%. A PCR foi positiva em 81,6%, e a PCR-RFLP identificou L. (V.) braziliensis como espécie predominante (66%), o que também ocorreu com o seqüenciamento. Comparando PCR-RFLP e seqüenciamento, houve 61% de concordância entre os resultados, mostrando significância da PCR-RFLP para L. (V.) braziliensis. CONCLUSÕES: A IRM e a PCR foram estatisticamente equivalentes como métodos subsidiários para o diagnóstico da LTA, a PCR-RFLP e o seqüenciamento também o foram na identificação das espécies de leishmania, o primeiro apresentando menores custo e tempo de execução comparado ao seqüenciamento de DNA

Val247Leu polymorphism of β2 glycoprotein 1 gene may justify the genesis of anti β2GP1 antibodies and Antiphospholipid Syndrome in Multibacillary Leprosy

FUNDAMENTOS - Anticorpos antifosfolípides (AAF), como antiβ2GP1 (β2-glicoproteína 1), são descritos na hanseníase multibacilar (MB) sem, contudo, caracterizar a síndrome do anticorpo antifosfolípide (SAF), constituída por fenômenos tromboembólicos (FTE). A mutação Val247Leu no V domínio da β2GP1 - substituição da leucina por valina - expõe epítopos crípticos com consequente formação de anticorpos antiβ2GP1. OBJETIVO: Avaliar a associação do polimorfismo Val247Leu do gene β2GP1 com títulos de anticorpos antiβ2GP1 na hanseníase. MÉTODO: O polimorfismo Val247Leu foi detectado por PCR-RFLP, e os títulos de anticorpos antiβ2GP1, por Elisa. RESULTADOS: O genótipo Val/Val estatisticamente predominou no grupo de hansênicos, em relação ao controle. Embora maiores títulos de anticorpos antiβ2GP1 IgM estivessem alocados no grupo MB com genótipos Val/Val e Val/Leu, não houve diferença estatística em relação ao genótipo Leu/Leu. Dos sete pacientes MB com FTE, quatro apresentaram heterozigose, e três Val/Val homozigose. CONCLUSÃO: A prevalência do genótipo Val/Val no grupo de hansênicos pode justificar parcialmente a presença de anticorpos antiβ2GP1 na forma MB. A heterozigose ou homozigose Val/Val nos sete pacientes com hanseníase MB e FTE corroboram a implicação de expressão fenotípica anômala da β2GPl e formação de anticorpos antiβ2GPl, com consequente FTE e SAF.BACKGROUND - Multibacillary (MB) leprosy may be manifested with antiphospholipid antibodies (aPL), among which anti-β2GP1 (β2-glycoprotein 1). High titers of aPL are associated with APS (Antiphospholipid Syndrome), characterized by thrombosis. The mutation Val247Leu in the domain V of β2GP1 exposes hidden epitopes with consequent development of anti-β2GP1 antibodies. OBJECTIVE: To evaluate the Val247Leu polymorphism of β2GP1 gene and its correlation with anti-β2GP1 antibodies in leprosy patients. METHODS: The Val247Leu polymorphism was performed by PCR-RFLP and anti-β2GP1 antibodies were measured by ELISA. RESULTS: The genotypic Val/Val was more prevalent in the leprosy group, compared to controls. Regarding the 7 MB patients with APS, four presented heterozygosis and three, Val/Val homozygosis. Although higher titrations of anti-β2GP1 IgM antibodies were seen in MB leprosy group with Val/Leu and Val/Val genotypes, there was no statistical difference when compared to Leu/Leu genotype. CONCLUSION: The prevalence of Val/Val homozygosis in leprosy group can partially justify the presence of anti-β2GP1 IgM antibodies in MB leprosy. The description of heterozygosis and Val/Val homozygosis in 7 patients with MB leprosy and thrombosis corroborates the implication of anomalous phenotype expression of β2GP1 and development of anti-β2GP1 antibodies, with consequent thrombosis and APS.CNPqAssociação Paulista contra a HanseníaseUSP - Faepa-HC-FMR

