Mcl-1 Is a Key Regulator of Apoptosis Resistance in Chlamydia trachomatis-Infected Cells

Chlamydia are obligate intracellular bacteria that cause variety of human diseases. Host cells infected with Chlamydia are protected against many different apoptotic stimuli. The induction of apoptosis resistance is thought to be an important immune escape mechanism allowing Chlamydia to replicate inside the host cell. Infection with C. trachomatis activates the Raf/MEK/ERK pathway and the PI3K/AKT pathway. Here we show that inhibition of these two pathways by chemical inhibitors sensitized C. trachomatis infected cells to granzyme B-mediated cell death. Infection leads to the Raf/MEK/ERK-mediated up-regulation and PI3K-dependent stabilization of the anti-apoptotic Bcl-2 family member Mcl-1. Consistently, interfering with Mcl-1 up-regulation sensitized infected cells for apoptosis induced via the TNF receptor, DNA damage, granzyme B and stress. Our data suggest that Mcl-1 up-regulation is primarily required to maintain apoptosis resistance in C. trachomatis-infected cells

IAP-IAP Complexes Required for Apoptosis Resistance of C. trachomatis–Infected Cells

Host cells infected with obligate intracellular bacteria Chlamydia trachomatis are profoundly resistant to diverse apoptotic stimuli. The molecular mechanisms underlying the block in apoptotic signaling of infected cells is not well understood. Here we investigated the molecular mechanism by which apoptosis induced via the tumor necrosis factor (TNF) receptor is prevented in infected epithelial cells. Infection with C. trachomatis leads to the up-regulation of cellular inhibitor of apoptosis (cIAP)-2, and interfering with cIAP-2 up-regulation sensitized infected cells for TNF-induced apoptosis. Interestingly, besides cIAP-2, cIAP-1 and X-linked IAP, although not differentially regulated by infection, are required to maintain apoptosis resistance in infected cells. We detected that IAPs are constitutively organized in heteromeric complexes and small interfering RNA–mediated silencing of one of these IAPs affects the stability of another IAP. In particular, the stability of cIAP-2 is modulated by the presence of X-linked IAP and their interaction is stabilized in infected cells. Our observations suggest that IAPs are functional and stable as heteromers, a thus far undiscovered mechanism of IAP regulation and its role in modulation of apoptosis

PloS one

AIMS: Portal hypertension characterized by generalized vasodilatation with endothelial dysfunction affecting nitric oxide (NO) and endothelium-dependent hyperpolarization (EDH) has been suggested to involve bacterial translocation and/or the angiotensin system. The possibility that ingestion of probiotics prevents endothelial dysfunction in rats following common bile duct ligation (CBDL) was evaluated. METHODS: Rats received either control drinking water or the probiotic VSL#3 solution (50 billion bacteria.kg body wt(-)(1).day(-)(1)) for 7 weeks. After 3 weeks, rats underwent surgery with either resection of the common bile duct or sham surgery. The reactivity of mesenteric artery rings was assessed in organ chambers, expression of proteins by immunofluorescence and Western blot analysis, oxidative stress using dihydroethidium, and plasma pro-inflammatory cytokine levels by flow cytometry. RESULTS: Both NO- and EDH-mediated relaxations to acetylcholine were reduced in the CBDL group compared to the sham group, and associated with a reduced expression of Cx37, Cx40, Cx43, IKCa and SKCa and an increased expression of endothelial NO synthase (eNOS). In aortic sections, increased expression of NADPH oxidase subunits, angiotensin converting enzyme, AT1 receptors and angiotensin II, and formation of ROS and peroxynitrite were observed. VSL#3 prevented the deleterious effect of CBDL on EDH-mediated relaxations, vascular expression of connexins, IKCa, SKCa and eNOS, oxidative stress, and the angiotensin system. VSL#3 prevented the CBDL-induced increased plasma TNF-alpha, IL-1alpha and MCP-1 levels. CONCLUSIONS: These findings indicate that VSL#3 ingestion prevents endothelial dysfunction in the mesenteric artery of CBDL rats, and this effect is associated with an improved vascular oxidative stress most likely by reducing bacterial translocation and the local angiotensin system

