Determination of intact parabens in the human plasma of cancer and non-cancer patients using a validated fabric phase sorptive extraction reversed-phase liquid chromatography method with uv detection

Parabens have been widely employed as preservatives since the 1920s for extending the shelf life of foodstuffs, medicines, and daily care products. Given the fact that there are some legitimate concerns related to their potential multiple endocrine-disrupting properties, the development of novel bioanalytical methods for their biomonitoring is crucial. In this study, a fabric phase sorptive extraction reversed-phase liquid chromatography method coupled with UV detection (FPSE-HPLC-UV) was developed and validated for the quantitation of seven parabens in human plasma samples. Chromatographic separation of the seven parabens and p-hydroxybenzoic acid was achieved on a semi-micro Spherisorb ODS1 analytical column under isocratic elution using a mobile phase containing 0.1% (v/v) formic acid and 66% 49 mM ammonium formate aqueous solution in acetonitrile at flow rate 0.25 mL min−1 with a 24-min run time for each sample. The method was linear at a concentration range of 20 to 500 ng mL−1 for the seven parabens under study in human plasma samples. The efficiency of the method was proven with the analysis of 20 human plasma samples collected from women subjected to breast cancer surgery and to reconstructive and aesthetic breast surgery. The highest quantitation rates in human plasma samples from cancerous cases were found for methylparaben and isobutylparaben with average plasma concentrations at 77 and 112.5 ng mL−1 . The high concentration levels detected agree with previous findings for some of the parabens and emphasize the need for further epidemiological research on the possible health effects of the use of these compounds

Ανάπτυξη και αξιολόγηση μεθόδου εκχύλισης προσρόφησης σε υφασμάτινο μέσο και υγροχρωματογραφιας υψηλής απόδοσης (FPSE-HPLC) για τον ποσοτικό προσδιορισμό parabens σε ανθρώπινο πλάσμα

