Mutations induced by a chemical in strains of Escherichia coli to the attenuation and vaccine development against avian colibacillosis

A colibacilose aviária caracteriza-se como uma infecção extra-intestinal secundária a outros agentes. É responsável por grandes perdas econômicas na criação de aves comerciais, sendo sua prevenção fundamental para minimizar prejuízos. O objetivo deste estudo foi atenuar cepas virulentas de Escherichia coli aviárias, por indução de mutagênese química. Foram selecionadas nove (09) cepas pertencentes à coleção de cultura do Laboratório de Ornitopatologia da FMVZ-USP. Todas as cepas estudadas foram resistentes à eritromicina, lincomicina, oxaciclina, penicilina, tiamulina e tilmicosin e sensíveis ao ácido nalidíxico, cloranfenicol, ciprofloxacina, colistina, enrofloxacina, florfenicol e gentamicina. Ocorreram resistências nas amostras analisadas de 33,33%, 22,22%, 11,11%, 55,55%, 66,66%, 77,77%, 33,33%, 22,22%, 22,22% e 33,33%, respectivamente, a amoxacilina, a ampicilina, a doxaciclina, a espectiomicina, a estreptomicina, a lincomicina-espectiomicina, a neomicina, a rifampicina, a tetraciclina e ao trimetropin-sulfa. Induziu-se resistência a estreptomicina ou rifampicina ou ácido nalidíxico como marcadores. Não houve o desenvolvimento de resistências a outros antimicrobianos testados, após a exposição a substância mutagênica. Os resultados da amplificação dos genes por PCR, mostraram que todas as cepas foram negativas para papC, cnf e astA e todas foram positivas para iuc e irp2. Duas cepas foram positivas para os genes vat, cinco para iss, quatro para o gene tsh, uma para cvi/cva, duas para sfaI e uma para astA. Após o uso da substância mutagênica duas cepas apresentaram reações negativas para os genes tsh, cvi/cva e sfaI e uma cepa para o gene astA. No teste de AFLP verificaram-se diferenças em similaridade de bandas em oito (08) das nove (09) cepas, quando comparadas com a amostra tratada com a substância mutagênica, sendo que este indice variou de 40% a 96,3%. Embora no teste de patogenicidade em pintinhos de um dia de idade não tenha ocorrido diferenças significativas na mortalidade nos diferentes grupos estudados, houve alteração de patogenicidade em cinco cepas expostas à substância mutagênica. Ocorreram reduções significativas em relação ao escore de lesões quando os grupos foram comparados (p<0,05), indicando atenuação pela substância mutagênica.The avian colibacillosis is characterized as an extraintestinal infection which is secondary to other agents. It is responsible for considerable economic loss in the breeding of commercial birds, making its prevention essential to reducing damages. The aim of this study was to attenuate viral strains of avian Escherichia coli, using chemical mutagenesis induction. Nine (09) strains were selected from the culture collection of the Ornitopathology Laboratory of the School of Veterinary Medicine of the University of São Paulo. All analyzed strains were resistant to erythromycin, lincomicin, oxacillin, penicillin, tiamulin and tilmicosin and they were sensitive to nalidixic acid, chloramphenicol, ciprofloxacin, colistin, enrofloxacin, florfenicol and gentamicin. The analyzed samples presented the following resistance levels: 33.33%, 22.22%, 11.11%, 55.55%, 66.66%, 77.77%, 33.33%, 22.22%, 22.22% and 33.33% to, respectively, amoxicillin, ampicillin, doxycycline, spectinomycin, streptomycin, lincomycin-spectinomycin, neomycin, rifampicin, tetracycline and trimethoprim-sulfa. The resistance to streptomycin or rifampicin or nalidixic acid was induced as a marker. There was no development of resistance to other tested antimicrobials after the exposure to the mutagenic substance. The results of the PCR gene amplification showed that all strains were negative for papC, cnf and astA and they were all positive for iuc and irp2. Two strains were positive for the vat genes, five for iss, four for the tsh gene, one for cvi/cva, two for sfaI and one for astA. After using the mutagenic substance, two strains presented negative reactions for the tsh, cvi/cva and sfaI genes and one strain for the astA gene. In the AFLP test, differences were found for band similarity in eight (08) out of nine (09) strains, when compared with the samples treated with the mutagenic substance and this rate varied from 40% to 96.3%. Although the pathogenicity test in one-day-old chicks did not present significant differences in the mortality rate in the different analyzed groups, there was a pathogenicity alteration in five strains exposed to the mutagenic substance. There were significant reductions regarding the lesion scores when the groups were compared (p<0,05), indicating an attenuation due to the mutagenic substance

