Efecto antiinflamatorio de la Tomasa en ratones

53 p.Las enfermedades cardiovasculares constituyen un problema creciente de salud a nivel mundial. Es por esto que se busca instaurar estrategias de vida saludable, de manera de fomentar una dieta sana basada en el consumo de frutas y verduras, considerando para este estudio las propiedades del tomate y el residuo de su procesamiento, denominado Tomasa. Se plantea como objetivo del estudio, evaluar el efecto antiinflamatorio del consumo de Tomasa, en ratones alimentados con una dieta rica en grasa y suplementada con Tomasa. Determinando los niveles de IL-6, MCP-1 y TNF α a nivel plasmático y evaluando parámetros inflamatorios en cortes histológicos de intestino delgado. Las muestras utilizadas corresponden a plasma y tejidos de intestino delgado. Dichas muestras fueron extraídas de ratones C57BL/6 alimentados con una dieta normal, ratones alimentados con una dieta hipergrasa y ratones con una dieta hipergrasa suplementada con Tomasa. Se emplea técnica de ELISA como método de estudio de la cuantificación de IL-6, MCP-1 y TNF α en plasma y Tinción de Hematoxilina-eosina para cortes histológicos de tejido intestinal de ratones. Se observó que la Tomasa posee algún grado de actividad antiinflamatoria, obteniéndose disminución en las citoquinas proinflamatorias medidas a nivel plasmático, en el grupo de animales alimentados con una dieta suplementada con Tomasa en relación al grupo de ratones alimentados con dieta rica en grasa

Actividad anti-caquexica del masoprocol en modelo hepatoma ascitico yoshida ah-130.

96 p.El síndrome de Caquexia-Cancerosa es un estado complejo, principalmente por que existe un alto desequilibrio metabólico en el huésped, en el cual se destaca una aumentada lipólisis y por lo tanto una importante movilización de lípidos, lo que lleva a una marcada alteración del metabolismo y por consecuente una progresiva y rápida perdida de peso con una significativa morbilidad y mortalidad en pacientes con cáncer. En el proceso de lipolítico, destaca una enzima altamente lipolítica denominada Lipasa Sensible a Hormona (HSL), esta enzima, como su nombre lo indica, se encuentra regulada por hormonas que estimulan la fosforilación o desfosforilación de la enzima, provocando su activación o inactivación respectivamente. En estudios anteriores se logró determinar un inhibidor no hormonal de la fosforilación de la HSL, el Acido Nordihidroguaiaretico (NDGA) o comercialmente llamado Masoprocol, el que además de disminuir la actividad de la HSL se le atribuye una posible actividad Anti-Cancerígena. (Lindvall, H, et al., 2004) En este trabajo se administro Masoprocol (80mg/kg) a ratas Wistar – Macho, inoculadas con células del Hepatoma Ascitico (Yoshida AH – 130), un modelo altamente Caquéctico. Los resultados fueron favorables, debido a que se logro disminuir la lipólisis, demostrado por los niveles de Ácidos Grasos y Glicerol, producto de degradación lipolitica. Además se disminuyó la perdida del tejido graso con valores estadísticamente significativos (p < 0,01.) respecto al grupo Tumor. Finalmente se pudo observar que el Masoprocol provoco una disminución estadísticamente significativa (p < 0,05) del numero de células cancerígenas respecto al grupo Tumor. Por lo tanto se podría decir que el Masoprocol posee un rol Anti- Cancerígeno al disminuir la población celular tumoral

IL-6 una citoquina proinflamatorio como marcador de riesgo de cáncer de próstata

50 p.El cáncer de próstata (CaP) constituye la tercera causa de muerte por cáncer en hombres en Chile, y es reconocido como una prioridad de salud pública para el país. El carcinoma de próstata es un tumor que se presenta generalmente en hombres mayores de 50 años y que a nivel mundial ha ido adquiriendo progresivamente mayor importancia como problema de salud pública, tanto por el aumento de su importancia como causa de muerte, como por el aumento de su incidencia. En condiciones normales los niveles séricos de citoquinas proinflamatorias suelen ser estables, aunque, son parámetros muy sensibles y que se alteran por cualquier proceso inflamatorio, y no necesariamente por el CaP. Sin embargo, hay estudios que relacionan los altos niveles de estas citoquinas proinflamatorias con el CaP, pero de forma no muy significativa. La prevalencia del CaP ha aumenta significativamente en los últimos años, y esto se debe principalmente por el aumento de los factores de riesgo en la población, siendo el principal la edad y el IMC, respecto a este último, es que se profundiza en este trabajo donde se midieron citoquinas proinflamatorias séricas en pacientes controles y con factores de riesgo como el IMC, PSA, Leptinas y otras. Se encontró correlación entre IL-6 y TNF-α, respecto a los pacientes con factores de riesgo, donde aumentaban estas citoquinas, conforme el IMC, por lo tanto se puede afirmar que hay una relación entre ambos. En este contexto, es de suma importancia tomar en cuenta estos datos y adoptar medidas para disminuir los factores de riesgo como el IMC y evitar así tener mayor prevalencia de padecer CaP

