Mecanismo de muerte celular inducida por el inhibidor de Btk Ibrutinib en células de mieloma múltiple

En las células de mieloma múltiple se ha visto una sobreexpresión de la quinasa Btk y las proteínas antiapotóticas de la familia Bcl-2. Lo que plantea la inhibición de la Btk, mediante Ibrutinib, y el contrarrestar el efecto de las proteínas antiapóptoticas de Bcl-2, mediante los análogos de BH3 ABT-199 y ABT-737, como un posible tratamiento para dicho cáncer. En este estudio se ha evaluado la actividad de dichos fármacos sobre la línea celular MM.1S, por separado y combinados, mediante diferentes técnicas. Los resultados de estos estudios reflejan que Ibrutinib es un citostático que induce catástrofe mitótica en las células e induce la fosforilación de Bcl-2. Por otro lado, ABT-199 y ABT-737 son capaces de aumentar la sensibilidad celular ante el inhibidor de la Btk, mejorando su actividad, lo que posibilita el uso de combinaciones de Ibrutinib y BH3 miméticos en terapia

Estudio de la inmunogenicidad y mecanismos de muerte celular en nuevas terapias antitumorales. Aplicación al mieloma múltiple

En la investigación oncológica, el estudio de los mecanismos moleculares de muerte celular provocados por la quimioterapia es esencial no sólo para llegar a comprender los mecanismos de acción inherentes de estos fármacos, sino también para idear, optimizar y mejorar nuevos enfoques terapéuticos que permitan atajar las tan temidas recaídas. Además, durante los últimos años, la inmunoterapia ha irrumpido en la clínica como un tratamiento que brinda de una cierta esperanza a los pacientes con cáncer. Hoy en día, los tratamientos antitumorales utilizados o en desarrollo son capaces de inducir muerte celular mediante distintos mecanismos como la apoptosis, necroptosis, muerte celular inmunogénica (ICD), catástrofe mitótica, entre otras. Nuestro objetivo durante este trabajo ha sido estudiar los diferentes mecanismos de muerte celular inducidos por fármacos antitumorales actuales o de reciente introducción en la clínica, así como explorar la naturaleza inmunogénica subyacente a dichos tipos de muerte celular.Por un lado, se ha estudiado la contribución de la catástrofe mitótica en la inducción de muerte celular por agentes antimitóticos, así como los mecanismos de muerte accionados cuando dichos fármacos se utilizan en combinación con miméticos de BH3. Los resultados mostraron la existencia de una gran variabilidad inter- e intraindividual en los comportamientos y destinos celulares en respuesta a los distintos compuestos antimitóticos (barasertib, alisertib, vincristina y docetaxel). No obstante, la combinación de los distintos compuestos antimitóticos ensayados con miméticos de BH3 mostró una potenciación de la citotoxicidad en líneas celulares tumorales adherentes, siendo la muerte celular experimentada dependiente de caspasas y de Bax y Bak. En cuanto al papel de la familia de Bcl-2 en la muerte inducida por estos fármacos, los datos parecen indicar que los miembros anti-apoptóticos de esta familia contribuyen de forma cooperativa y acumulativa. Además, a pesar de que se trata un tema bajo debate, los experimentos con microscopía de fluorescencia en time-lapse sugieren que la duración del arresto mitótico influye en el destino ante dicho bloqueo. Cuando se combinó los compuestos antimitóticos con el mimético de BH3, ABT-737, se aceleraba la muerte celular y aumentaba el porcentaje de células que sucumbían durante la mitosis, especialmente en aquellas combinaciones donde el arresto mitótico era más prolongado. En el caso particular del inhibidor de aurora-B (barasertib), la potenciación de la muerte celular cuando se combinaba con ABT-737 sigue un mecanismo molecular diferente. El tratamiento con barasertib indujo marcadores de senescencia en diversas líneas celulares tumorales y la administración posterior de ABT-737 sensibilizaba de forma efectiva a dichas células induciendo una potente respuesta citotóxica. Por otro lado, en este trabajo se ha estudiado la inmunogenicidad y los mecanismos de muerte celular inducidos por la combinación de inhibidores del proteasoma con inhibidores de autofagia o compuestos inductores de estrés en el retículo endoplasmático en diversos modelos de mieloma múltiple. A pesar de que las terapias actuales han conseguido extender la esperanza de vida de esta enfermedad, sigue siendo una neoplasia incurable. En concreto, aunque los inhibidores de proteasoma han demostrado una validada eficacia clínica, la resistencia a estos fármacos sigue siendo recurrente y abarca la mayoría de las recidivas. Esta situación por tanto exige que se diseñen y estudien nuevos esquemas terapéuticos para abordar las recaídas. Así, en un trabajo previo del grupo se demostró la capacidad del inhibidor de autofagia cloroquina para potenciar la muerte celular inducida por carfilzomib. Durante este trabajo, se ha logrado observar también una intensificación similar de la muerte celular en las diferentes líneas celulares humanas y murinas analizadas. Además, la capacidad citotóxica mejorada de esta combinación también se ha constatado en una amplia colección de muestras primarias de médula ósea aisladas de pacientes con mieloma múltiple. De manera similar a lo que ocurre con la cloroquina, también hemos observado que el DBeQ, inhibidor de VCP/p97, también aumenta notablemente la muerte celular inducida por carfilzomib tanto en líneas celulares de MM como en células de mieloma primarias aisladas de la médula ósea de pacientes con esta enfermedad. Además, nuestros resultados indican que las combinaciones de carfilzomib con CLQ o DBeQ no sólo potencian, sino que también aceleran la muerte celular. Sin embargo, el mecanismo de acción por el cual se provoca dicha potenciación no se ha aclarado completamente. Los resultados de este trabajo mostraron que estos tratamientos aumentaban la expresión de varios marcadores de la respuesta a estrés en el retículo. No obstante, dicha respuesta, dependía estrechamente del tiempo y variaba sustancialmente entre las distintas líneas celulares de mieloma. La familia Bcl-2 ocupa una posición trascendental en las respuestas mediadas por estrés en el