Influence of chosen microbes and some chemical substances on the production of aflatoxins

Aflatoxins are produced as secondary metabolites by A. flavus, A. parasiticus, A. nomius and A. tamarii. The aflatoxin biosynthetic pathway involves several enzymatic steps and genes (apa-2, ver-1) that appear to be regulated by the aflR gene in these fungi. The aim of this work was the detection of aflatoxins by the HPLC method and the ascertainment of factors influencing their production. A. parasiticus CCM F-108, A. parasiticus CCF 141, A. parasiticus CCF 3137 and two isolates A. flavus were used. These toxigenic isolates were recovered from spice (strain 1) and wraps (strain 2). The gene for the production of aflatoxin B1 for each species of fungi was detected using an optimized PCR method. Rhodotorula spp.*, Lactococcus lactis subsp. lactis CCM 1881, Flavobacterium spp. and fungal strain Pythium oligandrum* were tested for inhibition of aflatoxins production and fungal growth. Having used the HPLC detection, various preservatives (propionic acid, citric acid, potassium sorbate) were tested from the viewpoint of their influence on the growth of aflatoxigenic fungi followed by the production of aflatoxins. The growth of A. flavus and A. parasiticus and aflatoxin production in Potato Dextrose Agar supplemented with propionic acid (1000-2000-3000 mg/kg), citric acid (2000-3000-4000 mg/kg) and potassium sorbate (500-800-1000 mg/kg) was tested by Agar Dilution Method. After 72 h of incubation was evaluated growth of fungi, all samples were frozen for later extraction and aflatoxins quantification by HPLC. Effect of peptone and sucrose additions were studied in yeast extract (2%) supplemented with peptone (5-10-15%) or sucrose (15%). Growth inhibition of Aspergillus by Pythium oligandrum was tested on wood surface. As shown, the highest inhibition effect on the aflatoxins production was obtained when propionic acid was applied in concentrations since 1000 mg/kg. A total inhibition of the fungi growth and aflatoxins production was observed in all samples containing peptone in the concentration range tested. Significant limitation of the growth and production of aflatoxins was also observed in the presence of other microorganisms such like Pythium oligandrum and Rhodotorula spp

Non-Specific Reactions during Immunomagnetic Separation of Listeria

Problems occurring during the immunomagnetic separation (IMS) of Listeria using immunomagnetic particles Dynabeads® anti-Listeria (Dynal Biotech, Norway) were specified. Characteristics of these particles were compared with anti-Listeria spp. magnetite particles (Quantum Magnetics, USA). Pure cultures of Listeria innocua, Arthrobacter spp., Bacillus subtilis, Citrobacter braakii, Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloacae and Staphylococcus aureus were used to evaluate non-specific reactions during IMS. Gram-positive microorganisms, especially Staphylococcus aureus and Arthrobacter spp., were found to be responsible for non-specific reactions in most cases. The capacity of Dynabeads® anti-Listeria particles was determined to be about 10 % of the initial pure cultures of Listeria spp., after 10 min of incubation. Non-specific reactions during IMS of Listeria were examined on the artificially inoculated food samples in which Gram-positive bacteria showed the highest percentage of capture. Influence of washing in two buffers was also studied

Determination of ascorbic acid in foodstuffs

Práce je věnována stanovení kyseliny askorbové v ovocných džusech metodou diferenční pulzní voltametrie s využitím uhlíkových pastových elektrod.Dokončená práce s úspěšnou obhajobo

Citlivost izolátů arkobakterů z různých zdrojů k 18 antibiotikům a multirezistence v rámci České republiky

