A rövidszénláncú zsírsavak és egyes arachidonsav metabolitok szerepe a gastrointestinalis sejtek osztódásának szabályozásában és apoptosisának kialakulásában = Role of short chain fatty acids and arachidonate metabolites in the regulation of proliferation and induction of apoptosis of gastrointestinal cells

Megállapítottuk, hogy az indometacin a HT29 sejtekből származó colorectalis adenocarcinoma sejtek esetében a butirát sejtosztódás gátló hatásával szemben rezisztenciát alakít ki, és ez a hatás nordihidrogvajaretsavval felfüggeszthető. Az indometacin hatása a butiráttal kezelt sejteknél abban nyilvánul meg, hogy a sejtkolóniák száma és nagysága növekszik, a Ki67 pozitív sejtek száma emelkedik, nő a H2O2 termelés, az NFkappaB aktiválódik, a COX-1 és a COX-2 expresszió egyaránt fokozódik és a butirát indukálta differenciáció gátlódik. Nordihidrogvajaretsav adása indometacin jelenlétében butiráttal kezelt sejteknél azt eredményezi, hogy a sejthalál jelentős mértékben fokozódik. E nem szteroid gyulladáscsökkentőnek azt a képességét, amely a butirát proliferációra gyakorolt gátló hatásával szemben érvényesül tumor sejteknél, mellékhatásként kell értékelni, mely főleg a colonban jelentkezik, ahol a butirát millimoláris koncentrációban van jelen. | It was established that indomethacin increased the resistance of HT29-derived colon cancer cells to butyrate-mediated growth inhibition, and this effect of indomethacin was abrogated by nordihydroguaraetic acid. The effect of indomethacin on butyrate treated cells was manifested by increased numbers and larger colonies, nuclear accumulation of the proliferation marker Ki67, increase of H2O2 production, activation of NFkappaB, upregulation of both COX-1 and COX-2 and inhibition of butyrate-induced cell differentiation. Application of nordihydroguaraetic acid together with indomethacin to butyrate-treated cells, resulted in highly increased cell death induction. The ability of a nonsteroidal anti-inflammatory drug to counteract butyrate-mediated proliferation inhibition in tumour cells must be considered as a serious side effect, especially in the colon, wich is exposed to millimolar concentration of butyrate

A háziállatok energia-metabolizmusát szabályzó fontosabb tényezők molekuláris szintű vizsgálata = Molecular aspects of hormonal factors influencing the energy metabolism in domestic animals

Kutatásainkban két anyagcserehormon a leptin és a pajzsmirigyhormon háztartását elemeztük molekuláris biológiai eszközökkel. A leptin vizsgálataink során in situ hibridizációs technikát dolgoztunk ki a leptin és receptorai mRNS-ének kimutatására. Az mRNS mennyiséget kompetitív PCR, később valós idejű PCR segítségével mértük. Szarvasmarha tejmirigyben azt találtuk, hogy a lokálisan termelt leptin parakrin módon befolyásolja a tőgy működését. Negatív energia egyensúlyban a helyileg termelt leptin ellensúlyozza a vér csökkenő leptin tartalmát. Kimutattunk a leptin lokális szabályozó szerepét járulékos nemi mirigyekben. Bizonyítottuk, hogy baromfiban a csökkenő energiaszintű takarmányozás hatására kialakuló alacsony T3 szint nemcsak a megnövekedett májbeli hormon inaktiválás következménye (dejodáz-3, D3 csökkenés), hanem a hormon aktiválás csökkenésének (D2) következménye is. Korábbi irodalmi eredmények csak a D1 enzimet vizsgálták, amiben nem volt eltérés. Átfogó kísérleteket végeztünk a csökkent energia-felvétel hatásainak kimutatására. Kimutattuk, hogy a megváltozott dejodáz aktivitás biológiai hatással rendelkezik, eredményeképpen az oxigénfogyasztás megváltozik. Negatív energia-egyensúlyban lévő szarvasmarhákban szénhidrátok hatására nő a T3 szint, ami növeli a helyi leptin termelést. Ez végülis csökkenti a máj elzsírosodását. Szövettenyésztési módszert dolgoztunk ki neuronok szaporítására. Ebben lehetőség nyílik a hypothalamicus hormon-interakciók vizsgálatára. | Two important metabolic hormones the leptin and the thyroid hormone were examined using molecular biology tools. In situ hybridization technique was used to show the tissue distribution of leptin and its receptors. The amount of mRNA was measured by competitive PCR later on by real time PCR. We found that in the udder of the cow the locally produced leptin affects milk production in with paracrine effect. In negative energy balance the locally produced leptin contributes to the limited plasma leptin available. We also demonstrated the local regulatory effects of leptin in the male accessory glands. In chicken we proved that the restricted feed intake lowers circulation T3 level not only by increasing hormone inactivation (deiodinase 3, D3), but also by decreasing D2 activity. Former literature data show that there is no change in D1 enzyme activity. Complex experiments were designed to show the effects of restricted food intake. Deiodinase activity was proved to have biological effect: the oxygen consumption finally changes consequently. Carbohydrates increase local leptin production in cows with negative energy balance. Elevated T3 increases local leptin production witch finally decreases the chance to develop fatty liver syndrome. Cell culturing method was established to grow neuron cells. This gives us the possibility to examine hormone interactions in the hypothalamus