Puesta a punto de un metodo de western blot para proteinas plaquetarias

78 p.Este trabajo experimental trata de la estandarización de un método de western blot para el estudio de proteínas involucradas en la señalización plaquetaria como lo son la p38 MAPK (Proteína Kinasa Activada por Mitógenos) y la Glicoproteína IIb/IIIa (GP IIb/IIIa), las cuales pueden estar involucradas tanto en la hemostasia como en los procesos patológicos que implican la activación y agregación plaquetaria. Los objetivos específicos de este estudio plantean la estandarización de un protocolo adecuado de lavado de plaquetas que permita tener un rendimiento adecuado y plaquetas en estado de reposo, la identificación de la proteína p38 fosforilada en lisados plaquetarios totales como en sus fracciones de membrana y citosol, además de comparar los niveles de activación de la p38 fosforilada frente a distintos agonistas con plaquetas sin activación o en reposo. Y finalmente identificar la Glicoproteína IIIa del compejo IIb/IIIa en lisados plaquetarios totales. La metodología utilizada para el estudio de proteínas plaquetarias tiene como paso inicial la separación de proteínas mediante electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones denaturantes y su posterior transferencia a una membrana de fluoruro de polivinilideno, la detección de las proteínas fue realizada en lisados plaquetarios a través de anticuerpos específicos y mediante un sistema de revelado que involucra la adición de un sustrato para fosfatasa alcalina observándose una reacción positiva como bandas de coloración azul o violeta en la membrana

Anticuerpos antifosfolipido-proteinas: prevalencia en pacientes portadores de insuficiencia renal crónica en hemodialisis.

60 p.Los Anticuerpos Antifosfolípido-Proteínas (aFL-P) son un grupo heterogéneo de anticuerpos que se asocian a trombosis, trombocitopenia y abortos espontáneos a repetición. Los pacientes portadores de Insuficiencia Renal Crónica (IRCr) en hemodiálisis (HD), presentan trombosis de la fístula arteriovenosa y cierto grado de trombocitopenia. El mecanismo de estos fenómenos en los pacientes en HD no esta suficientemente dilucidado, razón por la cual en esta tesis se estudio, en un gran numero de pacientes, la eventual participación de los aFL-P. El estudio comprendió 208 pacientes portadores de IRCr en HD de tres Clínicas de hemodiálisis de la Región del Maule, Hospital Regional de Talca y Hospital Clínico de la P. Universidad Católica de Chile. Se incluyo un grupo control normal conformado por donantes de sangre del Hospital Regional de Talca (n: 110) y un grupo control de portadores de IRCr no hemodialisados (n: 28). Se realizaron ensayos para pesquisar Anticuerpos Anticardiolipina (aCL) y Antifosfatidilserina (aFS) (IgG, -M, -A) por ELISA en fase sólida, y para pesquisar actividad Anticoagulante Lúpico (AL) por pruebas de coagulación (dTTI y KCT). Cuarenta y tres de los 208 pacientes presentaron una o mas pruebas positivas. El isotipo mas frecuentemente encontrado para aCL fue 1gG, en cambio para aFS los isotipos mas frecuentes fueron IgM y IgA. Solo se encontraron mezclas de isotipos en aFS. Diez pacientes presentaron tanto aCL como aFS. No se observo actividad AL en ninguno de los pacientes. No se encontró asociación de los aFL-P con trombosis de la FAV ni con trombocitopenia. Por otra parte, no se encontró mayor frecuencia de aFL-P en pacientes diabéticos. Además no se observo asociación significativa entre la presencia de aFL-P y el tiempo en diálisis. Los resultados nos permiten concluir que la prevalencia de aFL-P en pacientes portadores de IRCr en HD file 20.6 % y que no existe asociación entre la presencia de aFL-P y trombosis de la FAV ni con trombocitopenia. Sin embargo, se requiere estudios prospectivos muy bien controlados clínicamente para confirmar estos hallazgos

Efecto protector de la piel de manzana en aterotrombosis de ratones apoe knock out

