Correlação entre citopenias periféricas e alterações citogenéticas na medula óssea numa população em idade pediátrica: experiência de 20 anos

Introdução: O hemograma é o estudo mais solicitado e uma ferramenta essencial no diagnóstico das diferentes patologias em idade pediátrica, nomeadamente nas doenças hematológicas. As citopenias periféricas são o primeiro achado laboratorial sugestivo de uma doença hematológica, das quais é exemplo o síndrome mielodisplásico, púrpuras trombocitopenicas idiopáticas, entre outras. A confirmação destas patologias deverá passar pelo estudo da medula óssea, com análise desta por diferentes metodologias, entre as quais a análise do cariotipo por citogenética convencional. Objetivo: Neste trabalho pretende-se apresentar e estabelecer uma correlação entre os resultados obtidos por citogenética convencional em amostras de medula óssea e a observação de citopenias periféricas numa população pediátrica, ao longo de 20 anos, Métodos: Foi realizada a análise de uma série retrospetiva de 20 anos (1995-2015) de 144 amostras de medula óssea de uma população pediátrica, que ao diagnóstico inicial apresentavam citopenia/(as) periférica/(as). As amostras foram processadas segundo o protocolo estabelecido para a análise cromossómica na medula óssea, incluindo cultura celular, para cada produto biológico, seguido de estudo citogenético para a identificação do cariotipo. Resultados: Nas 144 amostras analisadas com citopenias periféricas, foram identificados 13 amostras com cariotipo anormal. Das citopenias analisadas 30 eram bicitopenias, 30 pancitopenias, 20 neutropenias, 10 anemias e 54 trombocitopenias das quais 21 eram de origem idiopática. As amostras com cariotipos anormais apresentavam em simultâneo uma pancitopenia ou uma bicitopenia. Conclusão: As citopenias periféricas são extremamente importantes para a suspeita de doenças hematológicas em idade pediátrica, principalmente na síndrome mielodiplásica, A análise da medula óssea por citogenética convencional assume um papel fundamental na confirmação destas patologias, na evolução clínica das mesmas e na escolha da terapêutica adequada. Os autores não têm conflito de interesses.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Genetic modulators of cerebral vasculopathy in children with sickle cell anemia

A drepanocitose é uma doença genética causada pela mutação c.20A>T, em homozigotia, no gene da beta-globina, que leva à síntese de uma hemoglobina anómala – hemoglobina S. Para além da anemia hemolítica crónica, as manifestações clínicas são diversas e, em crianças, a mais grave é a vasculopatia cerebral que inclui os acidentes vasculares cerebrais (AVC) e os enfartes cerebrais silenciosos. Apesar de monogénica, variantes noutros genes poderão atuar como modificadores do seu curso e gravidade clínica. Neste trabalho, estudámos 70 doentes pediátricos, de origem subsaariana, com drepanocitose e bem caracterizados em termos de vasculopatia cerebral. Procedemos à genotipagem de variantes nos genes VCAM1 e NOS3 envolvidos na ativação do endotélio dos vasos sanguíneos e no tónus vascular. A análise estatística revelou uma associação positiva entre a presença da variante rs1409419_T, bem como do haplotipo 7 de VCAM1, e a ocorrência de AVC. Por outro lado, para o gene NOS3, observámos uma associação negativa entre o VNTR_alelo 4b e o haplotipo V, e a ocorrência de enfarte cerebral silencioso, bem como entre o haplotipo VII e a ocorrência de vasculopatia cerebral. Os resultados obtidos sublinham a importância de VCAM1 e NOS3 como moduladores genéticos, bem como o seu potencial como biomarcadores para a prevenção e prognóstico da vasculopatia cerebral em crianças com drepanocitose.Sickle cell anemia is a genetic disease caused by homozygosity for the mutation c.20A>T in the beta-globin gene which leads to the synthesis of an abnormal hemoglobin – hemoglobin S. In addition to chronic hemolytic anemia, the disease includes various clinical manifestations of which cerebral vasculopathy (that comprises overt stroke and silent cerebral infarction) is the most severe in children. Despite being a monogenic disease, its progression and severity may be modified due to the effect of variants in other genes. In this work, we studied 70 sickle cell anemia pediatric patients of sub-Saharan ancestry well characterized in terms of cerebral vasculopathy. We genotyped variants in the VCAM1 and NOS3 genes, due to the involvement of these genes in blood vessel endothelium activation and vascular tone balance. Statistical analyses showed a positive associative between the presence of the rs1409419_T variant, as well as of the haplotype 7 of VCAM1, and stroke. On the other hand, for the NOS3 gene, we observed a negative association between the presence of the VNTR_4b allele and haplotype V and silent cerebral infarcts. A similar association was observed between haplotype VII and cerebral vasculopathy as a whole. Our results underline the importance of VCAM1 and NOS3 genes as genetic modulators, as well as their role as potential biomarkers for cerebral vasculopathy prevention and prognosis in children with sickle cell anemia.Este trabalho foi parcialmente financiado pela Fundação para a Ciência e a Tecnologia (projeto PIC/IC/83084/2007), pelo Instituto de Saúde Ambiental/Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa e pelo Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge (projeto 2012DGH720).info:eu-repo/semantics/publishedVersio