Biofilm formation in Malassezia pachydermatis strains isolated from dogs decreases susceptibility to ketoconazole and itraconazole

Malassezia pachydermatis is a commonly isolated yeast in veterinary dermatology that can produce biofilms in vitro and in vivo, lowering its susceptibility to antimicrobial drugs. The aim of this study was to determine and compare the in vitro susceptibility of planktonic cells and biofilms of M. pachydermatis isolates to ketoconazole and itraconazole. The presence of biofilm formation was confirmed by crystal violet staining and absorbance measurement at 595 nm wavelength, and by a scanning electron microscopy method. Cell viability was determined by the Celltiter 96 Aqueous One solution assay containing a water-soluble tetrazolium compound (MTS) with absorbance measurement at 490 nm. Planktonic cell minimum inhibitory concentrations (MICs) and minimum fungicidal concentrations (MFCs) of ketoconazole and itraconazole were very low: MIC90 and MFC90 were 0.032 and 0.125 μg/ml for ketoconazole, while 0.063 and 0.25 μg/ml for itraconazole, respectively. Also, the half maximal effective concentrations (EC50) of itraconazole were higher for planktonic cells and biofilms compared to ketoconazole. The EC50 values of ketoconazole were 18–169 times higher and those of itraconazole 13–124 times higher for biofilms than for planktonic cells. Biofilm EC50 levels exceeded MICs 103–2060 times for ketoconazole and 84–1400 times for itraconazole. No significant difference was found between these values of the two substances. In conclusion, biofilms of all examined M. pachydermatis strains were much less susceptible to ketoconazole and itraconazole than their planktonic forms

Magnesium-dependent atpase as a possibility for the investigation of deponating environmental loads in a hepatocyte model

Chemicals that load the environment can be chlorobenzenes with massive chemical stability. They induce a dose-dependent toxic effect in the cells of affected tissues, and because of their high frequency of occurrence in the food chain, they can be used as expositors in environmental exposure models. In this work, we wanted to investigate the magnesium-dependent ATPase activity of chlorobenzenes in hepatocytes

Expression of claudin-1, -3, -4, -5 and -7 proteins in low grade colorectal carcinoma of canines

The aim of the present study was to characterise the expression pattern of claudin-1, -3, -4, -5 and -7 tight junction proteins in canine normal colorectum and in the low-grade, tubulopapillary colorectal carcinoma in canines. Methods and results: The biopsy samples included 10 canine normal colorectal tissues and 20 canine low grade colorectal carcinomas (CLGCCs). The canine normal colorectal mucosa was negative for claudin-1. Claudin-1 was detected as a non-diffuse intense membrane labelling of neoplastic epithelial cells in low grade colorectal cancer in canines. Fifty five per cent of all tumours showed a weak cytoplasmic pattern of staining for claudin-1 protein. The normal colorectal mucosa showed diffuse punctate positivity for claudin-3. Claudin-3 was detected as an intense lateral membrane labelling of tumour cells in CLGCCs. Claudin-4 expression in surface and crypt epithelial cells of the intact colorectal mucosa in canines was punctate. Claudin-4 molecule was detected as a lateral membrane labelling of neoplastic cells in CLGCCs. The epithelium of the CLGCCs and the low grade colorectal carcinoma were negative for claudin-5. The surface and crypt epithlial cells of the canine normal colorectal mucosa showed a diffuse lateral membranous pattern of staining for claudin-7. Claudin-7 molecule was detected as an intense membrane labelling of neoplastic cells in CLGCCs. Seventy per cent of all tumours showed weak cytoplasmic positivity for claudin-7. Conclusion: Consequently, we hypothesize that claudin-1 plays a role in the progression of CLGCCs. Further functional studies are needed to clarify the biological role of the mislocalization of the claudin-1 molecule from cell membrane to the cytoplasm in CLGCCs. Lower claudin-4 expression suggests that reduced expression of claudin-4 molecule may lead to cellular disorientation, detachment and invasion of CLGCCs. Further functional studies are needed to clarify the biological role of overexpression and mislocalisation of claudin-7 in CLGCCs

