4 research outputs found
Dysfunction of thyroid hormone synthesis and thyroid hormone transport
GesamtdissertationSchilddrüsenhormone sind entscheidend an Wachstums- und Entwicklungsprozessen
beteiligt, unter anderem auch an der Entwicklung des zentralen Nervensystems.
Störungen in der Synthese- oder Verfügbarkeit von Schilddrüsenhormonen führen
zu Erkrankungen, wie der angeborenen Hypothyreose. Im Rahmen dieser Arbeit
wurden sowohl genetische (Mutationen im Schilddrüsenperoxidase-Gen, Mutationen
im Monocarboxylat-Transporter 8-Gen) als auch exogene Faktoren (endokrine
Disruptoren) untersucht, die zu Störungen der Schilddrüsenhormonsynthese bzw.
zu Störungen in der Verfügbarkeit der Schilddrüsen¬hormone führen. Bei 39
Patienten mit angeborener Hypothyreose und vorhandener Schilddrüse konnte eine
Mutation im Gen für die Schilddrüsenperoxidase (TPO) mittels Einzelstrang-
Konformations-Polymorphismus (SSCP), denaturierender Hochdruck Flüssigkeits-
Chromatographie (dHPLC) und Sequenzierung identifiziert werden. Zwei dieser
Patienten hatten eine Mutation in Exon 14 des TPO-Gens und entwickelten
Neoplasien. Ein weiterer Defekt, der die Verfügbarkeit von Schilddrüsenhormon
beeinträchtigt, konnte auf eine Mutation im schilddrüsenhormon-spezifischen
Transporter MCT8 zurückgeführt werden. Der betroffene Patient mit der Mutation
A150V zeigte ein gänzlich neues Krankheitsbild bei X-chromosomaler mentaler
Retardierung: Seine biochemischen Schilddrüsenhormonwerte deuten weder auf
eine angeborene Hypothyreose noch auf eine Schilddrüsenhormon¬resistenz hin.
Vielmehr konnte mit In-vitro-T3-Aufnahmestudien und Immunfluoreszenz-Studien
gezeigt werden, dass der veränderte MCT8(A150V) Transporter nicht in der Lage
ist, T3 zu transportieren. Zusätzlich zu genetischen Defekten der TPO und des
MCT8 wurde der Einfluß von exogenen Faktoren untersucht. Dabei konnte der
Einfluß von endokrinen Disruptoren auf die Funktionsfähigkeit der TPO mit
Hilfe von In-vitro-Assays mittels stabil rekombinanter humaner TPO
exprimierenden Zelllinien, nachgewiesen werden.Thyroid hormones are essential in processes of growth and development
especially in the development of the central nervous system. Malfunction in
thyroid hormone synthesis or decrease in the availability of thyroid hormones
can lead to diseases as for example congenital hypothyroidism. In this thesis
genetic variations (mutations in the thyroid peroxidase gene, mutations in the
monocarboxylate transporter 8 gene) as well as exogenic factors (endocrine
disrupters) were examined, leading to dysfunction in thyroid hormone synthesis
as well as malfunction in the availability of thyroid hormones. In a total of
39 patients with congenital hypothyroidism and an orthotopic thyroid gland
mutations in the thyroid peroxidase (TPO) gene could be identified by single
strand conformational polymorphism, denaturing high pressure liquid
chromatography and sequencing. Two of these patients have a mutation in exon
14 of the TPO gene and showed an additional phenotype in developing neoplasia.
Another defect affecting the availability of thyroid hormones especially in
early brain development could be referred to a mutation in the thyroid hormone
specific monocarboxylate transporter 8 (MCT8). MCT8 was recently identified to
transport triiodthyronine (T3) into cells. The index patient is a hemizygous
carrier of the mutation A150V leading to a new syndrome of X-linked mental
retardation with striking biochemical thyroid hormone levels corresponding
neither to congenital hypothyroidism nor to thyroid hormone resistance.
Functional characterization by in-vitro T3 uptake-assays and subcellular
localisation studies showed that the mutated MCT8 (A150V) transporter was no
longer able to transport T3 into the cells. In addition to genetic defects in
the TPO and MCT8 gene influences of exogenous factors on thyroid hormone
availability were observed. The influence of endocrine disrupting agents on
the function of the TPO were identified using in vitro assays with cells
stably expressing recombinant human TPO
Partial deficiency of the C-terminal-domain phosphatase of RNA polymerase II is associated with congenital cataracts facial dysmorphism neuropathy syndrome
Congenital cataracts facial dysmorphism neuropathy (CCFDN) syndrome ( OMIM 604168) is an autosomal recessive developmental disorder that occurs in an endogamous group of Vlax Roma (Gypsies; refs. 1-3). We previously localized the gene associated with CCFDN to 18qter, where a conserved haplotype suggested a single founder mutation(4). In this study, we used recombination mapping to refine the gene position to a 155-kb critical interval. During haplotype analysis, we found that the non-transmitted chromosomes of some unaffected parents carried the conserved haplotype associated with the disease. Assuming such parents to be completely homozygous across the critical interval except with respect to the disease-causing mutation, we developed a new not quite identical by descent (NQIBD) approach, which allowed us to identify the mutation causing the disease by sequencing DNA from a single unaffected homozygous parent. We show that CCFDN is caused by a single-nucleotide substitution in an antisense Alu element in intron 6 of CTDP1 ( encoding the protein phosphatase FCP1, an essential component of the eukaryotic transcription machinery(5,6)), resulting in a rare mechanism of aberrant splicing and an Alu insertion in the processed mRNA. CCFDN thus joins the group of transcription syndromes(7) and is the first purely transcriptional defect identified that affects polymerase II mediated gene expressio