ER. A este respecto, nuestros datos revelaron una acumulación temprana transitoria de diversos miembros tanto anti- como proapoptóticos de esta familia (Mcl-1, Bim, PUMA y en menor medida NOXA). No obstante, nuestros datos mostraron que la línea celular deficiente para Bim sólo ofrecía una protección parcial contra la muerte celular inducida por los fármacos utilizados. Por lo tanto, su deficiencia podría estar compensada por otros miembros de BH3 capaces de desencadenar la muerte celular tras el tratamiento farmacológico. Por otro lado, aunque todavía no se conoce con exactitud el mecanismo molecular responsable de la muerte celular inducida por estrés en el ER, existen pruebas de la participación tanto de la vía de los receptores mortales como de la vía intrínseca de la apoptosis. Para instigar la muerte celular por la vía canónica, se requiere la permeabilización de la membrana externa mitocondrial (MOMP) inducida por la oligomerización de Bax y Bak. Sin embargo, nuestros datos han demostrado la capacidad de las combinaciones de fármacos utilizadas de inducir la muerte celular en células deficientes en Bax y Bak. Así mismo, la muerte celular inducida por las combinaciones basadas en carfilzomib era dependiente de caspasas en la mayoría de las líneas celulares analizadas, aunque la contribución relativa de cada miembro de esta familia variaba con las diferentes líneas celulares utilizadas. Aunque precisa de un estudio más detallado, los datos obtenidos en este trabajo parecen indicar que la autofagia no juega un papel principal en la potenciación ejercida por la cloroquina sobre la muerte inducida por carfilzomib en nuestros modelos experimentales. En su lugar, los datos apuntan a que la cloroquina pueda ejercer de modulador alostérico sobre el proteasoma potenciando la inhibición de este cuando se utiliza en combinación con carfilzomib. En cuanto al estudio de la capacidad inmunogénica de estos tratamientos, se observó que in vitro, las combinaciones de fármacos eran capaces de inducir la expresión de diversas señales inmunogénicas (expresión de ecto-CRT, Hsp70 y BiP), así como la maduración de células dendríticas cuando estas eran coincubadas con restos apoptóticos de células tratadas con las formulaciones ensayadas. Sin embargo, las respuestas in vivo en los experimentos de vacunación en el modelo ortotópico de mieloma murino MOPC315.BM mostraron que la muerte celular provocada por la combinación de carfilzomib con cloroquina no proporcionaba un efecto protector contra el desarrollo de la enfermedad. Tan solo cuando la combinación de fármacos utilizada para tratar las células de mieloma contenía el inhibidor general de caspasas zVAD-fmk, se consiguió retrasar de forma débil el desarrollo del mieloma. Tal y como apuntan algunos estudios, esto podría indicar que las caspasas juegan un papel en la inmunogenicidad de la muerte celular. A la vista de nuestros datos, la emisión de DAMPs por sí misma podría no ser suficiente para provocar respuestas inmunitarias activas contra el cáncer. De hecho, se considera igualmente decisivo los mecanismos subyacentes involucrados en la recepción, transmisión y respuesta de las células inmunes a estas señales de peligro, así como la propia naturaleza inmunosupresora de esta enfermedad. Una de las razones detrás de la disfunción inmune observada en el mieloma múltiple está mediada por la regulación negativa ejercida por las proteínas inhibidoras del punto de control como el eje PD-1/PD-L1. Sin embargo, ni el tratamiento individual con anticuerpos monoclonales dirigidos contra los inhibidores del punto de control (anti-PD1), ni su combinación con la formulación de vacunación antes mencionada, extendían significativamente la supervivencia de los ratones. Es posible que redes moleculares mas complejas estén involucradas en la generación de una respuesta inmune antitumoral efectiva en la enfermedad de mieloma.Por último, cada vez se está consolidando más la idea de que los DAMPs y los procesos moleculares relacionados con la muerte celular inmunogénica puedan servir como una fuente de biomarcadores pronósticos en pacientes con cáncer. En este trabajo hemos demostrado por primera vez que las células de mieloma en muestras de médula ósea aisladas de pacientes con discrasias de células plasmáticas, muestran niveles elevados de ecto-CRT en su superficie. Además, aunque se observó una gran variabilidad interindividual, nuestros datos sugieren que los niveles de ecto-CRT parecen aumentar con la progresión de la enfermedad. Este hallazgo junto con el hecho de que los pacientes con un perfil citogenético alterado mostraron niveles aumentados de ecto-CRT y que la exposición a la CRT aparentemente no está influenciada por la quimioterapia, puede apuntar a la transformación maligna como el instigador principal de la expresión aumentada de este DAMP. Así mismo el análisis del microambiente en la médula ósea de estos pacientes mostró que los pacientes con niveles altos de ecto-CRT exhibían un perfil de células T alterado, con ratios bajos de células T CD4+/CD8+ consecuencia de una menor frecuencia de linfocitos T CD4+ y un mayor número de células T CD8+. Además, también presentaban un mayor número de células NK, mDC, pDC y Tregs, así como una mayor actividad en el eje PD-1/PD-L1. Así, nuestros datos sugieren que los pacientes con una mayor expresión de este DAMP, poseen rasgos inmunológicos reminiscentes de un microambiente medular óseo asociado a un estado inmunitario debilitado y comprometido, lo que podría traducirse en un mal resultado clínico en el contexto de la enfermedad. De hecho, el grupo de pacientes con un perfil de expresión de ecto-CRT aumentado exhibieron significativamente un menor tiempo medio de progresión de la enfermedad, desarrollaban con mayor frecuencia plasmacitomas extramedulares, habían sido tratados con un mayor número de líneas de tratamiento y albergaban un perfil citogenético de alto riesgo. Todo ello sugiere que la elevada expresión de ecto-CRT en las células de mieloma de estos pacientes está relacionada con una mayor malignidad, un microambiente inmunitario en la médula más deficiente y con un peor pronóstico clínico.<br /

