Avaliação dos efeitos do ativador da enzima conversora de Angiotensina 2 (DIZE) na pressão arterial de ratos

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-14T17:05:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_para_vers_o_final.pdf: 1521985 bytes, checksum: 35f1c89a0e66ae6daa9a1dad3fbb61aa (MD5) Previous issue date: 8Tradicionalmente, o Sistema Renina-Angiotensina (SRA) é considerado um sistema endócrino formado por reações enzimáticas que exerce um papel importante no controle da função cardiovascular. Novos componentes como, por exemplo, a Angiotensina-(1-7) [Ang-(1-7)], vêm sendo descobertos e adicionados a este sistema. A enzima conversora de Angiotensina (ECA) 2 é a principal enzima formadora de Ang-(1-7) e é importante na manutenção do equilíbrio do SRA. Estudos prévios demonstraram que a ativação da ECA2 endógena, usando o composto XNT, resulta em vários efeitos benéficos no sistema cardiovascular. Recentemente, foi descrito um segundo ativador da ECA2, o aceturato de diminazeno (DIZE), que possui propriedades físico-químicas mais favoráveis. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do DIZE na pressão arterial (PA) e freqüência cardíaca (FC) de ratos, além de analisar os mecanismos de ação deste composto nas alterações destes parâmetros. Também foram analisados os efeitos do DIZE nas arteríolas no leito vascular mesentérico através da técnica de Microscopia Intravital. Ratos Wistar machos (200-300g) foram submetidos a cirurgias de implantação de cânulas na artéria femoral para o registro da PA e FC e na veia femoral para injeção de doses crescentes do DIZE (0,5; 5, 10, 20 mg/kg) e de inibidores e bloqueadores do SRA. Este experimento foi realizado em ratos acordados e 24h após as cirurgias. Os resultados mostraram que o DIZE causa uma redução na PA com conseqüente aumento na FC de maneira dose-dependente. Para avaliar seus mecanismos de ação, grupos adicionais de ratos foram pré-tratados com o bloqueador do receptor Mas A-779 (10nmol/kg i.v.), com o inibidor da síntese de óxido nítrico (NO) L-NAME (10mg/kg i.v.), com o inibidor da síntese de prostaglandinas Indometacina (10mg/kg i.v.), com o inibidor da ECA Captopril (10mg/kg i.v.) ou com o bloqueador do receptor AT1 Losartan (1mg/kg i.v.) 15 minutos antes da administração do DIZE (5mg/kg). Os resultados obtidos mostraram que a utilização do A-779, L-NAME, Indometacina, Captopril e Losartan antes da injeção do DIZE não bloqueou a queda na PA e o aumento na FC. Finalmente, os resultados da Microscopia Intravital revelaram que o DIZE causa uma queda no fluxo nas arteríolas no leito vascular mesentérico sem alteração significativa no diâmetro arteriolar. Assim, os resultados desse estudo indicam que o DIZE é um potente hipotensor e que este efeito é independente dos receptores Mas e AT1, da ECA, da liberação de NO e da síntese de prostaglandinas.Traditionally, the Renin-Angiotensin System (RAS) is considered an endocrine system formed by enzymatic pathways and it plays an important role in the cardiovascular function. Nowadays, new components such as the heptapeptide angiotensin-(1-7) [Ang-(1-7)] have been added to this system. Angiotensin-converting enzyme (ACE) 2 is the main Ang-(1-7)-forming enzyme and it is important to maintain the balance of the RAS. Previous studies have shown that the activation of endogenous ACE2 using the compound XNT results in several beneficial effects in the cardiovascular system. Recently, a second ACE2 activator was described, the diminazene aceturate (DIZE), which has better physical and chemical properties. Thus, the objective of this study was to evaluate the effects of DIZE on blood pressure (BP) and heart rate (HR) of rats and to analyze the mechanisms of action by which this compound changes these parameters. Also, we analyzed the effects of DIZE on arterioles from the mesenteric vascular bed using the Intravital Microscopy technique. Male Wistar rats (200-300g) underwent surgeries for implantation of cannulas into the femoral artery for recording BP and HR and into the femoral vein for the injection of increasing doses of DIZE (0.5, 5, 10, 20mg/kg) and RAS inhibitors and blockers. This experiments were performed in awake rats 24 h after the surgery. The results showed that DIZE causes a dose-dependent reduction in BP accompanied by increase in HR. In order its mechanisms of action, additional groups of rats were pre-treated with the Mas receptor antagonist A-779 (10nmol/kg, i.v.), the nitric oxide (NO) synthase inhibitor L-NAME (10mg/kg, i.v.), the prostaglandins inhibitor Indomethacin (10mg/kg, i.v.), the ACE inhibitor Captopril (10mg/kg, i.v.) or the AT1 receptor antagonist Losartan (1mg/kg, i.v.) 15 min before the administration of DIZE (5mg/kg). The results showed that A-779, L-NAME, Indomethacin, Captopril and Losartan do not block the effects of DIZE on BP and HR. Finally, the Intravital Microscopy results revealed that DIZE causes a decrease in blood flow of arterioles of the mesenteric vascular bed without significant changes in the arteriolar diameters. Therefore, our results indicated that DIZE is a potent hypotensive compound and this effect is independent of Mas and AT1 receptors, ACE, NO release and prostaglandin synthesis

