Modifiye Yumurta Sarılı Sulandırıcıların Soğutulan ve Dondurulan Koç Sperması Üzerine Etkileri

Modifiye Yumurta Sarılı Sulandırıcıların Soğutulan Ve Dondurulan Koç Sperması Üzerine Etkileri Asiye İzem SANDALa, İdil ORUÇb, Aslıhan SEVİNb, Emine TEKDEMİRb, Sinan GÖKSELb, Damla ALTUNAYb, Hatice ŞENLİKCİa, Ramazan ARICIa, Ahmet ESERa,Özen Banu ÖZDAŞa , Kemal AKa İstanbul Üniversitesi, Veteriner Fakültesi, Dölerme ve Sun’i Tohumlama Anabilim Dalı, Avcılar, 34320 İstanbul, Türkiye b İstanbul Üniversitesi, Veteriner Fakültesi, İntörn Öğrencileri, Avcılar, 34320 İstanbul, Türkiye Ülkemizde koyun yetiştiriciliği TÜİK 2016 verilerine göre 30.983.933 adet koyun varlığı ile hayvancılık sektörü içinde önemli bir yere sahiptir. Dolayısıyla ülkemizin yıllık et, süt ve yün ihtiyacının büyük bir çoğunluğunu karşılamakla birlikte yeterli olamamaktadır. Bu sebeple çeşitli biyoteknolojik yöntemler kullanılarak koyundan elde edilen verim arttırılmaya çalışılmaktadır. Suni tohumlama yöntemi ise özellikle entansif koç yetiştiriciliği yapan işletmelerde üreme kontrolünü sağlamak ve et, süt, yün üretimini arttırmak amacıyla havyan ıslahı açısından önemli bir role sahiptir. Amacımız, farklı dozlarda antioksidan (sisteamin) (2,5-5-10 mM) (Grup A-B-C) eklenmiş ve eklenmemiş (Grup Kontrol) yumurta sarılı sulandırıcıların dondurma ve eritme sonrası ve +4 °C’ de 0, 6, 12 ve 24. ve 48. saatlerdeki spermatolojik özellikler üzerine etkilerinin araştırılmasıdır. Sperma alındıktan sonra hacim, konsantrasyon, motilite, morfoloji ve canlı spermatozoon oranları değerlendirildi. Konsantrasyonu belirlemek amacıyla CASA (Computer Assisted Sperm Analysis) cihazı kullanıldı. Motilite muayenesi ise ısıtma tablalı faz kontrast mikroskopta (x200), morfolojik yönden anormal spermatozoa oranı da yine faz kontrast mikroskopta (x1000) değerlendirildi. Canlı spermatozoa oranı ise ışık mikroskobunda incelendi. Motilite, morfoloji ve canlı spermatozoon oranları yönünden en başarılı sulandırıcı grubu Grup A ve Grup B olarak bulundu. Grup C ise en başarısız grup oldu. Koç spermasının kısa süreli saklanmasında ve dondurma ve eritme sonrası muayenelerinde 2,5 mM ve 5 mM sisteamin eklenen yumurta sulandırıcısının faydalı etki gösterdiği saptandı. 10 mM sistemin eklenen yumurta sarılı sulandırıcının ise motilite, morfoloji ve canlı spermatozoa oranı yönünden 6.-48. saatler arasında en başarısız olarak bulundu. 2,5 mM ve 5 mM sisteamin eklenen yumurta sulandırıcısının koç sperması üzerine faydalı etki gösterdiği, 10 mM sistemin eklenen yumurta sarılı sulandırıcının ise zararlı etki gösterdiği saptandı

Eff ects of Melatonin Addition to the Cold Storage Medium on Cumulus Oocyte Complex Apoptosis, Viability and In Vitro Maturation Rates of Cat Oocytes

Abstract: Usage of oocytes obtained from ovaries aft er long-term cold storage for in vitro embryo production is a promising tool for the protection of wildlife and endangered animal species. Mammalian oocytes are susceptible to oxidative stress with regard to the high lipid content of plasma membranes. Melatonin is known as a powerful antioxidant and anti-apoptotic agent due to its ability to eliminate toxic oxygen derivatives and reduce the formation of reactive species. Th is study was performed to verify the optimal environmental conditions for long-term preservation of cat ovaries (Felis domesticus) by adding diff erent concentrations of melatonin (500, 750 and 1000 µM) to the storage medium (0.9% NaCl) as an antioxidant to be preserved at 4°C for 24 h. To determine the eff ect of melatonin on cat oocytes collected from stored ovaries, the anti and proapoptotic gene levels in cumulus oophorus, the in vitro maturation rates, the cell membrane and oocytes viability were evaluated. In all melatonin added groups regardless of whether they are stored in the cold; Pro-apoptotic gene levels (BAX) were determined to be upregulated however, antiapoptotic gene levels (BCL-2) were downregulated in cumulus cells (P<0.05). Th e cell membrane stability and cell viability rates of oocytes began to deteriorate in parallel with the rate of melatonin increase. In parallel with these findings, in vitro maturation rates of oocytes were negatively aff ected as the amount of melatonin increased (P≤0.001). In conclusion the results showed that adding melatonin (500,750 or 1000 µM) to the ovarian transport and storage medium had negative eff ect on in vitro maturation rate, viability and cell membrane structure of cat oocytes