Novel Molecular Insights into Stimulus-secretion Coupling in the Adrenal Medulla

The adrenal medulla is an important branch of the sympathetic nervous system. Chromaffin cells, which serve as the secretory units of the medulla, receive direct sympathetic innervation via the splanchnic nerves. Secretion from the medulla is primarily caused by two neurotransmitters, acetylcholine (ACh) and pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP), released from splanchnic nerve terminals. ACh-stimulated secretion is associated with basal sympathetic tone; on the other hand, secretion stimulated by PACAP is associated with heightened sympathetic tone and the fight-or-flight response. The overarching goal of this dissertation was to test the hypothesis that the different intracellular mechanisms activated by ACh and PACAP regulate chromaffin cell fusion characteristics. The experiments described in this thesis sought to further characterize the intracellular signaling pathways of PACAP stimulated secretion and the mechanisms underlying regulation of granule cell secretion in adrenomedullary chromaffin cells by the calcium sensing proteins, synaptotagmins. Specifically, these studies used TIRF microscopy and primary mouse chromaffin cells from transgenic mouse lines to determine differences in fusion characteristics and identify intracellular proteins involved in exocytosis. Fluorescent cargo proteins and calcium indicators were utilized to monitor dense core granule fusion and intracellular calcium levels after stimulation with endogenous secretagogues, ACh and PACAP. The synaptotagmins syt-1 and syt-7 are the two major calcium sensors for exocytosis in adrenal chromaffin cells and are important in triggering calcium mediated exocytosis in chromaffin cells. Though the importance of synaptotagmins in the adrenomedullary system is appreciated, there are questions remaining as to the localization and function in mediated discharge of dense core granule cargos in response to physiological stimulation. To assess the subcellular localization of synaptotagmins in chromaffin cells, we used immunocytochemistry and subcellular fractionation, which showed that syt-7 is distributed in organelles, including dense core granules. TIRF imaging demonstrated that syt-7 -/- cells stimulated by ACh had lower probability of release and rapid fusion kinetics compared to WT chromaffin cells. The use of a reconstituted system employing cell-derived granules expressing either syt-1 or syt-7 allowed us to observe kinetic properties and calcium sensitivities of the synaptotagmins. In these studies, syt-7 had a greater calcium sensitivity and slowed the rate at which cargos are released compared to syt-1. Altogether, this study demonstrated that the high calcium sensitivity of syt-7 and its effects on fusion pore expansion are necessary for chromaffin cells to secrete normally to cholinergic stimulation. Chapter III of this thesis centered on determining the intracellular signaling components of PACAP-stimulated secretion. It is known that PACAP elicits secretion from chromaffin cells by binding to PAC1 receptors and activating a Gαs-coupled signaling pathway. However, the specific role of proteins downstream of Gαs in causing exocytosis are not well understood. This study was undertaken to fill this gap in our understanding. Using a combination of genetic animal models and TIRF-based imaging of secretion, it is shown that cells lacking phospholipase C epsilon (PLCε) – a protein whose activity is stimulated by the small GTPase Rap – exhibit neither PACAP-stimulated increases in intracellular Ca2+ nor exocytosis. These data establish a novel role for PLCε in a signaling cascade that couples PAC1 receptor activation to chromaffin cell secretion. Overall, the work presented in this thesis suggests that the differing intracellular signaling mechanisms between ACh and PACAP stimulation regulate fusion characteristics from chromaffin cells. Additionally, that synaptotagmins endow granules with distinct fusion properties.PHDPharmacologyUniversity of Michigan, Horace H. Rackham School of Graduate Studieshttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/169961/1/alinamor_1.pd

Liderazgo y Satisfacción laboral de los trabajadores del centro educativo Nuestra señora de Fátima 20395, Quepepampa - Chancay, 2021

El propósito de la investigación fue analizar si el liderazgo incide en la satisfacción laboral de los trabajadores del centro educativo Nuestra Señora de Fátima 20395, Quepepampa-Chancay, 2021. Siguiendo los lineamientos metodológicos se utilizará una investigación de campo de carácter descriptiva de diseño no experimental, Para lograr dicho propósito se un cuestionario que será validado por el juicio de expertos y su confiabilidad será mediante el Alpha de Cronbach. Se con una población de 64 empleados y para el procesamiento se hará uso del programa de Excel, que permitirá organizar la información obtenida con datos numéricos y porcentuales. Se afirma que existe una relación, Rho de Spearman es 0,389 p=0,000Tesi

Nivel de satisfacción laboral del personal del Instituto de Gestión de Servicios de Salud, octubre 2016

