Memory TCR repertoires analyzed long-term reflect those selected during the primary response

Normal T cell repertoire selection and evolution in antigen-specific responses is poorly understood. We have recently described an MHC class I-restricted response characterized by an overwhelming expansion of CD8 cells expressing a Vβ10 TCR, thus allowing the identification of antigen-selected cells directly ex vivo. Our present strategy to follow the overall TCR repertoire selection was to monitor the expression of a particular TCR α chain (Vα8) on antigen-selected Vβ10+ cells by four-color flow cytometry. We demonstrate that while there is substantial variation among the responder mice in Vα8 usage, the repertoires of individual animals remain relatively stable over long periods of time (>1 year), with or without repeated antigenic challenge. Thus if any evolution of this response occurs upon re-exposure to antigen, it would appear not to skew the TCR repertoire established during the primary respons

The identification of tyrosine as a common key residue in unrelated H-2Kd restricted antigenic peptides

we have compared the activity of several Kd-or Ld-restricted antigenic peptides as competitors in a functional competition assay using cytolytic T lymphocyte (CTL) clones. All of four unrelated Kd-restricted peptides tested could compete with each other but not with the Ld-restricted peptide P91A-.12-24 (P91A). Moreover, the P91A peptide falled to compete with the four Kd-restricted peptides. In contrast, another Ld-restricted peptide[mouse cytomegalovirus (MCMV) pp89 167-176] could clearly compete with both Kd- and Ld-restricted peptides. The comparison of a series of modified MCMV pp89 peptides suggested that distinct structural features allow the Interaction of the peptide with the two different MHC class I molecules. We showed previously that the competitor activity of two different Kd-restricted antigenic peptides was reduced substantially upon Ala substitution of the single Tyr residues present in these peptides. We now show a similar effect for two additional Kd-restricted peptides. Our results thus suggest that Tyr may function as an ‘anchor' residue for many antigentic peptides that bind to the Kdmolecule. Molecular modeling of the presumed antigen-binding site of the Kdmolecule revealed the presence of two deep cavities that may be involved in binding peptide amino acid side chains. A model Illustrating one possible interaction of a Tyr-containing peptide with the Kdmolecule is presente

CD8+ cytolytic T cell clones derived against the Plasmodium yoelii circumsporozoite protein protect against malaria

Immunization of BALB/c mice with radiation-attenuated Plasmodium yoelli sporozoites induces cytotoxic T lymphocytes (CTL) specific for an epitope located within the amlno acid sequence 277-288 of the P. yoellicircumsporozoite (CS) protein. Several CD8 + CTL clones were derived from the spleen cells of sporozolte-immunlzed mice, all displaying an apparently identical epitope specificity. All the clones Induced high levels of cytotysls in vitro upon exposure to peptide-incubated MHC-compatlble target cells. The adoptive transfer of two of these clones conferred complete protection against sporozotte challenge to naive mice. This protection Is species and stage specific. Using P. yoelli specific ribosomal RNA probes to monitor the in vivo effects of the CTL clones, we found that their target was the intrahepatocytic stage of the parasite. The protective clones completely Inhibited the development of the liver stages of P. yoelli Some CTL clones were only partially Inhibitory in vivo, while others failed completely to alter liver stage development and to confer any detectable degree of protection. The elucidation of the effector mechanism of this CTL mediated protection against rodent malaria should facilitate the design of an effective malaria vaccine. From a broader perspective this model may provide further insight into the mechanlsm(s) of CTL mediated killing of intracellular non-viral pathogens in genera

Analysis Of The Effects Of Polyadenylic - Polyuridylic Acid On The Immune Response Of C58 Mice To Line I(b) Leukemia.

PhDImmunologyUniversity of Michigan, Horace H. Rackham School of Graduate Studieshttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/189275/2/7619187.pd

