Función de la proteína mediadora de respuesta a colapsinas 2 (CRMP-2) en cáncer de pulmón no microcítico

Los microtúbulos desarrollan una función importante en procesos celulares tan cruciales como la división celular, la adhesión a sustrato, la migración o el transporte de proteínas y orgánulos. Durante la mitosis, los microtúbulos constituyen el huso mitótico. Debido a su intervención en la división celular, los microtúbulos son dianas moleculares de primera magnitud en las terapias frente al cáncer. En los últimos años se ha descubierto que es esencial la colaboración de las Proteínas Asociadas a Microtúbulos (MAPs) para que los microtúbulos puedan realizar su función correctamente. La familia de las proteínas de respuesta a colapsina o CRMPs constituye un ejemplo de este tipo de moléculas. La proteína mediadora de respuesta a colapsina tipo 2 (CRMP-2) es una proteína adaptadora de tubulina que interacciona con los heterodímeros de tubulina para unirlos a los microtúbulos crecientes, de modo dependiente de su estado de fosforilación. A pesar de su interacción con tubulina, CRMP-2 ha sido descrita fundamentalmente en tejido nervioso. Pensamos que debido a su participación en la dinámica de los microtúbulos, CRMP-2 puede presentar una expresión o regulación diferencial en las células transformadas con respecto a células primarias y con ello contribuir a la progresión tumoral. En concreto en este estudio nos propusimos estudiar la función de CRMP-2 en el contexto de carcinoma pulmonar y nos planteamos los siguientes objetivos: 1- Estudiar la expresión de CRMP-2 en células primarias de epitelio bronquial, células inmortalizadas y células transformadas de pulmón y comparar los niveles de expresión y fosforilación de esta proteína en células normales y transformadas, así como su localización subcelular y co-localización con tubulina. 2- Analizar si las variaciones en el estado de fosforilación de CRMP-2 pueden contribuir a la adquisición de propiedades características de tumores agresivos: mayor proliferación y capacidad de migración. 3- Estudiar la participación de CRMP-2 en la mitosis y evaluar si las alteraciones en su grado de fosforilación afectan a la correcta división de las células tumorales

Función de la proteína mediadora de respuesta a colapsinas 2 (CRMP-2) en cáncer de pulmón no microcítico

Los microtúbulos desarrollan una función importante en procesos celulares tan cruciales como la división celular, la adhesión a sustrato, la migración o el transporte de proteínas y orgánulos. Durante la mitosis, los microtúbulos constituyen el huso mitótico. Debido a su intervención en la división celular, los microtúbulos son dianas moleculares de primera magnitud en las terapias frente al cáncer. En los últimos años se ha descubierto que es esencial la colaboración de las Proteínas Asociadas a Microtúbulos (MAPs) para que los microtúbulos puedan realizar su función correctamente. La familia de las proteínas de respuesta a colapsina o CRMPs constituye un ejemplo de este tipo de moléculas. La proteína mediadora de respuesta a colapsina tipo 2 (CRMP-2) es una proteína adaptadora de tubulina que interacciona con los heterodímeros de tubulina para unirlos a los microtúbulos crecientes, de modo dependiente de su estado de fosforilación. A pesar de su interacción con tubulina, CRMP-2 ha sido descrita fundamentalmente en tejido nervioso. Pensamos que debido a su participación en la dinámica de los microtúbulos, CRMP-2 puede presentar una expresión o regulación diferencial en las células transformadas con respecto a células primarias y con ello contribuir a la progresión tumoral. En concreto en este estudio nos propusimos estudiar la función de CRMP-2 en el contexto de carcinoma pulmonar y nos planteamos los siguientes objetivos: 1- Estudiar la expresión de CRMP-2 en células primarias de epitelio bronquial, células inmortalizadas y células transformadas de pulmón y comparar los niveles de expresión y fosforilación de esta proteína en células normales y transformadas, así como su localización subcelular y co-localización con tubulina. 2- Analizar si las variaciones en el estado de fosforilación de CRMP-2 pueden contribuir a la adquisición de propiedades características de tumores agresivos: mayor proliferación y capacidad de migración. 3- Estudiar la participación de CRMP-2 en la mitosis y evaluar si las alteraciones en su grado de fosforilación afectan a la correcta división de las células tumorales

All-trans-retinoic acid inhibits collapsin response mediator protein-2 transcriptional activity during SH-SY5Y neuroblastoma cell differentiation

Neurons are highly polarized cells composed of two structurally and functionally distinct parts, the axon and the dendrite. The establishment of this asymmetric structure is a tightly regulated process. In fact, alterations in the proteins involved in the configuration of the microtubule lattice are frequent in neuro-oncologic diseases. One of these cytoplasmic mediators is the protein known as collapsin response mediator protein-2, which interacts with and promotes tubulin polymerization. In this study, we investigated collapsin response mediator protein-2 transcriptional regulation during all-trans-retinoic acid-induced differentiation of SH-SY5Y neuroblastoma cells. All-trans-retinoic acid is considered to be a potential preventive and therapeutic agent, and has been extensively used to differentiate neuroblastoma cells in vitro. Therefore, we first demonstrated that collapsin response mediator protein-2 mRNA levels are downregulated during the differentiation process. After completion of deletion construct analysis and mutagenesis and mobility shift assays, we concluded that collapsin response mediator protein-2 basal promoter activity is regulated by the transcription factors AP-2 and Pax-3, whereas E2F, Sp1 and NeuroD1 seem not to participate in its regulation. Furthermore, we finally established that reduced expression of collapsin response mediator protein-2 after all-trans-retinoic acid exposure is associated with impaired Pax-3 and AP-2 binding to their consensus sequences in the collapsin response mediator protein-2 promoter. Decreased attachment of AP-2 is a consequence of its accumulation in the cytoplasm. On the other hand, Pax-3 shows lower binding due to all-trans-retinoic acid-mediated transcriptional repression. Unraveling the molecular mechanisms behind the action of all-trans-retinoic acid on neuroblastoma cells may well offer new perspectives for its clinical application