Participação da enzima conversora de angiotensina 2 na fisiopatologia do sistema cardiovascular: papel nos efeitos do treinamento físico e na hipertensão arterial

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-13T15:56:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_vers_o_final_marilda.pdf: 2265023 bytes, checksum: 56a2a7624675dc379125b7580df8bffe (MD5) Previous issue date: 30Estudos clínicos e experimentais mostram que o sistema renina angiotensina desempenha um papel fundamental na manutenção da homeostase corporal e que a ativação da enzima conversora de angiotensina 2 (ECA2) endógena resulta em vários efeitos benéficos no sistema cardiovascular. Recentemente, um novo ativador da ECA2, chamado Aceturato de Diminazeno (DIZE), foi descrito. Neste trabalho foi avaliado as ações desse composto em parâmetros cardiovasculares e renais de ratos submetidos ao treinamento físico ou a hipertensão renovascular, bem como os mecanismo de ações na vasodilatação de anéis aórticos. Para isso, ratos Wistar foram submetidos aotreinamento físico de natação ou foram submetidos à cirurgia de 2 rins 1 clipe para induzir hipertensão renovascular. Os animais foram tratados por 4 semanas com salina, DIZE ou captopril via gavagem. Os resultados mostraram que o DIZE não interferiu na hipertrofia cardíaca fisiológica induzida pelo treinamento físico. Analisando os animais com hipertensão renovascular, foi observado que o DIZE causou uma diminuição na pressão arterial semelhante ao efeito hipotensor causado pelo captopril. Além disso, este composto também impediu o desenvolvimento de hipertrofia cardíaca, fibrose cardíaca e disfunção renal induzida pela hipertensão. A técnica de vasos isolados revelou que os efeitos vasodilatadores do DIZE são dependentes de ativação do receptor Mas e da liberação de óxido nítrico. Assim, esses dados sugerem que o DIZE desempenha um papel importante na homeostasia dos sistemas cardiovascular e renal, possivelmente por um mecanismo envolvendo Mas e óxido nítrico.Clinical and experimental studies have shown that the renin-angiotensin system plays a key role in maintaining the homeostasis and that activation of endogenous angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) results in various beneficial effects in the cardiovascular system. Recently, a new ACE2 activator, named Diminazene Aceturate (DIZE), was discovered. This present studyevaluated the actions of this compound in cardiovascular and renal parameters of rats submitted to physical training or renovascular hypertension, as well as the mechanisms of action underling the vasodilation of isolated aortic rings. For this, Wistar rats were submitted to swimming training or to 2-kidney 1-clip surgery to induce renovascular hypertension. Animals were treated for 4 weeks with saline, captopril or DIZE by gavage. The results showed that DIZE did not interfere in the cardiac physiological hypertrophy induced by physical training.DIZE caused a significant decrease in blood pressure similar to the hypotensive effect induced by captopril in hypertensive rats. In addition, this compound also prevented the development of cardiac hypertrophy, cardiac fibrosis and renal dysfunction provoked by hypertension. The isolated vessels technique revealed that the vasodilatory effects of DIZE are dependent on Mas receptor and nitric oxide release. Thus, these data suggest that DIZE plays an important role in the homeostasis of the cardiovascular and renal systems, likely by a mechanism involving Mas and nitric oxide