RELATION ENTRE LE REPERTOIRE TCR SELECTIONNE PAR UN ANTIGENE IN VIVO ET LE REPERTOIRE PRE-IMMUN CORRESPONDANT

LA FREQUENCE DES PRECURSEURS T SPECIFIQUES D'UN ANTIGENE (AG) DONNE ETANT BASSE, IL EST DIFFICILE D'ANALYSER LE REPERTOIRE PRE-IMMUN SPECIFIQUE D'UN AG ET DE DETERMINER SA RELATION AVEC LE REPERTOIRE SELECTIONNE AU COURS D'UN REPONSE IMMUNITAIRE. NOUS AVONS UTILISE UN SYSTEME DANS LEQUEL UNE POPULATION ENRICHIE EN CELLULES SELECTIONNEES PAR L'AG PEUT ETRE PURIFIEE PAR CYTOMETRIE. DANS LES SOURIS DBA/2, LES TCR DES CELLULES T CD8 SPECIFIQUES D'UN EPITOPE IMMUNODOMINANT DEFINI (CW3 170-179) ONT UNE STRUCTURE CONSERVEE AVEC UN BIAIS DANS L'UTILISATION DES SEGMENTS DE GENE TCR VB10 ET TCRBJ1S2. LES CELLULES T CD8 ACTIVEES (CD62L) AVEC UN TCR BV10, SELECTIONNEES PAR L'AG CW3, SONT TRIEES POUR UNE ANALYSE PAR PCR SUR CELLULES INDIVIDUELLES. L'ANALYSE POUSSEE A SATURATION REVELE QUE CHAQUE SOURIS SELECTIONNE UN REPERTOIRE TCR BV10J1S2 PROPRE COMPOSE D'AU MOINS 20 CLONES DE FREQUENCES VARIEES OU TRES PEU DE CLONES FORMENT PLUS DE 50% DU REPERTOIRE. NOUS AVONS VOULU SAVOIR SI CETTE DISTRIBUTION REFLETAIT LA DISTRIBUTION DU REPERTOIRE PRE-IMMUN SPECIFIQUE DE L'AG CW3. POUR CE FAIRE, NOUS AVONS DEVELOPPE UNE APPROCHE PAR TRANSFERT DE SPLENOCYTES D'UNE SOURIS NORMALE VERS 2 SOURIS IRRADIEES. CES PAIRES DE SOURIS SONT ENSUITE IMMUNISEES ET LE REPERTOIRE TCR SELECTIONNE PAR L'AG CW3 EST ANALYSE. UNE A 2 SEQUENCES COMMUNES ONT ETE DETECTEES DANS CHACUNE DES 5 PAIRES ANALYSEES. AU CONTRAIRE, AUCUNE SEQUENCE COMMUNE N'A ETE DETECTEE DANS DES SOURIS AYANT RECU DES CELLULES DE DONNEURS DIFFERENTS OU PARMI LES CONTROLES TRANSFERES AVEC DES SPLENOCYTES ISSUES DE DONNEURS MULTIPLES. CES RESULTATS MONTRENT QUE CERTAINS PRECURSEURS SONT DEJA DIVISES AVANT IMMUNISATION ET QUE LA SELECTION PAR L'AG SEMBLE ETRE SURTOUT LIEE AU HASARD PARMI LE REPERTOIRE PRE-IMMUN DISPONIBLE. EN APPLIQUANT DES SIMULATIONS INFORMATIQUES A CES DONNEES, NOUS AVONS EVALUE DES MODELES DECRIVANT LA RELATION ENTRE LE REPERTOIRE PRE-IMMUN SPECIFIQUE ET SA SELECTION PENDANT LA REPONSE A L'AG CW3.LYON-ENS Sciences (693872304) / SudocSudocFranceF

Identification des clones de lymphocytes T spécifiques de l'antigène liés au m^eme réarrangement VDJb ancestral

Le schéma du développement des lymphocytes T dans le thymus est compatible avec la génération à partir d'un même précurseur VDJb de plusieurs cellules filles exprimant des TRCa différents. Mais l'énorme diversité du répertoire TCR chez la souris normale rend difficile la détection de tels groupes. Les différents modèles de diversité restreinte du répertoire, les souris TCRb transgéniques, suggèrent que la diversité du répertoire TCRa, associé à un TCRb donné au niveau des lymphocytes T matures, pourrait être fortement réduite par les processus de sélection. Nous avons considéré que si certains descendants d'un même réarrangement VDJb expriment des TCRa similiaires, certaines de ces cellules pourraient reconnaître le même épitope. Dans ce cas, il serait possible de les détecter par l'analyse détaillée des répertoires TCRab spécifiques de l'antigène sélectionnés lors des réponses immunitaires qui se traduisent par une forte expansion clonale. Nous avons utilisé un modèle de réponse lymphocytaire T CD8 qui permet l'indentification ex vivo et la purification d'une sous-population fortement enrichie en cellules spécifiques de l'antigène à partir de souris individuelles. En plus, cette réponse immunitaire est dirigée essentiellement contre un seul peptide le HLA-CW3(170-179) présenté par les molécules H-2Kd dont le répertoire est caractérisé par une diversité relativement étroite facilitant ainsi son analyse à partir de cellules individuelles. En faisant appel à des techniques de "single-cell RT-et DNA-PCR" très efficaces, nous avons pu détecter des clones de cellules T qui partagent le même réarrangement VDJb associé à des TCRa différents dans des clones distincts. En outre, ces cellules dont l'origine commune a pu être prouvée par l'amplification des réarrangements DJb résiduels, peuvent être sélectionnées par le même antigène chez une souris normale et contribuent au répertoire immun à des proportions inégales. Ces résultats suggèrent que, chez la souris normale, la diversité du répertoire TCRa associé à un réarrangement VDJb pourrait être en fait très limitée.LYON-ENS Sciences (693872304) / SudocSudocFranceF

Escape of mouse mastocytoma P815 after nearly complete rejection is due to antigen loss variants rather than immunosuppression

It is a common observation that many tumors of unquestionable imnmnogenicity grow progressively and eventually kill their syngeneic host. This is observed, for instance, with many methylcholanthrene-induced tumors that are able to elicit concomitant immunity (1-3) as well as a measurable cytolytic T lymphocyte (CTL) ~ response during the onset of tumor growth. It is possible that some tumors outpace the immune defenses of the host by their ability to multiply and metastasize very rapidly. However, this is certainly not a general explanation, since for some tumors an initial period of growth is followed by a period of stagnation or partial regression followed in turn by a resumption of tumor growth and death of the host. Mastocytoma P815 belongs to this category (4-6), where a partial immune rejection of the tumor by the syngeneic host is often observed but very rarely results in the complete elimination of the tumor cells. Evidence suggesting that suppressor cells may be the cause of this phenomenon has been presented by Takei et al. (4, 7), who reported that suppressor T lymphocytes capable of inhibiting specifically the development of a CTL response against mastocytom