Objectives: Arcobacter spp. are considered to be potential foodborne pathogens, and consumption of contaminated food containing these bacteria could endanger human and animal health. Arcobacter butzleri and Arcobacter cryaerophilus are the species most frequently isolated from food of animal origin and from other samples. The aim of this study was to evaluate the susceptibility of arcobacters isolated in the Czech Republic. No information about antibiotic susceptibility and multidrug resistance of arcobacters isolated in the Czech Republic is available in the literature before now. Methods: The antimicrobial resistance of A. butzleri (n = 80) and A. cryaerophilus (n = 20) isolated from meat of animal origin, water sources and clinical samples was examined by the disk diffusion method. Results: Arcobacters were resistant to one or more antimicrobial agents in 99% (99/ 100) of tested isolates. Most of the Arcobacter isolates were resistant to beta-lactam antibiotics, i.e. ampicillin (81.0%), amoxicillin/clavulanic acid (28.0%), cefalotin (73.0%) and aztreonam (93.0%). Arcobacters were also frequently resistant to lincosamides, i.e. clindamycin (98.0%). Of the aminoglycosides, amikacin, gentamicin and tobramycin were evaluated to be the most effective antibiotics among those tested against arcobacters. Conclusions: These results demonstrate substantial resistance in Arcobacter isolates to 18 antimicrobial agents commonly used in medical and veterinary medicine. Multidrug resistance was found in 93.8% (75/80) of A. butzleri isolates and 70.0% (14/ 20) of A. cryaerophilus isolates.Arcobacter spp. je považován za potenciální potravinový patogen. Arcobacter butzleri a Arcobacter cryaerophilus jsou nejčastěji izolované druhy z potravin živočišného původu. Cílem této studie bylo zhodnotit citlivost arkobakterů izolovaných v rámci ČR. V literatuře nejsou k dispozici zatím žádné informace o citlivosti na antibiotika a multirezistenci arkobakterů izolovaných v České republice. Antimikrobiální rezistence byla zkoumána metodou diskové difuze u kmenů A. butzleri (n = 80) a A. cryaerophilus (n = 20) izolovaných z masa živočišného původu, zdrojů vody a klinických vzorků. Arkobaktery byly rezistentní na jedno nebo více antimikrobiálních látek u 99% (99/100) testovaných izolátů. Většina izolátů Arcobacter byla rezistentní vůči beta-laktamovým antibiotikům, tj. ampicilinu (81,0%), amoxicilinu / kyseliny klavulanové (28,0%), cefalotinu (73,0%) a aztreonamu (93,0%). Arkobaktery byly také často rezistentní vůči linkosamidům, tj. klindamycinu (98,0%). Z aminoglykosidů byly amikacin, gentamicin a tobramycin vyhodnoceny jako nejúčinější antibiotika Tyto výsledky prokazují značnou rezistenci u izolátů Arcobacter k 18 antimikrobiálním látkám běžně používaným v medicínské a veterinární medicíně. Multirezistence byla zjištěna u 93,8% (75/80) izolátů A. butzleri a 70,0% (14/20) izolátů A. cryaerophilus

"One World, One Health” – Coronaviruses

Vědci dlouhodobě varovali před akcelerací nových infekčních nemocí, které mohou způsobit velké problémy v důsledku navyšujících se faktorů podmiňujících vznik pandemického šíření infekčních nemocí. Je to právě očkování, které slouží k ochraně před infekčními nemocemi, stejně jako k přerušení šíření příslušné infekce. Na individuální úrovni dochází k tvorbě specifické imunitní odpovědi, na úrovni populace k vytvoření kolektivní imunity. V tuto chvíli máme k dispozici vakcíny proti více než 25 různým onemocněním, konstruované minimálně na šesti různých principech. Vzhledem k dopadům pandemického šíření nového koronaviru SARS-CoV-2 se jedním ze zásadních cílů boje proti tomuto respiračnímu infekčnímu onemocnění stal vývoj očkovací látky. Druhotným důsledkem pandemie je odkládání neurgentních lékařských výkonů včetně očkování. Doporučení nicméně hovoří jasně, benefit očkování převyšuje rizika a je doporučováno očkování neodkládat.Researchers have warned against the acceleration of new infectious diseases, which can cause major problems due to increasing factors that determine the emergence of pandemic spread of infectious diseases.Vaccination protect against an infectious disease, as well as to stop the spread of the infection. At the individual level, a specific immune response is created, at the population level, herd immunity is created. Recently, vaccines are available for more than 25 different diseases, constructed on at least six different principles. Due to the effects of the pandemic spread of the new coronavirus SARS-CoV-2, the development of a vaccine has become one of the key objectives in the fight against this respiratory infectious disease. A secondary consequence of the pandemic is the postponement of non-urgent medical procedures, including vaccinations. However, the recommendations are clear, the benefits of vaccination outweigh the risks and it is recommended not to delay vaccination