Robust estimation of bacterial cell count from optical density

Optical density (OD) is widely used to estimate the density of cells in liquid culture, but cannot be compared between instruments without a standardized calibration protocol and is challenging to relate to actual cell count. We address this with an interlaboratory study comparing three simple, low-cost, and highly accessible OD calibration protocols across 244 laboratories, applied to eight strains of constitutive GFP-expressing E. coli. Based on our results, we recommend calibrating OD to estimated cell count using serial dilution of silica microspheres, which produces highly precise calibration (95.5% of residuals <1.2-fold), is easily assessed for quality control, also assesses instrument effective linear range, and can be combined with fluorescence calibration to obtain units of Molecules of Equivalent Fluorescein (MEFL) per cell, allowing direct comparison and data fusion with flow cytometry measurements: in our study, fluorescence per cell measurements showed only a 1.07-fold mean difference between plate reader and flow cytometry data

Hémodynamique pulmonaire lors de l'exercice en créneaux chez la sujet sain et le patient atteint de bronchopneumopathie chronique obstructive

Les patients porteurs de broncho-pneumopathie chronique obstructive (BPCO) constituent un enjeu majeur en terme de santé publique, tant par le nombre élevé de personnes concernées que par la gravité potentielle de leur atteinte respiratoire. Ainsi, les conséquences économiques, sociales et professionnelles du handicap engendré par l'insuffisance ventilatoire reflètent largement l'importance de sa prise en charge.Parmi les moyens mis en œuvre pour la prise en charge de cette pathologie, le réentraînement à l'effort en représente une des pierres angulaires. Il permet de manière générale de réduire la dyspnée d'effort induite par la maladie primaire et pérennisée par le déconditionnement qui s'en suit (maladie secondaire) : pour une même charge de travail, après réentraînement, l'effort sera moins coûteux sur le plan ventilatoire mais aussi cardiaque. Il est maintenant communément admis qu'un entraînement comprenant 3 séances par semaine à raison de 30 minutes par séance et pendant 6 semaines est nécessaire pour obtenir des résultats favorables. Il est également admis qu'une intensité élevée de travail pendant les séances d'entraînement apporte un bénéfice plus important qu'une intensité modérée. Par ailleurs, un réentraînement comprenant des efforts de type intermittent est souvent mieux toléré qu'un exercice continu. Le type d'exercice utilisé dans notre étude est un exercice intermittent de 30 minutes, alternant des périodes de travail à une charge correspondant au seuil ventilatoire 1 (4 minutes de "base") et une minute de travail à une charge correspondant à 90% de la puissance maximale tolérée par le sujet. Il s'agit donc d'un effort adapté aux possibilités individuelles des sujets. Ceci permet de soutenir l'effort pendant 30 minutes tout en atteignant, en fin d'effort, la fréquence cardiaque maximale obtenue lors d'une épreuve d'effort à charges croissantes, maximale.[...]STRASBOURG-Sc. et Techniques (674822102) / SudocSudocFranceF

Mesure du débit cardiaque à l'exercice chez des patients porteurs d'une bronchopneumopathie chronique obstructive (BPCO) (impédancemetrie vs méthode directe de Fick)

