Heterochromatin analysis in the fish species Liposarcus anisitsi (siluriformes) and Leporinus elongatus (characiformes)

The chromosomes of two neotropical freshwater fish species, namely Liposarcus anisitsi (Siluriformes, Loricariidae) and Leporinus elongatus (Characiformes, Anostomidae), were investigated by means of C-banding, Ag-NORs, fluorochrome staining and banding by hot saline solution (HSS) treatment, to reveal patterns of heterochromatin differentiation. The karyotype of L. anisitsi is described for the first time. Staining with the GC-specific fluorescent antibiotic mithramycin (MM) revealed bright signals in some C-banded blocks in both species, suggesting that these MM+ heterochromatin contains GC-rich DNA. Banding by denaturation employing HSS, followed by Giemsa staining, yielded corresponding results documenting the thermal stability of GC-rich DNA part of heterochromatin positive after C-banding. In L. elongatus the Ag-NOR also followed the above banding patterns. However, in L. anisitsi the Ag-NOR was MM+ but negatively stained after C-banding and HSS treatment. L. elongatus also showed C-banded segments that were negative for mithramycin staining and HSS treatment. The results obtained evidence the heterochromatin heterogeneity in these fish species.<br>Cromossomos mitóticos de duas especies de peixes neotropicais, Leporinus elongatus (Characiformes) e Liposarcus anisitsi (Siluriformes), foram estudados por diferentes métodos de bandamentos, com o intuito de investigar a diferenciação da heterocromatina. Enquanto que a macroestrutura cariotípica de L. elongatus já foi objeto de estudos anteriores, o cariótipo de L. anisitsi está sendo apresentado pela primeira vez. Em ambas as espécies, a coloração dos cromossomos com a mitramicina (MM), fluorocromo GC específico, evidenciou sinais brilhantes em alguns segmentos heterocromáticos também positivos ao bandamento C, sugerindo ser esta fração da heterocromatina rica em seqüências de bases GC. O tratamento dos cromossomos com solução salina aquecida e posterior coloração com Giemsa demonstrou resultados similares, documentando a estabilidade térmica do DNA rico em bases GC, presente na heterocromatina constitutiva. Em L. elongatus a Ag-NOR também seguiu os padrões de bandamentos acima. Em L. anisitsi, contudo, a Ag-NOR apresentou-se MM+ mas negativamente corada após o bandamento C e o tratamento com solução salina aquecida. Por outro lado, em L. elongatus, alguns segmentos que foram positivos ao bandamento C mostraram-se negativos à coloração com mitramicina, assim como à coloração com Giemsa após o tratamento térmico com solução salina. Os resultados obtidos evidenciam a heterogeneidade da heterocromatina no complemento cariotípico das espécies estudadas

Interindividual size heteromorphism of NOR and chromosomal location of 5S rRNA genes in Iheringichthys labrosus

Twenty-five specimens of Iheringichthys labrosus from the Capivara Reservoir were analysed cytogenetically. AgNORs were detected in a pair of ST chromosomes, in the telomeric region of the long arm. Some individuals showed size heteromorphism of this region between homologous chromosomes. Treatment with CMA3 displayed GC-rich regions corresponding to the AgNOR pair, plus other fluorescent staining. In situ hybridization by fluorescence (FISH) with the 18S rDNA probe showed only one pair of stained chromosomes, confirming the heteromorphism observed with AgNO3 and CMA3 in some individuals. The 5S rDNA probe revealed telomeric staining on the long arm of a pair of chromosomes of the ST-A group, probably different from the NOR pair.<br>Foram analisados citogeneticamente vinte e cinco indivíduos de Iheringichthys labrosus da Represa Capivara. As AgNORs foram detectadas em um par de cromossomos ST na região telomérica do braço longo. Em alguns exemplares machos e fêmeas foi observado um heteromorfismo de tamanho desta região entre cromossomos homólogos. O tratamento com CMA3 exibiu regiões ricas em GC correspondentes ao par da NOR e outras marcações fluorescentes. A hibridação in situ por fluorescência (FISH) com a sonda de DNAr 18S mostrou somente um par de cromossomos marcados, confirmando o heteromorfismo observado com AgNO3 and CMA3 em alguns indivíduos. A sonda de DNAr 5S revelou marcação telomérica no braço longo de um par de cromossomos do grupo ST-A, provavelmente diferente do par da NOR