Isolation and characterization of a copalyl diphosphate synthase gene promoter from Salvia miltiorrhiza

The promoter, 5' UTR, and 34-nt 5' fragments of protein encoding region of the Salvia miltiorrhiza copalyl diphosphate synthase gene were cloned and characterized. No tandem repeats, miRNA binding sites, or CpNpG islands were observed in the promoter, 5' UTR, or protein encoding fragments. The entire isolated promoter and 5' UTR is 2235 bp long and contains repetitions of many cis-active elements, recognized by homologous transcription factors, found in Arabidopsis thaliana and other plant species. A pyrimidine-rich fragment with only 6 non-pyrimidine bases was localized in the 33-nt stretch from nt 2185 to 2217 in the 5' UTR. The observed cis-active sequences are potential binding sites for trans-factors that could regulate spatio-temporal CPS gene expression in response to biotic and abiotic stress conditions. Obtained results are initially verified by in silico and co-expression studies based on A. thaliana microarray data.The quantitative RT-PCR analysis confirmed that the entire 2269-bp copalyl diphosphate synthase gene fragment has the promoter activity.Quantitative RT-PCR analysis was used to study changes in CPS promoter activity occurring in response to the application of four selected biotic and abiotic regulatory factors; auxin, gibberellin, salicylic acid, and high-salt concentration

Ozonation of Whole Blood Results in an Increased Release of Microparticles from Blood Cells.

Autohemotherapy with ozonated blood is used in the treatment of a broad spectrum of clinical disorders. Ozone demonstrates strong oxidizing properties and causes damage to cell membranes. The impact of whole-blood ozonation on the release of microparticles from blood and endothelial cells and the concentration of selected markers in the hemostatic system (APTT, PT, D-dimer, fibrinogen) were investigated. Venous blood, obtained from 19 healthy men, was split into four equal parts and treated with air, 15 µg/mL ozone, or 30 µg/mL ozone, or left untreated. The number and types of microparticles released were determined using flow cytometry on the basis of surface antigen expression: erythrocyte-derived microparticles (CD235+), platelet-derived microparticles (CD42+), leukocyte-derived microparticles (CD45+), and endothelial-derived microparticles (CD144+). The study is the first to demonstrate that ozone induces a statistically significant increase in the number of microparticles derived from blood and endothelial cells. Although statistically significant, the changes in some coagulation factors were somewhat mild and did not exceed normal values