84 p.El estudio de las enfermedades cardiovasculares en modelos animales, permite investigar de manera acabada los procesos involucrados en la patología cardiovascular. Si bien se dispone de variados modelos animales, el ratón apoE knock out resulta un modelo útil para el estudio de la aterotrombosis, debido a que este tipo de animales carece del gen que codifica para la apolipoproteína E, provocando un aumento de colesterol a nivel sérico. En el estudio que se realiza, se pretende evidenciar el efecto que provoca el consumo de una dieta grasa y de una dieta grasa suplementada con piel de manzana en ratones apoE knock out. Se analizarán las diferencias entre estos grupos a nivel sérico mediante parámetros que evidencian el metabolismo glucídico y lipídico; y a nivel tisular utilizando técnicas de tinción histoquímica e inmunohistoquimica. Estas permitirán evaluar la lesión de manera general y con la tinción inmunohistoquímica detectar la presencia del antígeno plaquetario (CD61) en la lesión ateromatosa

Estudio "in vitro" de la actividad antiangregante plaquetaria, de fracciones de extractos metanólicos de porotos, obtenidas por fraccionamiento líquido- líquido

55 p.Es reconocido que las enfermedades cardiovasculares (ECV), son la principal causa de mortalidad en el mundo. Existen evidencias epidemiológicas que indican que una dieta rica en frutas y hortalizas disminuye el riesgo de ECV. Al respecto, está bien documentado el efecto antioxidante de las frutas y hortalizas; sin embargo, su efecto antitrombótico es poco conocido. En este contexto, esta memoria tiene como objetivo determinar la actividad antiagregante de extractos metanólicos de distintos tipos de porotos y fracciones liquido-liquido de los mismos. Para ello se obtuvo extractos metanólicos de porotos verdes y de guarda; luego fueron fraccionados y posteriormente se evaluó su eventual actividad antiagregante plaquetaria. También se evaluó el efecto de la temperatura y el pH en la agregación plaquetaria producida por los extractos de porotos verdes y guarda. Se obtuvo inhibición de la agregación plaquetaria estadísticamente significativa en los extractos de porotos verdes y de guarda, usando como agonista ADP y Ácido Araquidonico. En el caso de las fracciones de porotos verdes, exceptuando la fracción cloroformo, la inhibición de la agregación plaquetaria fue, usando ADP y Acido Araquidónico, en todas las demás fracciones Todas las fracciones de porotos de guarda produjeron inhibición de la agregación plaquetaria significativa, ya sea con ADP o Ácido Araquidónico. Distintas temperaturas y pHs no afectaron la actividad antitrombótica que presentaban los extractos de porotos verdes y guarda. En conclusión se puede decir que los porotos, ya sea de guarda o verde, tienen actividad antiagregante plaquetaria in vitro, usando como agonista ADP y Ácido Araquidónico. La o las moléculas bioactivas son de naturaleza lípidica o carbohidrato debido a su estabilidad a distintas temperaturas y pHs. Son necesarios estudios posteriores, con el fin de identificar el compuesto bioactivo, que según los resultados podría encontrarse en mayor concentración en la fracción tolueno, como también descartar la interferencia de este solvente en la fracción obtenida

Estudio de la actividad antiagregante plaquetaria de fracciones de extractos metanolicos de porotos verdes, granados y de guarda obtenidas por cromatografia de exclusion molecular

56 p.Las enfermedades cardiovasculares (ECV) representan alrededor del 30% de las muertes en el mundo, situación similar a la de nuestro país. Dentro de los factores de riesgo cardiovasculares se encuentran el sedentarismo y los malos hábitos alimentarios de la población. La prevención de las ECV apunta a los factores de riesgo modificables como la dieta, aspecto central en la prevención de las ECV. La Dieta Mediterránea es un concepto que nace alrededor del año 1935 y debe su nombre a que en países que se encuentran alrededor del mar Mediterráneo como son los del sur de Europa, la tasa de mortalidad por ECV estaba muy por debajo del resto de los países de dicho continente. Ésta evidencia es lo que hace interesante el estudio de aquellos alimentos que forman parte de esta dieta entre otros, frutas y hortalizas. Existe evidencia y está demostrado el efecto antioxidante de las frutas y hortalizas, sin embargo su efecto antiagregante plaquetaria, anticoagulante y fibrinolítica es poco conocido. En estudios anteriores realizados en el Laboratorio de Hemostasia y Trombosis de la Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad de Talca, se ha observado que algunas frutas y hortalizas consumidas en la zona centro sur de Chile poseen efecto antiagregante plaquetario in vitro. Una de las hortalizas que presentó mayor efecto antiagregante y anticoagulante plaquetario a nivel de extracto metanólico fue el frejol (poroto) verde y granado. El propósito de esta memoria fue semicaracterizar los extractos metanólicos de poroto verde, poroto granado y poroto de guarda, fraccionando para ello los extractos por cromatografía de exclusión molecular y posteriormente probar su actividad antiagregante plaquetaria con diferentes agonistas. Los resultados obtenidos muestran una significativa actividad antiagregante de los extractos metanólicos totales de porotos verdes, granados y de guarda inducida por ADP. En el caso de la agregación inducida por ácido araquidónico, se obtuvieron resultados significativos para los extractos y fracciones de porotos granados y una gran actividad inhibitoria de la agregación plaquetaria del extracto metanólico total de porotos granados, el cual mostró la mayor actividad antiagregante de todos los extractos estudiado

