TOXIC EFFECTS OF THE CONTENTS OF TWO CYST SIZES OF SARCOCYSTYS AUCHENIAE IN EXPERIMENTALLY INOCULATED RABBITS

El objetivo del estudio fue determinar los efectos tóxicos de dos tamaños de macroquistes de Sarcocystis aucheniae (>5 mm y 1-3 mm) en conejos inoculados experimentalmente, a través del tiempo de supervivencia, manifestaciones clínicas y alteraciones anatomopatológicas. Se colectaron macroquistes del cuello de alpacas procedentes del camal de Huancavelica. Las concentraciones de proteínas antigénicas para los macroquistes grandes y pequeños, medidas por el método de Biuret, fueron de 3.3 y 2.4 mg/mL, respectivamente. Se utilizaron 52 conejos, de los cuales 25 fueron inoculados con extractos de macroquistes grandes, 25 con extractos de macroquistes pequeños y 2 quedaron como controles. Cada grupo tratado estuvo compuesto por cinco subgrupos de conejos, a quienes se aplicó dosis de 2.5, 5, 10, 15 y 25 μg de proteína por kilogramo de peso vivo, vía IM. La evaluación del tiempo de supervivencia se hizo hasta las 72 h posinoculación. El tiempo promedio de mortalidad ocurrió a las 7 h post-inoculación y la dosis de mayor letalidad fue de 15 ?g/kg. Las manifestaciones clínicas más frecuentes fueron hipertermia, taquipnea, diarrea, inapetencia, incoordinación y postración. La principal lesión en la necropsia fue congestión de vasos sanguíneos en cerebro y otros órganos, así como presencia de líquido en las cavidades abdominal, torácica y pericárdica. Además, se observó daño degenerativo en cerebro, hígado y riñón, y edema cerebral. No se observaron alteraciones en músculo esquelético. La severidad de las lesiones estuvo relacionada al tamaño de quiste, siendo más severas con los quistes pequeños. Se encontró diferencia estadística (p<0.05) en el tiempo de supervivencia de los conejos por efecto de la dosis y tamaño de los macroquistes, observándose el 96% de supervivencia para los animales inoculados con macroquistes grandes y el 68% para los pequeños.The aim of this study was to determine the toxic effects of two macrocyst sizes of Sarcocystis aucheniae (>5 mm and 1-3 mm) in experimentally inoculated rabbits through survival time, clinical signs, and pathological changes. Macrocysts from alpaca necks were collected in the slaughterhouse of Huancavelica, Peru. Antigenic proteins concentrations from large and small macrocysts, measured by the Biuret method were 3.3 and 2.4 mg/mL, respectively. Twenty five rabbits were inoculated with extracts from large macrocysts, 25 with extracts from small macrocysts and 2 animals were used as controls. Each treatment group was formed by 5 subgroups of 5 rabbits each, which received, via IM, doses of 2.5, 5, 10, 15, and 25 ?g of protein per kg of body weight. Survival time was evaluated until 72 hours post inoculation. The average interval to death was 7 h and the more severe lethal dose was 15 ?g/kg. The most frequent clinical signs were hyperthermia, tachypnea, diarrhea, inappetence, incoordination, and recumbency. The principal lesion at necropsy was congestion of blood vessels in brain and other organs, and fluid in the abdominal, thoracic, and pericardial cavities. Also, degenerative lesions in brain, liver and kidney as well as brain oedema were found. Changes in skeletal muscle were not observed. The severity of injuries was related to size cyst, being worse with small cysts. Statistical difference (p<0.05) in survival time due to the effect of dose and size of macrocyst was found. There were 96% survival for animals inoculated with large macrocysts and 68% for those inoculated with small macrocysts