Rights and rsponsibilities of spouses

Wydział Prawa.Celem rozważań jest szczegółowa analiza relacji małżeńskich unormowanych w dziale II Kodeksu Rodzinnego i Opiekuńczego zatytułowanym „Prawa i obowiązki małżonków” (art. 23-30 KRO). Kompleks przepisów regulujących podjętą problematykę nie tylko wyraża istotę i sens małżeństwa we wzajemnych stosunkach między małżonkami, lecz również określa rolę małżonków w założonej przez nich rodzinie. Określa się je w doktrynie mianem praw i obowiązków „podstawowych”, ponieważ są ściśle związane z realizacją elementarnych funkcji każdego związku małżeńskiego, czy też patrząc szerzej – funkcji rodziny. Są to dalej prawa i obowiązki kreowane bezpośrednio przez ustawodawcę, zaś ich podmioty (małżonkowie) nie mają żadnych możliwości (poza nielicznymi wyjątkami) kształtowania ich treści, i wreszcie na kształt tychże praw i obowiązków nie ma żadnego wpływu rodzaj ustroju majątkowego, w jakim małżonkowie pozostają. Rozważania poszczególnych relacji małżeńskich przeprowadzono odwołując się do zaproponowanej w literaturze klasyfikacji praw i obowiązków małżonków wyróżniającej prawa i obowiązki małżonków o charakterze wzajemnym, oraz prawa i obowiązki względem rodziny. Do pierwszej z wymienionych kategorii zaliczono: wspólne pożycie małżonków, wierność małżeńską, wzajemną pomoc, wzajemną reprezentację małżonków, oraz wybór nazwiska. Do drugiej zaś: współdziałanie dla dobra rodziny, wspólne rozstrzyganie o istotnych sprawach rodziny, przyczynianie się do zaspokajania potrzeb rodziny, korzystanie z mieszkania oraz przedmiotów urządzenia domowego (w celu zaspokojenia potrzeb rodziny), oraz solidarną odpowiedzialność za zobowiązania zaciągnięte w związku z zaspokajaniem zwykłych potrzeb rodziny.The subject of deliberation is a detailed analysis of marital relations normalized in chapter II of the Family and Guardianship Code entitled: ‘Rights and obligations of spouses’ (art. 23-30 KRO). A set of provisions, regulating the issue under consideration, apart from stating the essence and meaning of marriage in interrelationships between spouses, also determines the roles of spouses in the family they belong to. They are defined in the doctrine as ‘basic’ rights and obligations, because they are strictly connected with the performance of elementary functions of every marriage, or in a broader sense, of the family function. These are still rights and obligations imposed directly by the legislator and it is not possible for the married parties (spouses) to influence their content (apart from few exceptions). Furthermore, the type of matrimonial regime, in which the spouses function, also do not influence these rights and obligations. The serious considerations of the particular marital relationships were made by referring to the rights and obligations of spouses presented in literature, which distinguishes rights and obligations of spouses that have a mutual character as well as rights and obligations towards a family. The first of the aforementioned category includes: marital cohabitation, marital fidelity, mutual help, joint representation of spouses as well as the choice of a surname. The second category consists of: cooperating for the sake of a family, deciding together about important family matters, contributing to the fulfillment of family needs, making use of the property and domestic appliances (in order to fulfill family needs) as well as being jointly responsible for financial commitments taken in order to fulfill fundamental family needs

School as a space of activities and possibilities. Ethnographic case study of the school of The Civic Educational Association in Warsaw

Problematyka tekstu umiejscowiona została w obszarze pedagogiki szkoły; jego celem jest opis stołecznej placówki przez pryzmat wybranych wartości. Przedmiot analiz, prowadzonych w paradygmacie interpretatywnym, ogniskuje się wokół kategorii przestrzeni aksjologicznej szkoły, zrekonstruowanej z koncepcji programowej i pedagogii uobecnionej w publicystycznym dyskursie edukacyjnym dyrektora tej szkoły społecznej. Istotnym wymiarem kultury opisywanej szkoły jest zaufanie relacyjne, dlatego w artykule przedstawiono warunki sprzyjające jego zaistnieniu.The issues of the text have been addressed in the area of school pedagogy; its purpose is to describe the capital's institution through the prism of selected values. The subject of the analyses, carried out in the interpretative paradigm, focuses on the category of the axiological space of school, reconstructed from the program concept and pedagogy present in the journalistic educational discourse of the head teacher of this community school. An important dimension of the culture of the described school is relational trust, which is why the article sets out the conditions conducive to its existence