Mecanismos de muerte celular inducida por compuestos antimitóticos en la línea de cáncer colorrectal HCT116

Los fármacos antimitóticos producen desviaciones en el ciclo mitótico de las células y se ha visto que son eficaces agentes antitumorales, ya que causan daños celulares que además de inhibir la proliferación de las células desencadenan mecanismos de muerte celular entre los que destaca la apoptosis. Dentro de los antimitóticos existen diferentes grupos en función de su naturaleza y sus dianas celulares. Los taxanos y los alcaloides de la vinca son compuestos que actúan sobre la dinámica de los microtúbulos, inhibiendo su polimerización y despolimerización, respectivamente. Por otra parte, en los últimos años se han desarrollado moléculas que actúan como inhibidores de las aurora quinasas, proteínas importantes en la regulación del ciclo celular. Este trabajo estudia los efectos de tres fármacos antimitóticos (uno de cada uno de los tipos mencionados): vincristina, docetaxel y barasertib en la línea celular de cáncer colorrectal HCT116, utilizando células WT y Bak/Bax DKO resistentes a la apoptosis. Se ha realizado un ensayo de toxicidad en el que las células se han tratado con estos compuestos durante diferentes tiempos y se ha medido la muerte celular por apoptosis mediante la unión a anexinaV‐DY634 por citometría de flujo. También se han llevado a cabo estudios morfológicos y un ensayo clonogénico. La vincristina y el docetaxel han demostrado tener un potente efecto antitumoral en estas células, produciendo efectos que desencadenan la apoptosis. El barasertib, sin embargo, no tiene tanta capacidad de provocar apoptosis en esta misma línea celular y se observa el fenómeno denominado “slippage” que da lugar a células multinucleadas y que han perdido la capacidad de proliferar