Immune response in rabbits to two sizes of cysts of sarcocystis aucheniae

El objetivo del estudio fue evaluar la respuesta inmune de macroquistes pequeños y grandes de Sarcocystis aucheniae utilizando tres protocolos de inoculación. Para la obtención del antígeno se recolectaron cuellos de alpaca con quistes de S. aucheniae del camal de Huancavelica, Perú. Los quistes colectados fueron clasificados según el tamaño, en macroquistes grandes (>5 mm) y pequeños (1-3 mm), obteniéndose una concentración de proteína antigénica de 3.23 y 2.45 mg/ml, respectivamente. Treinta conejos fueron inmunizados con 0.05 mg/kg de proteína antigénica derivada de cada tamaño de macroquiste. Además, se consideró tres protocolos de inoculación (n = 5 conejos). El protocolo I y II con uno y dos meses de duración, respectivamente, donde las proteínas antigénicas fueron inactivadas con formol, y el protocolo III de 2 meses, con proteína antigénica inactivada con calor. La respuesta inmune específica Ag-Ac fue detectada con la prueba de inmunodifusión doble de agar gel en el 100% con los protocolos I y II, y 60% con el protocolo III en el caso de macroquistes grandes; así como en 100, 60 y 40% de los conejos con los protocolos I, II y III para macroquistes pequeños, respectivamente. En conclusión, respuestas inmunes del 86.6 y 66.6% fueron evidenciadas utilizando proteínas antígénicas provenientes de macroquistes grandes y pequeños, respectivamente, al utilizar los tres protocolos de inmunización, aunque en el análisis de Fisher no se observó asociación entre protocolos y reacción Ag-Ac.The aim of this study was to evaluate the immune response of small and large macrocysts of Sarcocystis auchenie using three protocols of inoculation. Alpaca meat samples with S. aucheniae were obtained from the slaughterhouse of Huancavelica, Peru. Cysts were collected and classified by size in large (>5 mm) and small (1-3 mm), obtaining 3.23 and 2.45 mg/ml respectively of antigenic protein by the Biuret method. Fifteen rabbits were immunized with 0.05 mg/kg of antigenic protein derived from large and small macrocysts. Besides, three protocols of inoculation were considered (n = 5 rabitts). Protocol I and II were of 1 and 3 month length where proteins were inactivated with formalin, and protocol III of 2 months length using heat-inactivated antigen protein. Specific immune response Ag-Ab was detected by double immunodiffusion in agar gel in 100% of rabbits using protocols I and II and 60% with protocol III in large macrocysts while 100, 60 and 40% response in protocols I, II and III in small macrocysts respectively. In conclusion, immune responses of 86.6 and 66.6% were obtained when using antigenic proteins from large and small cysts, respectively; however, no association was observed between protocols and Ag-Ab reaction when using Fisher’s analysis

Concentraciones de inmunoglobulina G sérica en alpacas neonatas muertas por enterotoxemia

The objective of the present study was to determine the levels of serum immunoglobulin G (IgG) in neonatal alpacas (5-23 days of age) killed by enterotoxemia and in animals of similar ages, but clinically healthy. In a first phase, a standard curve of physiological degradation of serum IgG was established from blood sera of six apparently healthy neonates from day 2 to 21 days of age (n=9). In a second phase, serum IgG concentrations were determined in 17 dead neonatal alpacas with lesions compatible with enterotoxemia and in 26 animals of similar ages, apparently healthy. The concentrations of IgG, determined by the Radial Immunodiffusion test, showed that all the animals at 48 hours of birth had adequate concentrations of IgG, while only three of the animals killed by enterotoxemia had IgG levels below the obtained standard curve, although only one of them with levels below 900 mg/dl at 14 days, which could be considered as a partial passive transfer failure. The serum IgG concentrations of the 26 clinically normal animals (2893 mg/dl) and those obtained from animals killed by enterotoxemia (2361 mg/dl) were statistically similar. The risk analysis using the Odds Ratio test (OR: 5.35, CI = 0.50-57.22) indicated that there is no association between adequate levels of IgG and mortality from enterotoxemia in neonatal alpacas.El presente estudio tuvo como objetivo determinar los niveles de Inmunoglobulina G (IgG) sérica en alpacas neonatas (5-23 días de edad) muertas por enterotoxemia y en animales de edades similares, pero clínicamente sanos. En una primera fase se estableció una curva estándar de degradación fisiológica de la IgG sérica a partir de sueros sanguíneos de seis neonatos aparentemente sanos a partir del día 2 y hasta los 21 días de edad (n=9). En una segunda fase se determinaron las concentraciones de IgG sérica en 17 alpacas neonatas muertas con lesiones compatibles con enterotoxemia y en 26 animales, de edades similares, aparentemente sanos. Las concentraciones de IgG, determinadas por la prueba de Inmunodifusión Radial, evidenciaron que todas las crías a las 48 horas del nacimiento presentaron concentraciones adecuadas de IgG, mientras que solo tres de los animales muertos por enterotoxemia tenían niveles de IgG por debajo de la curva estándar de degradación, aunque solo una de ellas con niveles inferiores a 900 mg/dl a los 14 días, lo que podría ser considerado como falla parcial de transferencia pasiva. Las concentraciones de IgG sérica de los 26 animales clínicamente normales (2893 mg/dl) y aquellas obtenidas de animales muertos por enterotoxemia (2361 mg/dl) fueron estadísticamente similares. El análisis de riesgo mediante la prueba de Odds Ratio (OR: 5.35; IC= 0.50-57.22) indicó que no existe asociación entre niveles adecuados de IgG y la mortalidad por enterotoxemia en alpacas neonatas

