Desenvolvimento de uma metodologia mais ecológica e simples para a determinação de agrotóxicos em amostras de arroz utilizando a combinação de SPME e de disco rotativo

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, 2019.Nesse estudo, um novo método foi desenvolvido com o objetivo de superar certas limitações na análise de amostras sólidas de alimentos. Um arranjo experimental baseado em microextração em fase sólida por imersão direta (DI-SPME) acoplado a um dispositivo de disco rotativo foi proposto para a determinação de agrotóxicos com características polares e semi-polares (carbofurano, molinato, atrazina, simazina e tebuconazol) em amostras de arroz. Neste procedimento inovador, uma pequena quantidade de amostra de arroz é inserida na cavidade do dispositivo de disco rotativo, que é então imerso em uma solução aquosa seguida por agitação em alta velocidade. A água é empregada como solvente para lixiviar os analitos da matriz, eliminando a necessidade do uso de solventes orgânicos. Simultaneamente, uma fibra de SPME de 2 cm composta de divinilbenzeno/carboxeno/polidimetilsiloxano realiza a extração dos analitos da matriz aquosa com subsequente dessorção térmica em um GC-MS. As condições ótimas de extração foram obtidas com 125 mg de arroz, temperatura de extração de 80 °C por 40 min. O desempenho analítico foi satisfatório com coeficientes de correlação superiores a 0,9881 para todos os analitos, limites de detecção variando de 0,46 a 5,9 ng g-1, limites de quantificação de 1,53 a 19,7 ng g-1, recuperação relativa de 76 a 109%, precisão intra-dia (n=3) de 1,3 a 19%, e precisão inter-dia (n=9) de 3,5 a 6,5%. O método proposto representa uma alternativa verde promissora para a análise de alimentos sólidos utilizando SPME, uma vez que não faz uso de solventes orgânicos e o dano à fibra é reduzido pois o contato com a matriz é evitado com a utilização do disco rotativo contendo a amostra sólida.Abstract : In this study, a new method was developed to overcome certain limitations in the analysis of solid food samples. An experimental setup based on direct immersion solid-phase microextraction (DI-SPME) apparatus coupled to a rotating disk device was proposed for the determination of polar and slightly-polar pesticides including carbofuran, molinate, atrazine, simazine and tebuconazole in rice samples. In this innovative procedure, a small amount of rice sample is inserted into the cavity of the rotating disk device which is then immersed in an aqueous solution followed by high-speed agitation. Water was employed as a green solvent for leaching the analytes from the sample matrix. Simultaneously, a SPME comprised of divinylbenzene?50/30µm film thickness) was immersed in the aqueous solution to extract the polar/slightly polar analytes from the aqueous matrix with subsequent thermal desorption in the injector of a gas chromatograph-mass spectrometer (GC-MS) instrument. The optimal extraction conditions were obtained using an extraction temperature of 80 °C for 40 min, with 125 mg of rice inserted in the rotating disk. Using the previously optimized extraction conditions, the analytical performance was satisfactory with correlation coefficients higher than 0.9881 for all analytes, limits of detection (LOD) ranging from 0.46 to 5.9 ng g-1, limits of quantification (LOQ) from 1.53 to 19.7 ng g-1, relative recoveries from 76 to 109%, intra-day precision (n=3) from 1.3 to 19%, and inter- day precision (n=9) from 3.5 to 6.5%. The proposed method represents a promising alternative for the analysis of complex solid food samples using SPME, since the SPME fiber damage is substantially decreased when direct contact with the solid matrix is avoided

Correlation between DNA/HSA-interactions and antimalarial activity of acridine derivatives: Proposing a possible mechanism of action

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2019-02-04T12:52:10Z No. of bitstreams: 1 SILVA, M.M. Correlation between DNA-HSA...2018.pdf: 1799843 bytes, checksum: 61b5a53ca8fb1166e0656deb9687d441 (MD5)Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2019-02-04T13:08:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 SILVA, M.M. Correlation between DNA-HSA...2018.pdf: 1799843 bytes, checksum: 61b5a53ca8fb1166e0656deb9687d441 (MD5)Made available in DSpace on 2019-02-04T13:08:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SILVA, M.M. Correlation between DNA-HSA...2018.pdf: 1799843 bytes, checksum: 61b5a53ca8fb1166e0656deb9687d441 (MD5) Previous issue date: 2018Instituto de Química e Biotecnologia (UFAL), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), FAPEAL (Process number 60030 000863/2016), FAPESB, FAPESQ and FACEPE. This study was financed in part by the Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Finance Code 001.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Hospital São Rafael. Centro de Biotecnologia e Terapia Celular. Salvador, BA, Brasil.Universidade Estadual da Paraíba. Laboratório de Síntese e Vetorização de Moléculas. Departamento de Ciências Biológicas. João Pessoa, PB, Brasil.Universidade Estadual da Paraíba. Laboratório de Síntese e Vetorização de Moléculas. Departamento de Ciências Biológicas. João Pessoa, PB, Brasil.Universidade Estadual da Paraíba. Laboratório de Síntese e Vetorização de Moléculas. Departamento de Ciências Biológicas. João Pessoa, PB, Brasil.Universidade Federal de Pernambuco. Laboratório de Planejamento e Síntese de Fármacos. Departamento de Antibióticos. Recife, PE, Brasil.Universidade Estadual da Paraíba. Laboratório de Síntese e Vetorização de Moléculas. Departamento de Ciências Biológicas. João Pessoa, PB, Brasil.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil / Universidade Federal de Alagoas. Laboratório de Química Medicinal, Escola de Enfermagem e Farmácia. Macéio, AL, Brasil.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil / Universidade Federal de Alagoas. Laboratório de Química Medicinal, Escola de Enfermagem e Farmácia. Macéio, AL, Brasil.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil.Universidade Federal de Alagoas. Instituto de Química e Biotecnologia. Maceió, AL, Brasil.Acridines are considered an important class of compounds due to their wide variety of biological activities. In this work, we synthesized four acridine derivatives (1-4) and evaluated their biological activity against the Plasmodium falciparum W2 line, as well as studied the interaction with ctDNA and HSA using spectroscopic techniques and molecular docking. The acridine derivative 2 (IC50 = 0.90 ± 0.08 μM) was more effective against P. falciparum than primaquine (IC50 = 1.70 ± 0.10 μM) and similar to amsacrine (IC50 = 0.80 ± 0.10 μM). In the fluorescence and UV-vis assays, it was verified that the acridine derivatives interact with ctDNA and HSA leading to a non-fluorescent supramolecular complex formation. The non-covalent binding constants ranged from 2.09 to 7.76 × 103 M-1, indicating moderate interaction with ctDNA. Through experiments with KI, fluorescence contact energy transfer and competition assays were possible to characterize the main non-covalent binding mode of the acridines evaluated with ctDNA as intercalation. The binding constants obtained showed a high linear correlation with the IC50 values against the antimalarial activity, suggesting that DNA may be the main biological target of these molecules. Finally, HSA interaction studies were performed and all evaluated compounds bind to the site II of the protein. The less active compounds (1 and 3) presented the highest affinity to HSA, indicating that the interaction with carrier protein can affect the (bio)availability of these compounds to the biological target