Efecto de Selinexor y Panobinostat sobre los niveles de PD‐L1 en células de mieloma múltiple

El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia hematológica maligna caracterizada por la presencia de células plasmáticas (PCs) clonales anormales en la médula ósea, con potencial de crecimiento incontrolado y, que además secretan una inmunoglobulina monoclonal cuya acumulación provoca una disfunción orgánica, causando lesiones óseas, lesión renal, anemia e hipercalcemia. A pesar de las numerosas investigaciones y los avances realizados en la terapia frente a la patología, sigue siendo una enfermedad incurable. Como posible terapia frente a esta enfermedad, se ha propuesto el bloqueo del eje PD-1/PD-L1; sin embargo, los datos discordantes de la literatura sobre la expresión del mismo y las toxicidades relacionadas hacen que se necesiten investigaciones adicionales para optimizar el potencial terapéutico de esta clase de inmunoterapia.En el presente Trabajo Fin de Grado, se aborda el análisis de la expresión de PD-L1 en cuatro líneas de MM tras la administración de diferentes concentraciones de los fármacos Selinexor y Panobinostat; con el objetivo de, en un futuro, emplearlos como estrategia terapéutica de combinación frente al MM. Para ello, se ha comprobado la capacidad de Selinexor y Panobinostat de inducir muerte celular de manera dosis-dependiente en cuatro líneas de MM y posterior análisis de la expresión superficial de PD-L1 en la membrana plasmática de dichas células.En los resultados, se pudo comprobar que las dosis de los fármacos provocaron un aumento de la muerte celular en todas las líneas. También se observó que los patrones de expresión de la proteína PD-L1 no seguían una tendencia uniforme en las cuatro líneas celulares; sin embargo, las dosis de Selinexor y Panobinostat empleadas, todas ellas indujeron un aumento de la expresión; lo que podría conllevar la evasión de la vigilancia inmune sobre las células cancerosas en presencia de dichos fármacos.<br /

Mecanismos de muerte celular inducida por fármacos antimitóticos y miméticos BH3

Los fármacos antimitóticos actúan a nivel de la mitosis para evitar la proliferación masiva de las células tumorales. Dos de estos fármacos son vincristina y docetaxel, un alcaloide de la vinca y un taxano, respectivamente, que tienen afinidad por la β-tubulina, un componente de los microtúbulos. Más recientemente se ha desarrollado un inhibidor específico de Aurora quinasa B, el cual ha entrado en ensayos clínicos. Nuestros resultados demuestran que barasertib induce la parada del ciclo celular en la fase G2/M y, dependiendo del tiempo de actuación, puede llevar a las células a la endorreduplicación, la entrada en senescencia o la muerte celular, que según los resultados de este estudio, tendría lugar principalmente durante la interfase. Por otra parte, mientras que barasertib induce la modificación de los núcleos celulares, dando lugar a morfologías aberrantes, el mimético BH3 ABT-737 induce la apoptosis celular al unirse e inactivar a sus dianas, las proteínas anti-apoptóticas Bcl-2, Bcl-XL y Bcl-w; sin embargo, al combinar ambos compuestos, parece que el efecto predominante es el provocado por barasertib

Caracterización de líneas celulares de mieloma múltiple resistentes a miméticos-BH3.