Concentraciones de inmunoglobulina G sérica en alpacas neonatas muertas por enterotoxemia

The objective of the present study was to determine the levels of serum immunoglobulin G (IgG) in neonatal alpacas (5-23 days of age) killed by enterotoxemia and in animals of similar ages, but clinically healthy. In a first phase, a standard curve of physiological degradation of serum IgG was established from blood sera of six apparently healthy neonates from day 2 to 21 days of age (n=9). In a second phase, serum IgG concentrations were determined in 17 dead neonatal alpacas with lesions compatible with enterotoxemia and in 26 animals of similar ages, apparently healthy. The concentrations of IgG, determined by the Radial Immunodiffusion test, showed that all the animals at 48 hours of birth had adequate concentrations of IgG, while only three of the animals killed by enterotoxemia had IgG levels below the obtained standard curve, although only one of them with levels below 900 mg/dl at 14 days, which could be considered as a partial passive transfer failure. The serum IgG concentrations of the 26 clinically normal animals (2893 mg/dl) and those obtained from animals killed by enterotoxemia (2361 mg/dl) were statistically similar. The risk analysis using the Odds Ratio test (OR: 5.35, CI = 0.50-57.22) indicated that there is no association between adequate levels of IgG and mortality from enterotoxemia in neonatal alpacas.El presente estudio tuvo como objetivo determinar los niveles de Inmunoglobulina G (IgG) sérica en alpacas neonatas (5-23 días de edad) muertas por enterotoxemia y en animales de edades similares, pero clínicamente sanos. En una primera fase se estableció una curva estándar de degradación fisiológica de la IgG sérica a partir de sueros sanguíneos de seis neonatos aparentemente sanos a partir del día 2 y hasta los 21 días de edad (n=9). En una segunda fase se determinaron las concentraciones de IgG sérica en 17 alpacas neonatas muertas con lesiones compatibles con enterotoxemia y en 26 animales, de edades similares, aparentemente sanos. Las concentraciones de IgG, determinadas por la prueba de Inmunodifusión Radial, evidenciaron que todas las crías a las 48 horas del nacimiento presentaron concentraciones adecuadas de IgG, mientras que solo tres de los animales muertos por enterotoxemia tenían niveles de IgG por debajo de la curva estándar de degradación, aunque solo una de ellas con niveles inferiores a 900 mg/dl a los 14 días, lo que podría ser considerado como falla parcial de transferencia pasiva. Las concentraciones de IgG sérica de los 26 animales clínicamente normales (2893 mg/dl) y aquellas obtenidas de animales muertos por enterotoxemia (2361 mg/dl) fueron estadísticamente similares. El análisis de riesgo mediante la prueba de Odds Ratio (OR: 5.35; IC= 0.50-57.22) indicó que no existe asociación entre niveles adecuados de IgG y la mortalidad por enterotoxemia en alpacas neonatas