La presente investigación titulada “Nivel de satisfacción laboral del personal del Instituto de Gestión de Servicios de Salud, octubre 2016”, tuvo como objetivo determinar el nivel de Satisfacción laboral del personal del Instituto de Gestión de Servicios de Salud. La investigación fue realizada con un enfoque cuantitativo, tipo básica, diseño no experimental, con corte transversal, descriptivo simple, utilizó una muestra no probabilística de 72 personas que trabajan en el Instituto de Gestión de Servicios de Salud, usó la técnica e instrumento como la encuesta y el cuestionario, contando el instrumento con el coeficiente de fiabilidad alta, para obtener información respecto al nivel de la satisfacción del personal. Los resultados de la investigación demuestran que el 50% del personal encuestado se encuentra insatisfecho, en la dimensión significación de la tarea el 58% de los encuestados manifiestan que el nivel es poco satisfactorio, en la dimensión condición del trabajo el 64% manifiesta que es poco satisfactorio, en la dimensión bonificación económica el 60% es poco satisfactorio y por último en cuanto al reconocimiento personal/social el 50% lo percibe poco satisfactorio, se concluye que la percepción del personal que labora en el Instituto de Gestión de Servicios de Salud, es insatisfactorio, pues consideran que la atención en la institución la atención no cubre las expectativas de los usuarios

GESTIÓN CULTURAL UNIVERSITARIA EN LAS UNIVERSIDADES: CENTRAL Y FLACSO, QUITO ECUADOR

El proceso de gestión cultural universitario exige de la preparación de gestores profesionales que permitan resolver la problemática en el contexto cultural y complejo con diversidades sociales, mediante el intercambio de ideas dentro y fuera de las aulas universitarias para enfrentar los cambios en el proceso sociocultural, en un contexto pluricultural. Según la indagación en las universidades Central y Flacso de Quito, Ecuador, existe un gran sesgo entre gestores culturales con modelos, planes y funciones para el desempeño personal y divulgación de la interactividad cultural del país. El objetivo de este artículo científico es exponer las regularidades de la gestión cultural universitaria y profesionalidad del gestor cultural y la indagación en dos universidades de Quito Central y Flacso, especialmente en la aclaración de lo que es cultura, gestión, y gestión cultural universitaria

Competitive RT-PCR Strategy for Quantitative Evaluation of the Expression of Tilapia (Oreochromis niloticus) Growth Hormone Receptor Type I

Quantization of gene expression requires that an accurate measurement of a specific transcript is made. In this paper, a quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) by competition for tilapia growth hormone receptor type I is designed and validated. This experimental procedure was used to determine the abundance of growth hormone receptor type I transcript in different tilapia tissues. The results obtained with this developed competitive RT-PCR were similar to real-time PCR results reported recently. This protocol provides a reliable alternative, but less expensive than real-time PCR to quantify specific genes

La práctica logopédica en los servicios comunitarios desde la formación docente

La Universidad Nacional de Educación (UNAE) asume el reto de contribuir con la formación de profesionales que se ocupen de la atención a los trastornos del lenguaje, habla, voz y de la comunicación en general en las instituciones educativas y especializadas en Ecuador. Para ello cuenta con el itinerario de Logopedia en la carrera de Educación Especial, la cual, forma educadores con competencias humanas y profesionales comprometidas con la atención a la diversidad siguiendo los preceptos y compromisos de la educación inclusiva. Este artículo tiene el propósito de reflexionar sobre algunas experiencias que evidencian la formación de tales competencias en el itinerario, sustentadas en el Modelo Pedagógico de la universidad. Se emplearon como métodos la investigación acción, la observación participante, el análisis de contenido, análisis del producto de la actividad, la encuesta y la entrevista abierta a los estudiantes del 7mo ciclo de la carrera.  Los resultados evidencian el tránsito de las inquietudes y angustias al desarrollo de las capacidades para la prevención, el diagnóstico y la intervención de los trastornos del habla por los estudiantes

Propuesta de titulación para programas de posgrados Facultad de Filosofía, Letras y Ciencias de la Educación

Los cambios que se operan en la educación superior actual, revisten de una importancia trascendental para el desarrollo del país, en tanto el posgrado forma parte de los avances que tienen lugar, titular a los maestrandos es un reto sobre todo si de mover el pensamiento se trata, las nuevas regulaciones permiten que ya no sea la típica tesis la que llene este espacio, sino que nuevas formas complementan este reto para muchos lleno de retos y sobre todo nervios, pues en solo media hora es necesario poner a prueba todo lo aprendido. Si de algo trata este artículo es precisamente dejar claro los artilugios que pueden formar parte del ejercicio de culminación de estudio de las maestrías que como parte de la superación de profesionales se han aprobado bajo este nuevo régimen académico en el Ecuador, se hace en este escrito un análisis de cómo llevar esta teoría a una verdad que puede ser concretada en los salones de cualquier universidad y porque no está vez en la ilustre Universidad de Guayaquil