El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia hematológica que cursa con la proliferación descontroladay acumulación de células B plasmáticas aberrantes en la médula ósea. La aparición de resistencias a lostratamientos actuales sigue siendo la principal limitación para superar la enfermedad. Por tanto, nuevasestrategias terapéuticas están siendo desarrolladas, entre las que destacan los miméticos BH3,encargados de inhibir las proteínas anti-apóptoticas de la familia BCL-2, que se encuentransobreexpresadas en algunas líneas de mieloma, lo que les aporta una mayor capacidad de supervivenciay resistencia a fármacos. En este trabajo se ha llevado a cabo la caracterización del mecanismo deresistencia que desarrollan dos líneas celulares de MM (MM.1S y H929) frente a dos prometedoresmiméticos BH3 en fase de investigación (A-1155463(BCL-XL) y S63845 (MCL-1), respectivamente). Paraello, hemos generado sublíneas resistentes a cada mimético y hemos evaluado su sensibilidad a éstos yotros fármacos mediante ensayos dosis-respuesta y citometría de flujo; además, hemos realizadoestudios del nivel de expresión de ciertas proteínas BCL-2. Con estos experimentos, hemos identificadoque la resistencia a A-1155463 en las células MM.1S es reversible y podría deberse a cambiosepigenéticos, sin embargo, una nueva exposición al mimético permite restablecer la resistencia deforma rápida. Por el contrario, hemos confirmado que la resistencia al S63845 en la línea H929 no serevierte en un periodo medio de tiempo. Además, hemos encontrado una disminución de MCL-1, BCL-2, PUMA y BIM en las sublíneas resistentes a S63845. Éstas son capaces de evadir la apoptosis a pesarde tener bajos niveles de la proteína anti-apoptótica MCL-1. La bajada de PUMA será posiblemente elmecanismo que compensa esta reducción. Este cambio les permite, no solo resistir al S63845, sinotambién a inhibidores indirectos de MCL-1 como Dinaciclib o NVP-2; por el contrario, les hace ser mássensibles a fármacos como el Selinexor.<br /

Mecanismo de la muerte celular inducida por inhibición del metabolismo energético en células de mieloma múltiple

La oncogénesis es un proceso mediante el cual una célula normal se convierte en célula tumoral, con capacidad de proliferación descontrolada y posibilidad de formar un tumor maligno. Entre las múltiples alteraciones que sufre una célula tumoral, cabe destacar las variaciones en el metabolismo energético, ya que las células tumorales utilizan la glucólisis para obtener energía incluso en presencia de oxígeno, lo que se conoce como “Efecto Warburg”. Esta característica resulta interesante para generar estrategias terapéuticas contra el cáncer y por ello, en este trabajo se pretende evaluar el potencial que tiene el bloqueo del metabolismo energético para la terapia antitumoral. Para ello, las estrategias seguidas consisten en la búsqueda de efectos sinérgicos entre fármacos metabólicos (ritonavir, metformina y 2-deoxiglucosa) y fármacos quimioterápicos dirigidos contra las células del mieloma (carfilzomib y Byl-719). Los resultados obtenidos muestran que ritonavir, un fármaco inhibidor de la proteasa del VIH y bloqueante del transportador de glucosa GLUT4, sinergiza con carfilzomib, un inhibidor del proteasoma, potenciando el efecto del mismo en las líneas celulares ensayadas. Por otro lado, se aprecia un ligero efecto sumatorio entre la acción de 2-deoxiglucosa, un fármaco inhibidor de la glucólisis, y Byl-719, fármaco emergente para el tratamiento del mieloma que inhibe selectivamente la ruta de la fosfoinositol 3-quinasa (PI3K). De forma que, en ambos casos se obtienen mayores niveles de muerte celular en las células tratadas con la combinación de fármacos que con los fármacos por separado. Asimismo, al analizar la expresión de proteínas anti-apoptóticas en diferentes condiciones, se observa un aumento de Bcl-2 y Mcl-1, lo que podría estar relacionado con un mecanismo de resistencia de las células ante a los cambios inducidos en el metabolismo energético

Estudio de la apoptosis inducida por el inhibidor de Farnesil-Transferasas BMS-214662, APO2l/Trail e interferón alfa en el mieloma múltiple humano. Aplicaciones terapeúticas