Hydroxyurea alters circulating monocyte subsets and dampens its inflammatory potential in sickle cell anemia patients

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2019-11-14T12:12:13Z No. of bitstreams: 1 Guarda, C.C. Hydroxyuera....pdf: 3656637 bytes, checksum: 14aab9fd62e1f2949b605d6f5956c6e4 (MD5)Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2019-11-14T12:49:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Guarda, C.C. Hydroxyuera....pdf: 3656637 bytes, checksum: 14aab9fd62e1f2949b605d6f5956c6e4 (MD5)Made available in DSpace on 2019-11-14T12:49:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guarda, C.C. Hydroxyuera....pdf: 3656637 bytes, checksum: 14aab9fd62e1f2949b605d6f5956c6e4 (MD5) Previous issue date: 2019-01-15Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Inflamação e Biomarcadores. Salvador, BA, Brasil / Multinational Organization Network Sponsoring Translational and Epidemiological Research Initiative. Salvador, BA, Brazil / Faculdade de Tecnologia e Ciências. Curso de Medicina. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Fundação de Hematologia e Hemoterapia do Estado da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Inflamação e Biomarcadores. Salvador, BA, Brasil / Multinational Organization Network Sponsoring Translational and Epidemiological Research Initiative. Salvador, BA, Brazil / Faculdade de Tecnologia e Ciências. Curso de Medicina. Salvador, BA, Brasil.Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Inflamação e Biomarcadores. Salvador, BA, Brasil / Multinational Organization Network Sponsoring Translational and Epidemiological Research Initiative. Salvador, BA, Brazil / Faculdade de Tecnologia e Ciências. Curso de Medicina. Salvador, BA, Brasil.Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Inflamação e Biomarcadores. Salvador, BA, Brasil / Multinational Organization Network Sponsoring Translational and Epidemiological Research Initiative. Salvador, BA, Brazil / Faculdade de Tecnologia e Ciências. Curso de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Universidade Salvador. Laureate Universities. Salvador, BA, Brasil / Escola Bahiana de Medicina e Saúde Pública. Salvador, BA, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Laboratório de Investigação em Genética e Hematologia Translacional. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil.Sickle cell anemia (SCA) is a hemolytic disease in which vaso-occlusion is an important pathophysiological mechanism. The treatment is based on hydroxyurea (HU), which decreases leukocyte counts and increases fetal hemoglobin synthesis. Different cell types are thought to contribute to vaso-occlusion. Nevertheless, the role of monocytes subsets remains unclear. We investigated frequencies of monocytes subsets in blood and their response to HU therapy, testing their ability to express pro-inflammatory molecules and tissue factor (TF). We identified major changes in monocyte subsets, with classical monocytes (CD14++CD16-) appearing highly frequent in who were not taking HU, whereas those with patrolling phenotype (CD14dimCD16+) were enriched in individuals undergoing therapy. Additionally, HU decreased the production of TNF-α, IL1-β, IL-6, IL-8 as well as TF by the LPS-activated monocytes. Likewise, frequency of TF-expressing monocytes is increased in patients with previous vaso-occlusion. Moreover, activated monocytes expressing TF produced several pro-inflammatory cytokines simultaneously. Such polyfunctional capacity was dramatically dampened by HU therapy. The frequency of classical monocytes subset was positively correlated with percentage cytokine producing cells upon LPS stimulation. These findings suggest that classical monocytes are the subset responsible for multiple pro-inflammatory cytokine production and possibly drive inflammation and vaso-occlusion in SCA which is damped by HU