Mechanisms of oat (Avena sativa L.) acclimation to phosphate deficiency

Background Deficiency of available forms of phosphorus is common in most soils and causes reduction of crop plants growth and yield. Recently, model plants responses to phosphate (Pi) deficiency have been intensively studied. However, acclimation mechanisms of cereals like oat (Avena sativa L.), to low Pi stress remains not fully understood. Oat plants have been usually cultured on poor soils, with a low nutrient content, but their responses to such conditions are not well known, therefore the main goal of the study was to investigate the mechanisms that enable oat plants to grow under low Pi conditions. Methods Four oat cultivars (A. sativa, cv. Arab, Krezus, Rajtar and Szakal) were grown for three weeks in a nutrient media with various P sources: inorganic—KH2PO4 (control), organic—phytate (PA) and with no phosphate (−P). The effects of Pi deficiency on the level of P, oat growth parameters, intensity of photosynthesis, plant productivity, root exudation ability, localization, activity and isoforms of acid phosphatases, enzymes involved in Pi mobilization, were estimated. In addition, the effect of mycorrhization on plant growth was also observed. Results All studied oat cultivars grown on Pi-deficient media had significantly decreased Pi content in the tissues. Pi deficiency caused inhibition of shoot growth, but generally it did not affect root elongation; root diameter was decreased, root/shoot ratios increased, whereas PA plants showed a similar growth to control. Photosynthesis rate and productivity parameters decreased under low Pi nutrition, however, sugar content generally increased. Studied oat cultivars did not respond to low Pi via increased exudation of carboxylates from the roots, as pH changes in the growth media were not observed. Pi starvation significantly increased the activity of extracellular and intracellular acid phosphatases (APases) in comparison to the control plants. Three major APase isoforms were detected in oat tissues and the isoform pattern was similar in all studied conditions, usually with a higher level of one of the isoforms under Pi starvation. Generally no significant effects of mycorrhizal colonization on growth of oat cultivars were observed. Discussion We postulated that acid phosphatases played the most important role in oat cultivars acclimation to Pi deficiency, especially extracellular enzymes involved in Pi acquisition from soil organic P esters. These APases are mainly located in the epidermis of young roots, and may be released to the rhizosphere. On the other hand, intracellular APases could be involved in fast Pi remobilization from internal sources. Our study showed that oat, in contrast to other plants, can use phytates as the sole source of P. The studied oat cultivars demonstrated similar acclimation mechanisms to Pi deficiency, however, depending on stress level, they can use different pools of acid phosphatases

Tumor markers in gastric cancer – classification and characteristics

Gastric cancer is a malignant neoplasm. It is one of the major causes of premature death due to cancer in the world. Carcinogenesis process can take up to 30 years, therefore, stomach cancer develops primarily over the age of 50. However, the disease can occur at any age. The etiology of this disease is very complex, for example, environmental factors, persistent infection with Helicobacter pylori and smoking may be mentioned. However, it is estimated that about 20% of cases have been associated with a family occurrence. Symptoms, that may indicate the ongoing process of cancer, are non–specific. Because of the non–specific symptoms, gastric cancer is usually diagnosed at an advanced stage, when the only effective treatment is the complete resection of the affected organ, and the percentage of the 5–year survival rate is poor. For this reason, researchers are constantly looking for new diagnostic methods, including tumor markers which can accelerate diagnosis. The determination of tumor markers level could be also useful in the evaluation of remissions, monitoring recurrences and metastases. Investigations also provide novel therapeutic targets related, for example, to the molecular type of tumor, which would reduce the invasiveness and improve the quality of patient's life. This article presents and characterizes previously known and useful tumor markers associated with gastric cancer.Rak żołądka jest powszechnie występującym nowotworem złośliwym. Stanowi jedną z głównych przyczyn przedwczesnego zgonu z powodu chorób nowotworowych na świecie. Proces kancerogenezy może trwać nawet 30 lat, dlatego rak żołądka rozwija się przede wszystkim po 50. roku życia, jednakże zachorowania zdarzają się w każdej grupie wiekowej. Etiologia tej choroby jest bardzo złożona, składają się na nią m.in. czynniki środowiskowe, przetrwałe zakażenie bakterią Helicobacter pylori oraz palenie tytoniu. Szacuje się, że około 20% zachorowań jest związanych z występowaniem rodzinnym. Objawy, które mogą świadczyć o toczącym się procesie nowotworowym są nieswoiste. Ze względu na mało specyficzne objawy, rak żołądka jest zazwyczaj rozpoznawany w zaawansowanym stadium, kiedy jedynym skutecznym sposobem leczenia jest całkowita resekcja zajętego narządu, a odsetek 5–letnich przeżyć jest niski. Z tego względu, badacze wciąż poszukują nowych metod diagnostycznych, w tym markerów nowotworowych, które przyśpieszyłyby proces rozpoznania choroby. Oznaczanie stężenia markerów nowotworowych może być także przydatne w ocenie remisji, monitorowaniu wznowy oraz przerzutów. Badane są też nowe cele terapeutyczne, związane np. z typem molekularnym nowotworu, które pozwoliłyby ograniczyć inwazyjne zabiegi i polepszyć komfort życia pacjenta. W niniejszym artykule przedstawiono i scharakteryzowano dotychczas poznane oraz użyteczne markery nowo– tworowe dla raka żołądka

