PURIFICATION OF EXOINULINASE BIFIDOBACTERIUM BREVE (PEMURNTAN EKSOINULINASE DARI BIFIDOBACTERIUM BREVE)

ABSTRACT Extracellular exoinulinase was produced from Bifidobacterium breve in media with inulin as the only C-source. The enzyme was purified on DEAE-Sephadex A-50, preparative IEF and gel filtration yielded a purification of 68-fold. The pI range was from 4.2 to 4.9, the molecular weight was identified using polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and the result was 6459 and 32 kD. It did not hydrolyse inulin into smaller fructan units or sucrose, therefore it was characterized as an exo-type enzyme. Key words: Bifidobacterium, exoinulinase, inulin ABSTRAK Eksoinulinase ekstraseluler dihasilkan dari Bifidobacterium breve dalam media inulin sebagai satu¬satunya sumber karbonnya. Enzim dimurnikan menggunakan DEAE Sephadex A-50, IEF Preparative, filtrasi gel, dan diperoleh kemurnian 68 kali. Harga pI yang diperoleh berkisar dari 4,2 sampai 4,9 dengan massa molekul berturut-turut: 64, 59 dan 32 kD yang diuji dengan poliacrilamide gel elektroforesis (SDS-PAGE). Enzim tidak dapat menghidrolisis inulin kedalam unit-unit fruktan atau sukrosa, sehingga diperoleh suatu kesimpulan bahwa ensim tersebut dikarakterisasikan sebagai tipe eksoensim. Kata Kunci: Bifidobacterium, eksoinulinase, inuli