Actividad lipolítica de microorganismos aislados de aguas residuales contaminadas con grasas

Lipases are one of the groups of enzymes with the highest number of industrial and biotechnological applications, processing of dairy foods and oils, detergents, cosmetics, leather, pharmaceuticals, paper, production of surfactants, biodiesel and recently as a promising alternative for the treatment of wastewater contaminated with lipids. In this study, microorganisms were isolated from wastewater samples containing fats and extracellular lipase production was determined using p-nitrophenylpalmitate. From the 149 isolates obtained, 37 showed lipolytic activity and strain CCEI-1, identified as Serratia marcescens, had the highest activity at alkaline pH and at 30°C. Also degraded lipids and produced pigmentation on solid medium at pH 8,0 and 50°C. The culture supernatants of S. marcescens used to determine thermal stability at 50°C indicate that the enzyme is stable at this temperature and at alkaline pH. The enzyme was partially purified and electrophoresed (SDS-PAGE) where bands between 40 and 116 kDa were detected. The results obtained in this study indicate that the strain CCEI-1 of S. marcescens can be a possible source of thermostable lipases with industrial and biotechnological applications.Las lipasas son uno de los grupos de enzimas con mayor cantidad de aplicaciones industriales y biotecnológicas, en el procesamiento de alimentos lácteos y aceites, detergentes, cosméticos, cuero, productos farmacéuticos, papel, producción de surfactantes, biodiesel y recientemente como una alternativa promisoria para el tratamiento de aguas residuales contaminadas con lípidos. En este estudio se aislaron microorganismos a partir de muestras de aguas residuales con grasas a los que se les determinó la producción de lipasa extracelular utilizando p-nitrofenilpalmitato. De 149 aislados realizados, 37 mostraron actividad lipolítica y la cepa CCEI-1, identificada como Serratia marcescens, tuvo la mayor actividad a pH alcalino y a 30°C. el microorganismo degradó los lípidos y produjo pigmentación en medio de cultivo solido a pH 8,0 y 50°C. Los sobrenadantes de los cultivos de S. marcescens empleados para la determinación de la estabilidad térmica a 50ºC, indicaron que la enzima es estable a ésta temperatura y en pH alcalino. La enzima fue purificada parcialmente y sometida a electroforesis (SDS-PAGE) donde se detectaron bandas entre 40 y 116 kDa. Los resultados obtenidos en este estudio indicaron que la cepa de S. marcescens CCEI-1 puede ser posible fuente de lipasas termoestables con futuras aplicaciones industriales y biotecnológicasLas lipasas son uno de los grupos de enzimas con mayor cantidad de aplicaciones industriales y biotecnológicas, en el procesamiento de alimentos lácteos y aceites, detergentes, cosméticos, cuero, productos farmacéuticos, papel, producción de surfactantes, biodiesel y recientemente como una alternativa promisoria para el tratamiento de aguas residuales contaminadas con lípidos. En este estudio se aislaron microorganismos a partir de muestras de aguas residuales con grasas a los que se les determinó la producción de lipasa extracelular utilizando p-nitrofenilpalmitato. De 149 aislados realizados, 37 mostraron actividad lipolítica y la cepa CCEI-1, identificada como Serratia marcescens, tuvo la mayor actividad a pH alcalino y a 30°C. el microorganismo degradó los lípidos y produjo pigmentación en medio de cultivo solido a pH 8,0 y 50°C. Los sobrenadantes de los cultivos de S. marcescens empleados para la determinación de la estabilidad térmica a 50ºC, indicaron que la enzima es estable a ésta temperatura y en pH alcalino. La enzima fue purificada parcialmente y sometida a electroforesis (SDS-PAGE) donde se detectaron bandas entre 40 y 116 kDa. Los resultados obtenidos en este estudio indicaron que la cepa de S. marcescens CCEI-1 puede ser posible fuente de lipasas termoestables con futuras aplicaciones industriales y biotecnológica

Caracterización de la enzima acil homoserina lactonasa de una cepa de bacilus thuringiensis.

Las señales de N-acil homoserina lactonas, pequeñas moléculas difusibles e inductoras, constituyen parte de los componentes claves del sistema de comunicación bacteriana conocido como quorum sensing, este mecanismo que puede llevar a la expresión de genes de virulencia puede interrumpirse con la participación de una enzima codificada por el gen aiiA de una cepa de Bacillus thuringiensis que inactiva las moléculas de señal mediante la hidrólisis. La caracterización se realizó a partir de la AHL-lactonasa recombinante, la cual mostró actividad biológica en condiciones de pH alcalino y a altas temperaturas, así como también actuó sobre sustratos con cadena acilo de diferentes tamaños. Pero la funcionalidad de la enzima recombinante disminuyó por la acción de iones metálicos más no por el efecto de agentes quelantes. La afinidad de la enzima con todos los sustratos probados y su comportamiento en las condiciones evaluadas permiten inferir que la AHL-lactonasa de la cepa B. thuringiensis147-11516 puede usada como estrategia de interrupción en la comunicación de bacterias patógenas para plantas. / Abstract. The signals of N-acyl homoserine lactones, and inducing small diffusible molecules, are part of the key components of bacterial communication systems known as quorum sensing, this mechanism can lead to expression of virulence genes can be interrupted with the participation of enzyme encoded by the gene aiiA of a strain of Bacillus thuringiensis to inactivate signaling molecules by hydrolysis. The characterization was performed using the recombinant AHL-lactonase, which showed biological activity in alkaline pH conditions and high temperatures, as well as act on substrates with acyl chain of different sizes. But the functionality of the recombinant enzyme decreased by the action of metal ions but not by the effect of chelating agents. The affinity of the enzyme with all substrates tested, and their behavior in the evaluated conditions allow us to infer that the AHL-lactonase of strain B. thuringiensis147-11 516 can be used as a strategy of interruption in the communication of plant pathogenic bacteria.Maestrí