Evaluation of ABCC1 gene expression, encoding MRP1, in patients with depression

Introduction: According to the World Health Organization, depression is the most common mental disorder. Over 350 million people suffer from this disease, making it the fourth most important health problem in the world. Multidrug resistance protein 1 (MRP1), encoded by ABCC1 gene is co–creating the blood– brain barrier and blood–cerebrospinal fluid barrier. Changes in the expression of ABCC1 can influence the bioavailability of antidepressants, and thereby, determine the efficacy of the treatment. The aim of the study was to evaluate ABCC1 gene expression in patients with depression. Material and methods: We analyzed 32 samples of RNA isolated from the leukocytes of peripheral blood, derived from Babinski Hospital patients suffering from recurrent depressive episodes. The investigated gene expression was assessed using the technique of Real–time PCR. Results: On the basis of qualitative analysis, ABCC1 gene expression has been shown in 30 samples, and the GAPDH gene expression in 32 samples. All 32 samples were quantitatively analyzed. The level of ABCC1 gene expression relative to GAPDH gene was variable among all 32 cases. An average, positive and significant correlation (r = 0.3988) between age of the patients and the relative expression level of ABCC1 has been shown. Conclusions: The relative level of gene expression increases with the age of the patients with depression. The obtained results require confirmation in a larger group of patients.Wstęp: Według Światowej Organizacji Zdrowia depresja jest najczęściej występującym zaburzeniem psychicznym. Ponad 350 milionów ludzi na całym świecie cierpi na tę chorobę, co czyni ją czwartym z najważniejszych obecnie problemów zdrowotnych. Białko oporności wielolekowej 1 (MRP1), kodowane przez gen ABCC1, jest elementem współtworzącym barierę krew–mózg oraz krew–płyn mózgowo–rdzeniowy. Zmiana ekspresji genu ABCC1 może wpłynąć na biodostępność leków antydepresyjnych, a tym samym na skuteczność farmakoterapii. Celem pracy była ocena ekspresji genu ABCC1 u pacjentów chorych na depresję. Materiał i metody: Badaniu poddano 32 próby RNA wyizolowane z leukocytów krwi obwodowej pacjentów chorych na depresję, leczonych w szpitalu im. Babińskiego w Łodzi. Ekspresja badanego genu została oceniona przy użyciu techniki Real–time PCR. Wyniki: Na podstawie analizy jakościowej wykazano ekspresję genu ABCC1 w 30 próbach, a genu referencyjnego GAPDH w 32 próbach. Wszystkie 32 próby poddano analizie ilościowej. Poziom ekspresji genu ABCC1 względem genu GAPDH we wszystkich 32 przypadkach był wysoce zróżnicowany. Wykazano przeciętną, dodatnią, istotną statystycznie korelację (r = 0,398 pomiędzy wiekiem pacjentów, a względnym poziom ekspresji genu ABCC1. Wnioski: Względny poziom ekspresji genu ABCC1 jest tym wyższy, im wyższy jest wiek pacjentów w grupie badanej. Uzyskane w pracy wyniki badań wymagają potwierdzenia na większej grupie pacjentów

Analysis of the incidence of ABCG2 gene C421A polymorphism in cases of gastric cancer in the Łódź region