Validacion de un metodo para el estudio de sindrome metabolico en ratones CF-1

120 p.En esta investigación se probó dos tipos de dietas altas en grasas (42% y 25% respectivamente) durante un periodo de 40 días para inducir Síndrome Metabólico en Ratas Wistar y ratones CF-1. Los parámetros medidos para tales efectos correspondieron al peso de el alimento y agua ingerida, peso de los animales, extracción y peso de algunos órganos (tejido adiposo, soleus, gastrocnemius, hígado, corazón), perfil bioquímico de las ratas y ratones (Glicemia, BUN, Urea, Ácido úrico, Triglicéridos, Colesterol, Proteínas totales y Albúmina), medición del porcentaje de grasa en el hígado y realización de cortes histológicos de corazón y arterias de ratas. Los resultados obtenidos en el perfil bioquímico de ratas Wistar sometidas a dieta grasa mostraron alteraciones en el metabolismo proteico estadísticamente significativas (evidenciado en la disminución de BUN, Ácido úrico y Proteínas Totales) debido a que el porcentaje de proteínas presentes en la dieta se encontraba disminuido (12,74%) lo que condujo a las ratas a pérdida de masa muscular (en gastrocnemius y corazón) para compensar este déficit. Los cortes histológicos evidenciaron infiltración grasa a nivel arterial y cardíaco, debido al alto consumo de grasa. Un alto porcentaje de grasa fue encontrado también a nivel hepático, debido a la misma causa. Los resultados obtenidos en el perfil bioquímico de ratones CF-1 sometidas a dieta grasa pero balanceada en proteínas (16,9%), mostraron alteraciones estadísticamente significativas en los indicadores de Síndrome Metabólico (evidenciado en el aumento de Glicemia, Colesterol, Triglicéridos), así como un aumento estadísticamente significativo en el peso y en la cantidad de tejido adiposo. No hubo diferencias estadísticas en pérdida de masa muscular en los ratones sometidos a dieta grasa debido al balance proteico obtenido en la dieta. Un alto porcentaje de grasa fue encontrado también a nivel hepático. Los resultados obtenidos en la segunda experiencia, resultan interesantes para el desarrollo de un método para el estudio de Síndrome metabólico en ratones CF-1 inducido por el consumo de dieta alta en grasa

Estudio de la actividad antiagregante de una quinolina en ratas

65 p.Las enfermedades cardiovasculares en las que se incluye infarto agudo al miocardio, enfermedad cerebro vascular y trombosis arterial periférica son un problema de salud pública en la sociedad actual. Según la Organización Mundial de la Salud, son la principal causa de morbi-mortalidad en el mundo. En la trombosis proceso clave en las enfermedades cardiovasculares, las plaquetas juegan un rol fundamental en su fisiopatología, ya que una vez activadas se agregan y favorecen la coagulación (expresan factor tisular y fosfolípidos aniónicos) y por otra parte, se ha observado que favorecen el fenómeno inflamatorio de la aterosclerosis. Lo anterior explica el uso de antiagregantes en prevención primaria y secundaria de eventos cardiovasculares. A pesar de los grandes beneficios que presenta el uso de antiagregantes en la prevención de eventos trombóticos, se han descritos efectos adversos y resistencia al efecto de estos fármacos. Ello justifica la búsqueda de nuevos antiagregantes plaquetarios. Estudios preliminares en el laboratorio del Dr. Iván Palomo, mostraron efecto antiagregante in vitro de algunas moléculas sintetizadas en el laboratorio del Dr. Astudillo (Instituto de Química y Recursos Naturales, de la Universidad de Talca) perteneciente a la familia de las Quinolinas. En este estudio se evaluará el efecto antiagregante de una de estas quinolinas in vivo en un modelo de ratas wistar. Los animales serán tratados con este compuesto, posteriormente al tiempo de experimentación, estos serán sacrificados y su sangre recolectada. Se separaran las plaquetas para realizar estudios de agregación. Con las muestras de plasma se realizarán pruebas Bioquímicas que van a permitir evaluar el efecto del tratamiento con quinolinas en distintos parámetros bioquímicos y también se llevará a cabo la cuantificación de Fibrinógeno para evaluar la vía de la coagulación