Capture the bacteria of the genus Aeromonas in alternative sources of drinking water

Cílem práce bylo stanovit mikrobiologickou kvalitu ve 33 vzorcích studničních vod a 21 vzorcích vod ze studánek a pramenů. mikrobiologická analýza byla provedena podle parametrů vyhlášky 252/2004 Sb. K záchytu bakterií rodu aeromonas byla využita tři selektivně diagnostická média. nejlepší výsledky byly získány na M-aeromonas selektivním agaru. Aeromonády byly zjištěny v 18 vzorcích studničních vod a v 15 vzorcích vod ze studánek. Ke zjištění počtu indikátorových mikroorganismů ve vodách byly rovněž využity alternativní metody Colilert-/Quanti-Tray a Enterolert-E/Quanti-Tray.The aim of this work was determination the microbial quality of water in 33 samples of well water and 21 samples of natural spring water. Microbiological analysis was driven according to Decree 252/2004 Coll. Three selective media in connecting with membrane filters technique were used to determine the bacterial genus Aeromonas. The best detection rate was found in M-Aeromonas Selective Agar. Bacteria of the genus Aeromonas were repeatedly determined in 18 samples of water from the domestic well water and 15 samples of water from natural springs. In addition, for determination of indicator microorganisms in water samples were used alternative methods Colilert-/Quanti-Tray and Enterolert-E/Quanti-Tray

Occurence of the genus arcobacter at pet cets and dogs

Tato práce se zabývá zhodnocením výskytu Arcobacter spp. u koček a psů v České republice. Tato zvířata mohou být přenašeči sledovaných bakterií a zároveň potenciálními zdroji lidské infekce. Zvířatům byly pomocí stěrových tamponů a kartáčků odebrány bukální stěry. Na základě předchozích studií byly pro izolaci DNA použity komerčně dostupné DNA kity. Vzorky byly analyzovány pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR) a vyhodnocovány gelovou elektroforézou. Celkem bylo testováno 178 vzorků, z čehož 108 vzorků pocházelo od psů a 70 vzorků od koček. Ze všech stěrů bylo 5 pozitivních. Ve čtyřech případech vzorek pocházel od psa, v jednom od kočky. Pomocí PCR byla ve všech pěti případech potvrzena přítomnost Arcobacter butzleri. Při opakovaném odběru vzorků byla přítomnost arkobakterů prokázána u jednoho vzorku pocházejícího od psa.This thesis evaluates of the occurrence of the genus Arcobacter in cats and dogs in the Czech Republic. These animals may be carriers of this bacteria and potential sources of human infection. Were collected buccal swabs of animals with tampons and brushes. Based on previous studies, for DNA isolation were used commercially available DNA kits. Samples were analyzed using polymerase chain reaction and evaluated by gel electrophoresis. Were tested 178 bucal swabs, of which 108 samples were from dogs and 70 samples were from cats. Of all the bucal swabs were positive 5. Four samples have been from a dog, one of the cat. In all five positive cases was confirmed the presence of Arcobacter butzleri with using PCR. With repeated sampling, the presence of Arcobacter butzleri was demonstrated in one sample from a dog

Water-borne self-crosslinking polymeric dispersion with biocidal action Water-borne self-crosslinking polymeric dispersion with biocidal action Water-borne self-crosslinking polymeric dispersion with biocidal action