Introduction: In the present thesis the association between the variants of C421A polymorphism of ABCG2 gene and the risk of gastric cancer development were searched. The occurrence of polymorphic variant 421 C > A leads to the weakening of the activity of BCRP protein which is encoded by the ABCG2 gene. Due to the presence of BCRP protein in the gastrointestinal tract and its protective role the reduction of the amount of BCRP protein which is the result of the tested polymorphism may lead to the increased predisposition to cancer development. The main aim of this study was to compare the frequency of C421A polymorphism genotypes between the examined and the control groups. Material and methods: The material for the research consisted of DNA isolated from 19 scraps of the tumor tissue taken from patients with gastric cancer and 44 samples of peripheral blood collected from healthy individuals. DNA was extracted from the tested materials by microcolumn-method. Then the obtained samples of DNA were subjected to polymerase chain reaction (PCR) to amplify the ABCG2 gene fragment. To determine C421A polymorphism genotypes ABCG2 gene fragments amplified by PCR the were analyzed by RFLP method using an digestive enzyme MseI. Results: All the examined patients irrespectively of gender, age and clinical stage showed the presence of genotype C/C, which is homozygous wild for C421A polymorphism. All 44 persons from the control group also showed the presence of genotype C/C. Conclusions: No differences in the occurrence of C421A genotypes between the study group and the control group were found. In both the groups 100% of the results for the C/C genotype were obtained. Due to the presence of only one genotype (C/C) for the C421A polymorphism in all the patients no relationship between the occurrence of C421A genotypes and tumor stage, age and gender of the examined patients was evaluated. Although no correlation between the C421A polymorphism and the susceptibility to the development of gastric cancer was found the exclusion of the participation of BCRP protein in the pathogenesis of this disease is possible only after the increase of the number of analyses on larger groups of respondents.Wstęp: W niniejszej pracy poszukiwano związku między występowaniem wariantów dla polimorfizmu C421A w obrębie genu ABCG2, a zwiększonym ryzykiem rozwoju raka żołądka. Występowanie wariantu polimorficznego 421 C>A prowadzi do zmniejszonej aktywności białka BCRP, kodowanego przez gen ABCG2. Ze względu na obecność białka BCRP w obrębie przewodu pokarmowego i związaną z tym rolę ochronną, zmniejszenie ilości białka BCRP będące efektem badanego polimorfizmu może zwiększać predyspozycję do rozwoju raka. Głównym celem pracy było porównanie częstości występowania genotypów dla polimorfizmu C421A pomiędzy grupą badaną a kontrolną. Materiał i metody: Materiał do badań stanowiło DNA wyizolowane z 19 mrożonych skrawków tkankowych pobranych od pacjentów z rakiem żołądka i z 44 prób krwi obwodowej pobranych od osób zdrowych. Izolację DNA z badanych materiałów biologicznych przeprowadzono wykorzystując metodę kolumienkową. Następnie, uzyskane próby DNA poddawano reakcji łańcuchowej polimerazy, by powielić badany fragmentu genu ABCG2. Celem określenia genotypów dla polimorfizmu C421A na mnożony w reakcji PCR fragment genu ABCG2 poddawano analizie metodą RFLP z użyciem enzymu MseI. Wyniki: U wszystkich badanych, bez względu na płeć, wiek oraz stopień zaawansowania klinicznego raka żołądka, wykazano obecność genotypu C/C, czyli homozygoty dzikiej dla polimorfizmu C421A. Wśród 44 osób z grupy kontrolnej również u wszystkich stwierdzono genotyp C/C. Wnioski: Nie wykazano różnic w częstości występowania genotypów dla polimorfizmu C421A między grupą badaną i kontrolną. W obydwu grupach zaobserwowano tylko jeden z możliwych genotypów dla badanego polimorfizmu - genotyp C/C. Z uwagi na stwierdzenie u wszystkich badanych osób z obu grup tylko genotypu C/C dla polimorfizmu C421A nie oceniano zależności między występowaniem genotypów C421A a stopniem zaawansowania nowotworu, wiekiem i płcią badanych osób. Mimo, że nie wykazano korelacji między polimorfizmem C421A a podatnością na rozwój raka żołądka, jednoznaczne wykluczenie udziału białka BCRP w patogenezie tej jednostki chorobowej jest możliwe dopiero po przeprowadzeniu większej ilości analiz na większych grupach badanych