Τα συντηρητικά είναι απαραίτητα προκειμένου να μην αλλοιωθούν οι ιδιότητες των προϊόντων κατά το διάστημα αποθήκευσής τους και ώστε να έχουν και μεγαλύτερη διάρκεια ζωής. Χωρίς συντηρητικά, τα περισσότερα φάρμακα, καλλυντικά ή και τρόφιμα θα έπρεπε να διατηρούνται στο ψυγείο προκειμένου η διάρκεια ζωής τους να είναι 1-2 εβδομάδες. Τα parabens χρησιμοποιούνται ευρέως ως συντηρητικά σε φάρμακα, καλλυντικά και τρόφιμα χάρη στο ευρύ αντιμικροβιακό τους φάσμα, στο ουδέτερο pH τους και στο γεγονός ότι είναι άχρωμα και άοσμα. Στα τέλη του 2000 οι ενώσεις αυτές άρχισαν να εγείρουν προβληματισμούς, καθώς βρέθηκε ότι έχουν οιστρογονική δράση, ενώ η ανίχνευσή τους σε όγκους ανθρώπινου μαστού πυροδότησε μια σειρά από αναφορές που έθεσαν σε αμφιβολία την ασφάλειά τους. Ορισμένα από αυτά έχουν ενοχοποιηθεί ως ενδοκρινικοί διαταράκτες (EDCs), καθώς μεταβάλλουν τη λειτουργία του ενδοκρινικού συστήματος. Η παρατεταμένη χρήση τους έχει προσελκύσει το ενδιαφέρον των ερευνητών για την αξιολόγηση της ανθρώπινης έκθεσης στις ενώσεις αυτές. Επομένως είναι αναγκαία η ανάπτυξη βιοαναλυτικών μεθόδων για τον ποσοτικό προσδιορισμό των parabens σε βιολογικά υγρά. Στην εργασία αναπτύχθηκε μέθοδος υγροχρωματογραφίας υψηλής απόδοσης για τον ποσοτικό προσδιορισμό μιας ομάδας ενώσεων parabens σε ανθρώπινο πλάσμα. Λόγω των χαμηλών επιπέδων των αναλυτών στο ανθρώπινο πλάσμα ήταν αναγκαία η προκατεργασία με τεχνική, η οποία θα συνδυάζει υψηλή εκλεκτικότητα και ευαισθησία. Για το σκοπό αυτό τα δείγματα του πλάσματος, κατεργάζονται με την τεχνική της εκχύλισης προσρόφησης σε υφασμάτινο μέσο (FPSE). H εκχύλιση προσρόφησης σε υφασμάτινο μέσο είναι μια νέα, πολλά υποσχόμενη τεχνική προκατεργασίας βιολογικού δείγματος η οποία επιστρατεύει την τεχνολογία επικάλυψης λύματος-πηκτής. Αρχικά αναπτύχθηκε η χρωματογραφική μέθοδος και καθορίστηκαν οι βέλτιστες χρωματογραφικές συνθήκες που επιτρέπουν το χρωματογραφικό διαχωρισμό των αναλυτών αλλά και των υπολοίπων συστατικών του υλικού μήτρας (ανθρώπινο πλάσμα), επιλέχθηκε η βέλτιστη κινητή και στατική φάση και οι κατάλληλες συνθήκες ανίχνευσης. Ακολούθως αναπτύχθηκε και βελτιστοποιήθηκε η τεχνική της εκχύλισης προσρόφησης σε υφασμάτινο μέσο με σκοπό να επιτευχθεί βέλτιστη ανάκτηση των αναλυτών και να μειωθούν οι παρεμποδίσεις από το υλικό μήτρας. Η μέθοδος επικυρώθηκε ως προς τα κύρια χαρακτηριστικά ποιότητάς της, και εφαρμόσθηκε με επιτυχία στην ανάλυση βιολογικών δειγμάτων.Parabens are widely used to prolong the shelf life of foods, daily care products, and pharmaceutical preparations. These compounds are preservatives that exhibit a broad range of antimicrobial activity and chemical stability without imparting any taste or odor. The combination of these properties makes it relatively difficult to find a preservative, which will be a satisfactory replacement for parabens. Several studies revealed that they are absorbed through the skin and they can also enter the human body when pharmaceuticals or foods are swallowed or eaten. Research suggests that several parabens, have endocrine disrupting effects and they suspected to cause various health effects. Thus, there is an urgent need for the development of novel bioanalytical methods for the biomonitoring of these compounds. In this study a novel fabric phase sorptive extraction-high performance liquid chromatography method (FPSE-HPLC) has been developed and validated for the quantification of parabens in human plasma. FPSE utilizes a natural or synthetic permeable and flexible fabric substrate chemically coated with a sol-gel organic-inorganic hybrid sorbent in the form of ultra-thin coating. Chromatographic separation was performed on a Spherisorb ODS1 C18 analytical column with isocratic elution using acetonitrile as solvent A and 49.2 mM ammonium formate buffer as solvent B at a flow rate of 0,25 mL min-1. The assay was linear over a concentration range of 20 to 500 ng mL-1 for all the analytes. A run time of less than 30 min for each sample made it possible to analyze many biological samples per day

Determination of Intact Parabens in the Human Plasma of Cancer and Non-Cancer Patients Using a Validated Fabric Phase Sorptive Extraction Reversed-Phase Liquid Chromatography Method with UV Detection

Parabens have been widely employed as preservatives since the 1920s for extending the shelf life of foodstuffs, medicines, and daily care products. Given the fact that there are some legitimate concerns related to their potential multiple endocrine-disrupting properties, the development of novel bioanalytical methods for their biomonitoring is crucial. In this study, a fabric phase sorptive extraction reversed-phase liquid chromatography method coupled with UV detection (FPSE-HPLC-UV) was developed and validated for the quantitation of seven parabens in human plasma samples. Chromatographic separation of the seven parabens and p-hydroxybenzoic acid was achieved on a semi-micro Spherisorb ODS1 analytical column under isocratic elution using a mobile phase containing 0.1% (v/v) formic acid and 66% 49 mM ammonium formate aqueous solution in acetonitrile at flow rate 0.25 mL min−1 with a 24-min run time for each sample. The method was linear at a concentration range of 20 to 500 ng mL−1 for the seven parabens under study in human plasma samples. The efficiency of the method was proven with the analysis of 20 human plasma samples collected from women subjected to breast cancer surgery and to reconstructive and aesthetic breast surgery. The highest quantitation rates in human plasma samples from cancerous cases were found for methylparaben and isobutylparaben with average plasma concentrations at 77 and 112.5 ng mL−1. The high concentration levels detected agree with previous findings for some of the parabens and emphasize the need for further epidemiological research on the possible health effects of the use of these compounds