DETECÇÃO MOLECULAR DE ESCHERICHIA COLI PRODUTORA DE TOXINA DE SHIGA EM ALIMENTOS

Culture-independent methods are proposed as a tool for detecting pathogenic microorganisms in food. Escherichia coli strains that produce Shiga Toxin lead to diseases such as bloody diarrhea and hemolytic uremic syndrome by causing damage to the intestine and releasing the toxin into the body. Serological differentiation methods investigate the cell wall antigens, characteristic of each group of E. coli, however they are not efficient when it comes to a more accurate investigation of associated virulence factors. Thus, molecular methods are based on the search for specific genes related to the mechanisms of invasion and damage to the epithelium, as they are protein complexes. The present study was designed with the objective of carrying out a brief literature review about molecular methods as a detection tool for Shiga toxin-producing Escherichia coli. The methodology used dealt with a systematic review in the following databases Web of Science, Science Direct and PUBMED.Métodos independentes de cultura são propostos como uma ferramenta para detectar microrganismos patogênicos em alimentos. As cepas de Escherichia coli que produzem a toxina Shiga levam a doenças como diarreia sanguinolenta e síndrome urêmica hemolítica, causando danos ao intestino e liberando a toxina no corpo. Os métodos de diferenciação sorológica investigam os antígenos da parede celular, característicos de cada grupo de E. coli, porém não são eficientes quando se trata de uma investigação mais precisa dos fatores de virulência associados. Assim, os métodos moleculares se baseiam na busca de genes específicos relacionados aos mecanismos de invasão e dano ao epitélio, pois são complexos proteicos. O presente estudo foi desenhado com o objetivo de realizar uma breve revisão da literatura sobre os métodos moleculares como ferramenta de detecção de Escherichia coli produtora da toxina Shiga. A metodologia utilizada tratou de uma revisão sistemática nas seguintes bases de dados Web of Science, Science Direct e PUBMED

Estudo da detecção de Salmonella spp. em alimentos comercializados na cidade de Fortaleza-CE através de método molecular (qPCR) e método convencional

Salmonellosis is one of the most common diseases in the world, transmitted by food contaminated with different serotypes of Salmonella spp., which threaten food safety and public health. In many countries the Enteritides and Thyphtmurium sovars are the most common, occurring mainly in eggs, chicken and meat. Food can be contaminated with this microorganism throughout the entire production chain, during the transport, processing, storage, distribution and distribution stages. Currently, there are several methodologies for detecting Salmonella spp., including conventional isolation, rapid tests and rapid molecular methodologies. The quantitative polymerase chain reaction (qPCR) or real-time PCR method is a promising tool in studies that aim to quantify the population of microorganisms associated with food and has the advantage of detecting microorganisms even in small concentrations in the sample. In this research, 182 food samples of animal and vegetable origin, sold in the city of Fortaleza-CE, were subjected to an analysis to detect Salmonella spp. compare two different methodologies used to detect these microorganisms (conventional isolation technique - ISO 6579 and real-time PCR (Gene UP Platform). Of the samples tested, Salmonella spp. were detected in 38 samples using real-time PCR (Gene up ) and in 22 samples using the conventional isolation technique - ISO 6579, representing detection percentages of 20% and 12%, respectively. The difference of 8% positivity between the methods is justified by the qPCR technique being a method that detects in molecular level of microbial DNA, presenting high sensitivity, specificity, precision and speed. While the traditional conventional isolation test detects the microorganism at cultivable levels, that is, one that is capable of developing in food. It was found that the molecular method used is a promising tool for diagnosing pathogens in food and can optimize assay response times in laboratories.A Salmonelose é uma das doenças mais comuns no mundo, transmitida por alimentos contaminados com diversos sorotipos de Salmonella spp., que ameaçam a segurança alimentar e a saúde pública. Em muitos países as soravares Enteritides e Thyphtmurium são as mais comuns, encontradas principalmente em ovos, frangos e carne bovina. Os alimentos podem ser contaminados com esse microrganismo ao longo de toda cadeia produtiva, durante as etapas de manuseio, processamento, armazenamento, distribuição e comercialização. Atualmente, existem diversas metodologias para detecção de Salmonella spp., incluindo o isolamento convencional, testes rápidos e as metodologias moleculares rápidas. O método de Reação em Cadeia da Polimerase quantitativo (qPCR) ou PCR em tempo real trata-se de uma ferramenta promissora em estudos que visam quantificar populações de microrganismos associadas a alimentos e apresenta a vantagem de detectar microrganismos mesmo em pequenas concentrações na amostra. Nesta pesquisa, 182 amostras de alimentos de origem animal e vegetal, comercializadas na cidade de Fortaleza- Ce, foram submetidas a análise de detecção de Salmonella spp. visando avaliar duas metodologias diferentes empregadas na detecção desse microrganismos (técnica de isolamento convencional- ISO 6579 e o PCR em tempo real - Plataforma Gene UP). Das amostras analisadas, foram detectadas Salmonella spp. em 38 amostras utilizando o PCR em tempo real (Gene up) e em 22 amostras utilizando a técnica de isolamento convencional - ISO 6579, representando percentuais de detecção de 20% e 12%, respectivamente.  A diferença de 8% de positividade entre os métodos se justifica pela técnica de qPCR ser um método que detecta em nível molecular o DNA microbiano, apresentando alta sensibilidade, especificidade, precisão e rapidez. Enquanto o teste tradicional de isolamento convencional detecta o microrganismo em níveis cultiváveis, ou seja, aquele que está apto ao desenvolvimento no alimento. Foi constatado que o método molecular utilizado é uma ferramenta promissora para o diagnóstico de patógenos em alimentos e pode otimizar o tempo de respostas dos ensaios nos laboratórios

AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS DE QUALIDADE MICROBIOLÓGICA EM PESCADO INDUSTRIALIZADOS NA CIDADE DE FORTALEZA

Fish provides essential nutrients for human consumption, but it is a food quickly deteriorated and very related in cases of foodborne diseases (DTAs). The objective of the study was to evaluate the quality of industrialized fish in the city of Fortaleza, through microbiological analyzes of the main pathogens common to fish, which compromise their health and food safety for consumers. For Salmonella spp. the International Organization for Standardization - ISO 6579: 202, the American Public Health Association (APHA), Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 5th ed. 2015, pages 75-85, 110-113 and 411421, for Escherichia coli screening and International Organization for Standardization - ISO 6888-1: 2021 for screening for positive coagulase Staphylococcus. According to the results obtained, a percentage of 8.5% of positive samples for the parameter Salmonella spp. and 15% of samples with confirmatory results for E. coli. According to IN 161/2022, the research for Salmonella spp., in food must present an absence result in all sample units analyzed by batch. For the positive result of S. aureus coagulase, the count found was below what the legislation requires for food.O peixe fornece nutrientes essenciais para o consumo humano, mas é um alimento rapidamente deteriorado e muito relacionado em casos de doenças transmitidas por alimentos (DTAs). O objetivo do estudo foi avaliar a qualidade dos pescados industrializados na cidade de Fortaleza, por meio de análises microbiológicas dos principais patógenos comuns aos pescados, que comprometem a sua saúde e a segurança alimentar dos consumidores. Para Salmonella spp. a Organização Internacional para Padronização - ISO 6579: 202, a American Public Health Association (APHA), Compêndio de métodos para o exame microbiológico de alimentos, 5ª ed. 2015, páginas 75-85, 110-113 e 411421, para triagem de Escherichia coli e International Organization for Standardization - ISO 6888-1:2021 para triagem de Staphylococcus coagulase positiva. De acordo com os resultados obtidos, um percentual de 8,5% de amostras positivas para o parâmetro Salmonella spp. e 15% das amostras com resultados confirmatórios para E. coli. De acordo com a IN 161/2022, a pesquisa para Salmonella spp., em alimentos deverá apresentar resultado de ausência em todas as unidades amostrais analisadas por lote. Para o resultado positivo de S. aureus coagulase, a contagem encontrada ficou abaixo do que a legislação exige para alimentos