Preliminary evaluation of T-129C polymorphism in the promoter region of the ABCB1 gene in patients with gastric adenocarcinoma

Introduction: Gastric cancer is one of the most common tumors in the world. The pathogenesis of this cancer is not fully known. Among the risk factors for the disease there are: Helicobacter pylori infection, diet, alcohol consumption and smoking. On the other hand, it is assumed that the pathogenesis of the development is related to interdependence between risk factors and patient's genetic susceptibility. One of the genes involved in carcinogenesis can be ABCB1, whose protein product, P–glycoprotein, plays a protective function by removing xenobiotics from the cell into the extracellular environment. Polymorphisms of this gene can alter the protein product, leading to the loss of protective function and the increased risk of diseases development. Polymorphism T–129C can influence the formation of mRNA and thus, lead to changes in the quantity/activity of P–glycoprotein. The aim of this study was to evaluate the polymorphism at position T–129C in promoter region of ABCB1 gene in the group of patients with gastric adenocarcinoma. Material and methods: The material for the study consisted of 19 samples of the tissue taken from patients with gastric adenocarcinoma and 68 samples of peripheral blood taken from healthy donors. Genotyping of the T–129C was performed by using restriction fragments polymorphism method. Results: No statistically significant differences between the group of patients with gastric cancer and the healthy individuals were found. Conclusions: The polymorphism on position T–129C in promoter region of ABCB1 gene did not affect the risk of the development of gastric cancer. The obtained results require confirmation by investigating a large cohort of patients.Wstęp: Rak żołądka jest jedną z najczęstszych chorób nowotworowych na świecie. Patogeneza tego nowotworu nie została w pełni poznana. Wśród czynników ryzyka rozwoju choroby wymienia się: zakażenie Helicobacter pylori, niewłaściwą dietę, spożywanie alkoholu czy palenie tytoniu. Z drugiej strony, zakłada się, iż patogeneza rozwoju tego raka jest związana ze współzależnością pomiędzy czynnikami ryzyka a predyspozycją genetyczną samego pacjenta. Jednym z genów zaangażowanych w proces kancerogenezy może być ABCB1, którego produkt białkowy – glikoproteina P, poprzez usuwanie ksenobiotyków z komórki do środowiska pozakomórkowego, spełnia funkcję ochronną. Polimorfizmy tego genu mogą zmieniać jego produkt białkowy prowadząc do utraty funkcji ochronnej i zwiększonego ryzyka rozwoju chorób. Polimorfizm w pozycji T–129C może wpływać na powstawanie mRNA, a tym samym prowadzić do zmiany ilości/aktywności glikoproteiny P. Celem pracy była ocena polimorfizmu w regionie promotorowym genu ABCB1 w pozycji T–129C u pacjentów z gruczolakorakiem żołądka. Materiał i metody: Materiał do badania stanowiło 19 skrawków tkankowych pobranych od pacjentów z gruczolakorakiem żołądka oraz 68 prób krwi obwodowej pobranych od zdrowych krwiodawców. Genotypowanie w pozycji T–129C przeprowadzono za pomocą techniki polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych. Wyniki: Nie wykazano istotnych statystycznie różnic pomiędzy grupą pacjentów z rakiem żołądka a grupą osób zdrowych. Wnioski: Polimorfizm w pozycji T–129C regionu promotorowego genu ABCB1 nie ma związku z rozwojem raka żołądka. Uzyskane w pracy wyniki badań wymagają potwierdzenia na większej grupie pacjentów