Hlavní náplní práce byl vývoj a studium ekologických jednosložkových vodou ředitelných polymerních disperzí využívajících keto-hydrazidové post-síťování a obsahujících nanočástice oxidu zinečnatého. Inkorporace nanočástic ZnO probíhala ve fázi syntézy polymerní disperze prováděné pomocí techniky semi-kontinuální emulzní polymerace. Jako hlavní monomery pro syntézu polymerních disperzí byly použity methylmethakrylát, butylakrylát a 2,2,2-trifluorethylmethakrylát. Byly hodnoceny a porovnávány biocidní a lakařsko-technologické vlastnosti samosíťujícíh polymerních disperzí. Bylo zjištěno, že inkorporací nanočástic ZnO při syntéze lze připravit stabilní samosíťující polymerní disperze vykazující antimikrobiální efekt i při výrazně nízké koncentraci biocidní látky. Všechny připravené disperze vykazovaly dlouhodobou stabilitu a skladovatelnost, rychlé zasychání, chemickou odolnost, pružnost a transparentnost nátěrů. Nátěry obsahující 1,5 hm. % nanočástic ZnO vykazovaly nejlepší biocidní účinek vůči testovaným bakteriím (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa a Escherichia coli). Tyto polymerní disperze mohou nalézt průmyslové využití jako vodou ředitelná pojiva nátěrových hmot nebo transparentní laky s antibakteriálním účinkem, vhodné pro interiérové nátěry různých typů podkladů, zejména ve veřejných prostorách vyžadujících mikrobiologickou nezávadnost, jako jsou nemocnice, léčebny dlouhodobě nemocných, penziony, hotely, školy.The main focus of the thesis was the development and study of ecological single-component water dispersible polymer dispersions using keto-hydrazide post-crosslinking and containing nanoparticles of zinc oxide. The incorporation of ZnO nanoparticles took place at the stage of the synthesis of a polymer dispersion carried out by semi-continuous emulsion polymerization techniques. The main monomers for the synthesis of polymer dispersions were methyl methacrylate, butyl acrylate and 2,2,2-trifluoroethyl methacrylate. The biocidal and lacquer-technological properties of the self-crosslinking polymer dispersions were evaluated and compared. It has been found that incorporation of ZnO nanoparticles in synthesis can produce stable, self-crosslinking polymer dispersions exhibiting antimicrobial effect even at a significantly low concentration of biocidal agent. All prepared dispersions exhibited long-term stability and shelf life, rapid drying, chemical resistance, elasticity and transparency of the coatings. Coatings containing 1.5 wt. ZnO nanoparticles showed the best biocidal effect against the test bacteria (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli). These polymeric dispersions can be found in industrial applications as water-borne coatings or antibacterial transparent varnishes, suitable for interior coatings of various types of substrates, especially in public areas

The Effect of Antibiotics on Planktonic Cells and Biofilm Formation Ability of Collected Arcobacter-like Strains and Strains Isolated within the Czech Republic

The purpose of this study was to test the in vitro effects of ampicillin, ciprofloxacin, clindamycin, erythromycin, gentamicin, and tetracycline on planktonic cells of Arcobacter-like microorganisms and on their biofilm formation ability. The minimum inhibitory concentrations (MICs) were determined by the microdilution method. Further, biofilm formation ability in the presence of various concentrations of antibiotics was evaluated by a modified Christensen method. Most of the 60 strains exhibited high susceptibility to gentamicin (98.3%), ciprofloxacin (95.0%), and erythromycin (100.0%). High level of resistance was observed to clindamycin and tetracycline with MIC50 and MIC90 in range of 4–32 mg/L and 32–128 mg/L, respectively. Combined resistance to both clindamycin and tetracycline was found in 38.3% of tested strains. In general, higher biofilm formation was observed especially at lower concentrations of antibiotics (0.13–2 mg/L). However, a significant decrease in biofilm formation ability of Pseudarcobacter defluvii LMG 25694 was exhibited with ampicillin and clindamycin at concentrations above 32 or 8 mg/L, respectively. Biofilm formation represents a potential danger of infection and also a risk to human health, in particular due to antimicrobial-resistant strains and the ability to form a biofilm structure at a concentration that is approximately the MIC determined for planktonic cells