Dede Efendi'nin evi huzur dağıtıyor

Taha Toros Arşivi, Dosya No: 101-Dellalzade İsmail Ded

The effect of cyclosporin A via P53, MDM2 and PIK3CA gene expressions in glioblastoma multiforme cells

Objective: It is aimed to evaluate the effect of cyclosporine A in glioma cells via p53, MDM2 and PIK3CA gene expressions. Material Methods: U87MG cells are treated with 10, 30 and 60 ;micro;M CsA during 72 hour in time and dose dependent manner. The cell group that was not treated by any agent was approved of the control group. During 72 hour, total RNA was isolated from the cells which were collected every 24 hour and complementary DNA was synthesized from these cells. Dose and time dependent manner variation analysis of p53, MDM2 and PIK3CA gene expressions were performed by Real-Time Online RT-PCR. Relative analyses of these genes were achieved by rating the genes' expressions to GAPDH. Results: p53 expression showed an increase in 10;amp;#956;M dose of CsA in time and dose dependent manner and the rise of expression was four times at the 48th hour. MDM2 expression was increased approximately 1,5 times. When PIK3CA expression was evaluated, it was seen that, in the 24th hour, 30 ;amp;#956;M dose of CsA showed 67% suppressed expression according to control group. Conclusions: Due to the results of the performed study by the well-known drug CsA, it is found that up-regulation of functional p53 tumor suppressor and induction of apoptosis triggered by p53 can be effective strategy in the induction of glioma cell death. These data carry a critical weight in the pharmacological explorations related with gliomas.Amaç Siklosporin A nın Gliom hücrelerinde p53, MDM2 ve PIK3CA gen ekspresyonları üzerine etkisinin araltırılması amaçlanmıştır. Yöntem ve Gereç. Bu çalışmada, doz ve zamana bağımlı olarak, U87MG (glioblastom hücre hattı) hücreleri, CsA' nin 10, 30 ve 60µM konsantrasyonları ile 72 saat boyunca muamele edilmiştir. İlaç verilmeyen hücre grubu kontrol olarak kullanılmıştır. 72 saat boyunca, 24 saat aralıklarda toplanan hücrelerden total RNA izole edilmiş ve komplementer DNA sentezlenmiştir. p53, MDM2 ve PIK3CA gen ekspresyonlarının doza ve zamana bağlı değişim analizleri Real-Time Online RT-PCR cihazı ile Gliseraldehit–3-fosfatdehidrogenaz' a (housekeeping gen) oranlanarak kantitatif analizleri gerçekleştirilmiştir. Sonuç CsA' nın 10 ve 30 µM dozları zamana bağlı olarak, p53, MDM2 ve PIK3CA gen ekspresyonlarında madde verilmemiş kontrol grubuna göre artışa ve 60 µM dozunun da azalmaya neden olduğu saptanmıştır.. Bu bulgular, gliomlar ile ilişkili farmakolojik keşiflerde klinik önem taşımaktadır. CsA gibi iyi bilinen ilaçlarla gerçekleştirilen farmakolojik keşifler sonucunda, fonksiyonel p53 tümör supresörünün “up-regülasyonu” ve p53 ile tetiklenmiş apoptozisin indüksiyonu, gliom hücre ölümünün indüklenmesinde etkili bir strateji olabilir

Expression profi les of PIK3CA, RUNX3, COX-2 and DMBT1 genes in brain tumor prognosis: a preliminary study

The two main subgroups of the important genes functioning in the development of cancer including brain tumors are tumor suppressor genes and oncogenes. The aim of this pilot study was to determine the expression profi les of tumor suppressor genes; RUNX3 (Runt-related transcription factor 3), DMBT1 (deleted in malignant brain tumors 1), and oncogenes PIK3CA (phosphoinositide-3-kinase, catalytic, alpha polypeptide) and COX;amp;#8211;2 (Cyclooxygenase-2) in brain tumors. Explant cell cultures were performed using brain tumor tissues from the 14 cases. Total RNA was isolated from the cultured cells. Relative ratio of expression profi les of the tumor suppressor genes and oncogenes were determined by using real-time online RT-PCR. U-87MG cell line was used as positive control. The mean relative ratios of DMBT1, RUNX3, COX-2 and PIK3CA genes were found; 72.2, 59.3, 0.119 and 48.5; respectively. COX-2 over-expression correlated with a signifi cantly reduced survival (Log- Rank, p= 0.049). Suppression of DMBT1 and RUNX3 is associated with decreased survive, however no signifi cant difference was determined between expressions of PIK3CA, DMBT1 and RUNX3 genes and overall survival. High COX-2 expression is found to be associated with clinically more aggressive brain tumors. Our preliminary data suggests that COX-2 gene may be used as a therapeutic target.Beyin tümörleri de dahil olmak üzere kanser gelişiminde önemli rol oynayan genlerin iki ana alt grubu onkogenler ve tümör baskılayıcı genlerdir. Bu ön çalışmanın amacı, tümör baskılayıcı genlerden RUNX3 (Runt-relatedtranscription factor 3), DMBT1 (Deleted in Malignant Brain Tumors 1) ve onkogenlerden PIK3CA (Fosfoinosid- 3-kinaz, katalitik, alfa polipeptid), COX–2 (Siklooksigenaz-2) genlerinin beyin tümörlerinde ifade düzeyini saptamaktır. On dört olgunun beyin tümörü dokularından hücre kültürü ortamında çoğalması sağlandı. Kültüre edilmiş hücrelerden total RNA’lar izole edildi. Gerçek zamanlı RT-PCR metodu kullanılarak onkogen ve tümör baskılayıcı genlerin ekspresyon profi llerinin bağıl oranları saptandı. U87MG hücre hattı pozitif kontrol olarak kullanıldı. DMBT1, RUNX3, COX-2 ve PIK3CA genlerinin bağıl oranları ortalaması sırasıyla 72.2, 59.3, 0.119 ve 48.5 bulundu. COX-2 aşırı ekspresyonu, anlamlı olarak azalmış sağkalım ile korelasyon gösterdi (Log-Rank,p= 0.049). DMBT1 ve RUNX3 genlerinin baskılanması azalmış sağkalımla ilişkili olduğu saptandı ancak PIK3CA, DMBT1 ve RUNX3 ekspresyonları arasında ve sağkalım üzerinde anlamlı bir farklılık saptanmadı. Yüksek COX-2 ekspresyonu klinik olarak fazla agresif beyin tümörleri ile ilişkili olduğu gösterildi. Elde ettiğimiz ön deney sonuçlarımız, COX-2 geninin terapötik hedef olarak kullanılabilir olabileceğini önermektedir