La réhabilitation respiratoire des patients atteints de bronchopneumopathie chronique obstructive (BPCO) inclut des programmes de réentraînement à l effort (REE). Parmi les différents programmes existants, le programme d entraînement personnalisé en créneaux (PEP C), utilisé dans notre laboratoire et qui est un effort intermittent intense, a montré son efficacité sur l amélioration de la capacité physique des sujets, dans différentes pathologies. Chez les patients BPCO, il est important de suivre l hémodynamique pulmonaire et le débit cardiaque au cours au cours des efforts intenses. Nous avons donc mesuré la pression artérielle pulmonaire (PAP) et le débit cardiaque ( mesuré à la fois par le principe de Fick appliqué à l oxygène et par impédancemétrie) chez 8 patients BPCO. Nous avons montré que la PAP augmentait plus lors d un tel effort que chez les sujets sains mais sans dérive inacceptable au cours des 30 minutes de PEP C. Nous avons également observé que le mesuré par le principe de Fick était stable après la 6ème minute d effort jusqu à la 30ème minute. Néanmoins, il n est pas possible d utiliser en routine une méthode invasive (principe de Fick) pour la mesure du . C est pourquoi nous avons comparé mesuré par le principe de Fick à mesuré par impédancemétrie (Physio Flow, Manatec Biomedical, Macheren, France). Nos résultats montrent que les valeurs de mesurées par impédancemétrie sont plus élevées que mesuré par la méthode de Fick, ceci dû surtout à un volume d éjection systolique plus élevé, sans différence notable de la fréquence cardiaque. Par ailleurs l adéquation entre les méthodes n est pas bonne dans notre série, puisque pour beaucoup de mesures, la différence entre les deux méthodes était de plus de 20%. L impédancemétrie cardiaque ne permet donc pas de suivre l hémodynamique chez ces patients obstructifs et distendus au cours d un effort intense.STRASBOURG-B.N.U.S. (674821001) / SudocSudocFranceF

Effluents d’abattoir et risque d’émergence

International audienceLes maladies émergentes, causes de crises sanitaires potentiellement dévastatrices, représentent un enjeu majeur pour la santé végétale, animale et humaine. Difficiles à anticiper en raison de leur caractère nouveau et imprévisible, elles suscitent une réflexion pluridisciplinaire et une analyse spécifique. L'originalité de cet ouvrage est d'appliquer des concepts d'épidémiologie générale à l'émergence de maladies dans les domaines du végétal, de l'animal et de l'humain. La première partie de l'ouvrage présente les facettes de l'émergence dans ces trois domaines. A partir d'études de cas concrets et de synthèses, les parties suivantes traitent de la détection et de l'analyse biologiques des émergences, de leur traitement statistique et de leur modélisation, des facteurs environnementaux qui les déterminent, et du franchissement de la barrière d'espèces par les virus. La dernière partie de l'ouvrage fait le point sur les politiques nationales et internationales de santé face à ces maladies. Destiné aux étudiants, aux professionnels et aux chercheurs intéressés par une vision globale des maladies émergentes, l'ouvrage s'adresse également à tout public concerné par les problématiques actuelles et futures en santé végétale, animale et humaine

Characterization of Shiga Toxin Gene (stx)-Positive and Intimin Gene (eae)-Positive Escherichia coli Isolates from Wastewater of Slaughterhouses in France

Wastewater samples from 12 slaughterhouses located in different regions in France were tested for the presence of stx-positive and eae-positive Escherichia coli isolates, and characteristics of the isolates obtained were determined. A total of 224 wastewater samples were collected in wastewater treatment plants at different stages of wastewater processing. Altogether, 5,001 E. coli isolates were obtained by colony counting and screened for the presence of stx and eae genes by multiplex PCR. stx-positive and eae-positive E. coli isolates were detected in 25% of the samples collected; they were found in 13% and 3% of the samples obtained from treated effluent and sludge, respectively, suggesting that they could be spread into the environment. Screening of the samples collected by immunomagnetic separation allowed us to isolate 31 additional E. coli serogroup O157 isolates. Four of these isolates harbored stx and eae genes. All stx-positive and eae-positive E. coli isolates were analyzed for eae and stx genetic variants, as well as for additional virulence factors and serotypes. Our results suggest that the majority of the stx- and eae-positive E. coli isolates from wastewater have low virulence for humans. However, the diversity of the enterohemorrhagic E. coli-associated virulence factors in the strains indicates that the environment may play an important role in the emergence of new pathogenic enterohemorrhagic E. coli strains

Intérêt d'une activité physique en piscine chez l'asthmatique

Revue générale. Natation et réentraînement à l'effort des sujets asthmatiques. Effets de l'immersion, asthme et exercice physique, asthme et immersion. Effets protecteurs de la natation en cas d'asthme d'effort