Estudos in vitro usando um sistema de transporte de DNA plasmídico (pDNA) com afinidade pela mitocôndria

A mitocôndria é um organelo celular que possui o seu próprio genoma, o ADN mitocondrial (ADNmt). Apesar de bastante pequeno quando comparado com o ADN nuclear (ADNn), mutações ao nível do ADNmt são bastante frequentes devido à falta de mecanismos de proteção e de reparação, provocando disfunções no mecanismo de fosforilação oxidativa, o que afeta essencialmente órgãos e tecidos com grande demanda de energia, como é o caso dos músculos e do cérebro. Dado que os métodos convencionais de tratamento destas desordens mitocondriais se têm revelado ineficazes, torna-se crucial o desenvolvimento de protocolos terapêuticos inovadores e eficientes, dos quais se destaca a terapia génica mitocondrial (TGM). Com este projeto tentamos desenvolver um novo sistema capaz de entregar de forma eficaz o ADN plasmídico (ADNp) à mitocôndria para uma possível utilização em TGM. Assim, o presente trabalho pode ser dividido em duas partes principais: uma primeira parte que inclui a síntese e caracterização de nanosistemas à base de ADNp e do polímero polietilenimina (PEI), e incorporação de compostos mitocondriotrópicos capazes de direcionar os sistemas para a mitocôndria; e uma segunda parte que integra estudos in vitro para testar a capacidade de transfeção celular das nanopartículas e a sua afinidade de direcionamento para a mitocôndria. Os sistemas em estudo demonstraram ser biocompatíveis, com eficiências de encapsulação de ADNp elevadas, apresentam forma esférica ou oval com tamanhos inferiores a 300 nm e possuem potenciais zeta positivos, o que os torna adequados para uso em protocolos de TGM. Os sistemas foram internalizados nas células e direcionados para a mitocôndria com sucesso. Estes resultados demonstram que a síntese de novos vetores com afinidade mitocondrial pode constituir um grande avanço na correção de defeitos mitocondriais, oferecendo uma nova estratégia terapêutica no combate a diversas patologias como o cancro e doenças neuromusculares e neurodegenerativas.Mitochondrion is a cellular organelle that has its own genome, mitochondrial DNA. Although quite small compared to nuclear DNA, mutations in mitochondrial DNA are quite frequent due to the lack of protection and repair mechanisms, causing dysfunctions in the mechanism of oxidative phosphorylation, which essentially affects organs and tissues with large energy demand, as is the case of muscles and brain. Since conventional methods of treatment of these mitochondrial disorders have proved to be ineffective, the development of innovative and efficient therapeutic protocols, of which mitochondrial gene therapy (TGM) stands out, is crucial. With this project we tried to develop a new system capable of efficiently deliver plasmid DNA to mitochondria for possible use in TGM. Thus, the present work can be divided into two main parts: a first part that includes the synthesis and characterization of nanosystems based on plasmid DNA and polyethyleneimine polymer, and incorporation of mitochondriotropic compounds capable of directing the systems to mitochondria; and a second part which integrates in vitro studies to test the cellular transfection capacity of the nanoparticles and their mitochondria targeting affinity. The systems under study have been shown to be biocompatible, with high encapsulation efficiencies of plasmid DNA, presenting spherical or oval shape with sizes smaller than 300 nm and positive zeta potentials, which make them suitable to be used in TGM protocols. The systems were cell internalized and targeted to the mitochondria with success. These results demonstrate that the synthesis of new vectors with mitochondrial affinity may constitute a major advance in the correction of mitochondrial defects, offering a new therapeutic strategy in the fight against several pathologies such as cancer and neuromuscular and neurodegenerative diseases

Violência entre pares na adolescência: Um estudo com estudantes no início e no final do 3.º ciclo do ensino básico

Resumo: Este estudo propõe-se caraterizar comportamentos de violência entre pares, em função do nível de escolaridade, género e variáveis socioafetivas. Os participantes incluem uma amostra de 80 estudantes do 3.º ciclo do ensino básico (7.º – 9.º anos), avaliados com o QEVE, em dois momentos (7.º e 9.º anos). Os resultados demonstram que: i) as condutas de vitimação e agressão mais frequentes são a exclusão social e a agressão verbal; ii) a taxa de vitimação diminui do 7.º para o 9.º ano, enquanto a taxa de agressão mantém-se estável; iii) os rapazes encontram-se mais envolvidos em situações de bullying físico do que as raparigas; iv) o sentimento face à escola (i.e., gostar da escola) e a perceção de ter amigos revelam-se aspetos protetores especialmente importantes das condutas de vitimação e agressão entre os alunos do nível de escolaridade mais baixo. Estes resultados sugerem uma intervenção educativa diferenciada e orientada para a literacia socioemocional, destacando o papel dos pares na prevenção da violência escolar

Italian Influence in a Portuguese Mannerist Painting (Part I): A New Palette with Original Orange and Green Pigments

The palette used by the Portuguese painter Pedro Nunes (1586–1637) in the large panel depicting The Descent from the Cross (460 × 304 cm) painted in 1620 for Évora’s cathedral was investigated with a combination of the visual inspection of the paint surface and the analysis of the paint layers with microscopic, spectroscopic, and chromatographic techniques. Green earth and an orange artificial arsenic sulphide, two pigments identified for the first time in Portuguese paintings of the sixteenth and seventeenth centuries, were found to be abundantly used in large areas of the composition. The results further reveal the choice of a rich palette also containing lead-white, lead-tin yellow, ochre, vermilion, verdigris, smalt, azurite, vegetable carbon black, and a red lake made of brazilwood and cochineal. All the pigments were bound in an oil-based medium. The introduction of two pigments new to the Portuguese conventional palette is a direct consequence of the painter’s training in Rome in the first decade of the seventeenth century.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Italian Influence in a Portuguese Mannerist Painting (Part I): A New Palette with Original Orange and Green Pigments

The palette used by the Portuguese painter Pedro Nunes (1586–1637) in the large panel depicting The Descent from the Cross (460 × 304 cm) painted in 1620 for Évora’s cathedral was investigated with a combination of the visual inspection of the paint surface and the analysis of the paint layers with microscopic, spectroscopic, and chromatographic techniques. Green earth and an orange artificial arsenic sulphide, two pigments identified for the first time in Portuguese paintings of the sixteenth and seventeenth centuries, were found to be abundantly used in large areas of the composition. The results further reveal the choice of a rich palette also containing lead-white, lead-tin yellow, ochre, vermilion, verdigris, smalt, azurite, vegetable carbon black, and a red lake made of brazilwood and cochineal. All the pigments were bound in an oil-based medium. The introduction of two pigments new to the Portuguese conventional palette is a direct consequence of the painter’s training in Rome in the first decade of the seventeenth century