El trabajo recogido en esta Tesis pretende contribuir a una mejor caracterización de los mecanismos mediante los cuales diferentes agentes terapeúticos BMS-214662, Apo2L/TRAIL e Interferón-alfa) en líneas celulares de mieloma múltiple (MM) y en células plasmáticas tumorales extraídas de pacientes de mieloma. El MM, como su propio nombre indica, es un "oma" o tumor que afeca a la "myelo" médula, y que actualmente continúa siendo incurable. La gran heterogeneidad existente entre los pacientes en cuanto al grado de afectación, la evolución de la enfermedad, la respuesta a los tratamientos... obstaculizan la obtención de terapias eficaces.Se hace necesaria una búsqueda de nuevos tratamientos, la caracterización de los mecanismos apoptóticos que inducen y de los parámetros que condicionan la sensibilidad de las células a dichos agentes, todo ello, con el objetivo de diseñar una terapia más efectiva, individualizada y racional.<br /

Análisis del mecanismo de acción de nuevos fármacos para el posible tratamiento de neoplasias hematológicas. Efecto del inhibidor de CK2, CX-4945, en células de mieloma múltiple

La proteína Ser/Thr quinasa CK2 se conoce que está implicada en varios procesos celulares como el ciclo celular, apoptosis y proliferación. Se ha estudiado que la inhibición de CK2 inducida por una molécula recientemente descubierta, CX-4945, muestra efectos anti-proliferativos y pro-apoptóticos en diferentes canceres, incluidos en mieloma múltiple. El MM es una neoplasia hematológica que afecta a las células B plasmáticas, la cual sigue siendo incurable. En este trabajo se analizó, sobre varias líneas celulares de mieloma múltiple, la capacidad de inducción y el mecanismo de muerte celular y la combinación con un inhibidor del mTOR. Los resultados mostraron que CX-4945 induce apoptosis en todas las líneas de MM analizadas, a partir de las 8h de incubación, y que todas ellas, excepto MM1.S, eran sensibles en grado variable al inhibidor de caspasas, Z-VAD-fmk. La apoptosis inducida por el inhibidor de CK2, en la línea MM.1S, mostró que era independiente de caspasas, mientras que en las líneas RPMI 8226 y U266, fue dependiente de caspasas, y en concreto se observó que la caspasa-8, era la caspasa iniciadora. En esta última línea celular aunque expresaba niveles significativos de DR4 y tras el tratamiento con CX-494,5 se inducía la expresión de TRAIL y FasL, la unión de estos a sus receptores mortales específicos no contribuían a la muerte inducida por el fármaco. CX-4945 inducía exposición de PS y caída del potencial mitocondrial y estos hechos no fueron completamente inhibidos por la sobreexpresión de Bcl-xL y Mcl-1 en células RPMI 8226. La necroptosis, necrosis programada, podría contribuir a la muerte inducida por el CX-4945 en las líneas celulares MM.1S y NCI-H929. El inhibidor de mTOR, PP242, disminuye la acción citotóxica del CX-4945 en las líneas celulares de mieloma, U266 y NCI-H929

Apoptosis inducida por el inhibidor del proteasoma Ixazomib en células de mieloma humano

El mieloma múltiple humano es una neoplasia hematológica caracterizada por una proliferación maligna de células B plasmáticas productoras de ingentes cantidades de anticuerpos, procedentes de un solo clon y cuya expansión tiene lugar en la médula ósea. A pesar de los avances realizados en la terapia frente a esta patología, continúa siendo una enfermedad incurable. El estudio del mecanismo de acción de nuevos fármacos introducidos para el tratamiento del mieloma múltiple podría aportar información útil en la búsqueda de nuevas estrategias terapéuticas. El presente trabajo aborda el análisis de las vías de muerte celular implicadas en la acción del inhibidor del proteasoma Ixazomib, recientemente aprobado por la FDA y la EMA. En concreto, se ha comprobado la capacidad de Ixazomib de inducir muerte celular de manera dosis-dependiente en diversas líneas de mieloma múltiple, así como su efecto sobre el ciclo celular provocando, en la mayoría de las líneas celulares estudiadas, una parada en las fases G2/M. Además, ha quedado demostrada la activación de caspasa 3, principal caspasa ejecutora, en células tratadas con Ixazomib y la variación en los niveles de expresión de proteínas pertenecientes a la familia Bcl-2, lo cual podría indicar su directa implicación en el mecanismo de muerte celular desarrollado por éste. En paralelo, se ha descartado la posible sinergia entre Ixazomib e inhibidores de VCP/p97 (DBeQ y CB-5083) pero ha quedado constatada una clara sinergia entre Ixazomib y cloroquina que, en un futuro, podría constituir una nueva estrategia terapéutica de combinación frente al mieloma múltiple