Szabályozási mechanizmusok az állatorvosi alapkutatásban: a molekulától a szervrendszerekig = Regulatory mechanism in basic veterinary science: from molecules to organ systems

Az energia-metabolizmus szabályozásának hormonális és neuromorfológiai vizsgálatai szerint szarvasmarhában a lokálisan termelt leptin a tőgy és a járulékos nemi mirigyek működését szabályozza. Negatív energia-egyensúlyban a szénhidrátok hatására nő a T3 szint, növelve a helyi leptin termelést. Bizonyítottuk, hogy a csökkenő energiaszinten takarmányozott baromfiban kialakuló alacsony T3 szint nemcsak a megnövekedett májbeli hormon inaktiválás, hanem a hormon aktiválás csökkenésének is a következménye. Orexigén és anorexigén neuropeptidek rostrocaudalis megoszlását és denzitásbeli változásait vizsgálva patkányok lateralis septumában (LS) megállapítottuk, hogy a LS peptiderg rendszerei egyaránt érzékenyen reagálnak az éhezés, és egyes gonadális hormonok hatására is. Az endothelsejtek egyes strukturális és IgG homeosztázisban résztvevő génjének expressziós elemzése alapján megállapítottuk, hogy a bFcRn nehézlánc promotere több NFkB transzkripciós kötőhelyet is tartalmaz, ill. a LPS kezelés hatására mind in vitro, mind in vivo emelkedik e gén expresszió mértéke. A dystroglycan expresszió hatását vizsgálva az endothel sejtekre megállapítottuk, hogy a DAPC a vizsgált sejttípusokban befolyásolja a sejt és az extracelluláris mátrix kölcsönhatását. Normal és negativ energiaegyensúlyban lévő kérődzőkben végzett molekuláris szintű vizsgálatok arra utalnak, hogy ketózis esetén az endometrium sejtjei kisebb arányban pusztulnak el apoptosissal, ami fokozza a necrosis veszélyét. | According to the hormonal and neuromorphologic aspects of the regulation of energy metabolism the locally produced leptin affects bovine milk production and has local regulatory effect on the male accessory glands. Carbohydrates increase the T3 level, which increases local leptin production in cows with negative energy balance. In pultry the decreased circulatory T3 in restricted feed intake, is not only the consequence of an increased hepatic hormone inactivation, but also of a decreased D2 activity. Examining the rostrocaudal distribution and density changes of orexigenic and anorexigenic neuropeptides in the lateral septum (LS) of rats, we found that the peptiderg systems of the LS react with marked neurochemical changes not only to food deprivation, but also to the effect of certain gonadal hormones. Studies on the gene expression of certain structure genes and genes influencing IgG homeostasis revealed, that bFcRn has several NFkB transcriptional binding sites in its promoter and is upregulated after LPS treatment both in vitro and in vivo. Investigating the role of the expression of dystroglycan in the adhesive properties of endothel cells, we confirmed the role of DAPC in the interaction of the cell types we used with the extracellular matrix. Molecular level investigations of ruminants in normal and in negative energy balance, led showed that in case of ketosis the cells of endometrium will die in smaller proportion by apoptosis which increases the risk of necrosis

Sugar substitute compounds as environmental exposures - aspects from neuroendocrine functions

It is an extremely interesting question to what extent elements of psychic activity (e.g. cognition) in social existence can change by mediating neuroendocrine communication when it is necessarily altered by chemical environmental influences (e.g. nutritional biological agents) through real technosphere exposures. In the processes of learning and memory, biological mechanisms regulated by the neuro-endocrine system appear predominantly, showing a network relationship with essential local system properties. Exposures (dietary supplements) are tested on in vitro models by monitoring the events of neuro-endocrinological communication (hormone secretions, monoamine /adrenaline and serotonine/) and their changes in exposure

Effect of subtoxic dose, extreme low frequency (ELF) electromagnetic field (EMF) treatments on liver enzyme changes in in vivo Turkey model experiments

Natural electromagnetic field background radiation in Earth is 20-30 µT, which is a condition in terrestrial evolution. Today, however, in the technosphere-determined environment, intermittent extreme low-frequency electromagnetic fields are predominant. In the present work, we aim to investigate this topic area by in vivo systematic study of subtoxic and chronic electromagnetic field exposures in a turkey model