Maxadilan (MAX) - Proteína salivar de Lutzomyia longipalpis: detecção de anticorpos antiMAX em leishmaniose tegumentar americana (LTA) e expressão gênica e protéica de MAX em Lutzomyia neivai

FUNDAMENTOS: AA proteína MAX, componente salivar de Lutzomyia longipalpis, vetor do calazar ou leishmaniose sistêmica, tem sido empregada como vacina para leishmaniose tegumentar experimental, com funções de vasodilatação e imunomodulação. OBJETIVOS: Detectar anticorpos séricos antiMAX em pacientes com LTA e verificar a expressão de MAX em L. neivai, vetor da LTA na região em estudo. MÉTODOS: Anticorpos antiMAX foram detectados por Elisa em soro de 42 pacientes com LTA e 63 controles. A extração de proteínas e de DNA de L. longipalpis (controle positivo) e de L. neivai foi realizada pelo método Trizol e seguida pela detecção de proteínas por eletroforese e pela expressão gênica de MAX por PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism) com as enzimas Hha I e Rsa I. RESULTADOS: Títulos maiores de anticorpos antiMAX foram observados na LTA (p=0,0132). A eletroforese de proteínas mostrou frações semelhantes para L. longipalpis e L. neivai, tendo-se observado para ambos fração protéica de peso molecular similar à proteína MAX. A expressão gênica de MAX em L. longipalpis e L. neivai foi confirmada por PCR-RFLP. CONCLUSÕES: A presença de antiMAX nos grupos em estudo tornou imprescindível a pesquisa de MAX no vetor de LTA da região, tendo sido registrada pela primeira vez expressão protéica e gênica de MAX em L. neivai. Detecção de antiMAX em controles confirma exposição a picadas de flebótomos. Títulos de anticorpos antiMAX maiores na LTA sugerem exposição prévia e natural à picada e, conseqüentemente, à proteína MAX, não protegendo da doença e desfavorecendo seu emprego em vacinação

Val247Leu polymorphism of beta(2) glycoprotein 1 gene may justify the genesis of anti beta(2)GP1 antibodies and Antiphospholipid Syndrome in Multibacillary Leprosy

BACKGROUND - Multibacillary (MB) leprosy may be manifested with antiphospholipid antibodies (aPL), among which anti-beta(2)GP1 (beta(2)-glycoprotein 1). High titers of aPL are associated with APS (Antiphospholipid Syndrome), characterized by thrombosis. The mutation Val247Leu in the domain V of beta(2)GP1 exposes hidden epitopes with consequent development of anti-beta(2)GP1 antibodies. OBJECTIVE: To evaluate the Val247Leu polymorphism of beta(2)GP1 gene and its correlation with anti-beta(2)GP1 antibodies in leprosy patients. METHODS: The Val247Leu polymorphism was performed by PCR-RFLP and anti-beta(2)GP1 antibodies were measured by ELISA. RESULTS: The genotypic Val/Val was more prevalent in the leprosy group, compared to controls. Regarding the 7 MB patients with APS, four presented heterozygosis and three, Val/Val homozygosis. Although higher titrations of anti-beta(2)GP1 IgM antibodies were seen in MB leprosy group with Val/Leu and Val/Val genotypes, there was no statistical difference when compared to Leu/Leu genotype. CONCLUSION: The prevalence of Val/Val homozygosis in leprosy group can partially justify the presence of anti-beta(2)GP1 IgM antibodies in MB leprosy. The description of heterozygosis and Val/Val homozygosis in 7 patients with MB leprosy and thrombosis corroborates the implication of anomalous phenotype expression of beta(2)GP1 and development of anti-beta(2)GP1 antibodies, with consequent thrombosis and APS.CNPq[400.930/05-6]APH (Associacao Paulista contra a Hanseniase)[092/2005]Faepa-HC-FMRP-USP (Fundacao de Auxilio ao Ensino, Pesquisa e Assistencia