Avaliação microbiológica de cortes de frangos comercializados na cidade de São Paulo.

O consumo de carnes de frango tem aumentado nas últimas décadas em função do seu alto valor nutritivo e de seu custo relativamente mais acessível, quando comparado a outras carnes. Entretanto alguns micro-organismos veiculados por este alimento causam preocupação pelo potencial de produção de toxinfecções alimentares. Dentre estes micro-organismos destacam-se os coliformes, as salmonelas e os estafilococos, que podem ocasionar problemas gastrointestinais, inclusive causando a morte de alguns indivíduos. A manipulação destes alimentos e as más condições do seu armazenamento contribuem para a contaminação dos mesmos ou propiciam a multiplicação de micro-organismos já existentes. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica de cortes de frango (coxa e sobrecoxa) comercializados em açougues da região leste da cidade de São Paulo no período de abril a maio de 2015. Foram avaliadas 10 amostras dos cortes através das análises microbiológicas: determinação do número mais provável (NMP) de coliformes, pesquisa de Salmonella spp. e de Staphylococcus spp. Das amostras analisadas nove foram positivas para Staphylococcus spp. sendo três destas identificadas como Staphylococcusaureus e duas destas amostras estavam acima do limite permitido pela legislação. Todas as amostras foram negativas para coliformes fecais e Salmonella spp. Em relação aos coliformes totais os valores variaram de 28 a >2,4 x 103 NMP/g. Os resultados obtidos indicaram que a contaminação desses alimentos pode ser um risco para os seres humanos e que há a necessidade do controle dos mesmos para que sejam evitados risco à saúde do consumidor

ASSESSMENT OF KNOWLEDGE ABOUT ORGANIC CHICKEN AND ITS CONSUMPTION IN SÃO PAULO CITY

The growing demand of society for safe food that promotes health, associated with sustainable production practices, opened a spot in the market for organic farming, which is a new regulated market and meets the needs of a concerned consumers with their own health and the impact of their choices on the environment and future generations. However, part of the population is actually unaware of what organic products represent. This study aimed to assess the level of knowledge about organic chicken and consumption by residents of São Paulo. It was interviewed 200 randomly chosen people, of both genders, different ages and education levels, it was submitted by questionnaire with 10 closed questions. The results showed that 43% of people had knowledge about organic chicken, and only 27.50% have consumed it, so is not well known by most respondents. It was possible to identify many aspects related to the product, often mistakenly the organic chicken was classified as healthy by 75.5% of respondents. Also it was found negative factors associated to the organic food consumption, such as the high cost of the product, which was mentioned by many of the interviewees, which still represents a major impediment in the consumer's purchasing decision, even with all the values added to the product. Further details regarding this livestock system, like showing it is environmentally friendly, socially fair and not merely without chemical residues could contribute to greater awareness of the added benefits and encourage the consumption in the internal market

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DE EXTRATOS DE HELIANTHUS TUBEROSUS L. E SMALLANTHUS SONCHIFOLIUS EM CAMA DE FRANGOS

A avicultura brasileira tem um papel importante no cenário internacional por produzir proteína animal de altíssima qualidade a um custo acessível. O aumento da produção nas últimas décadas tem influenciado positivamente nos aspectos sociais e econômicos do agronegócio. Entretanto, os aspectos ambientais têm se tornado motivo de preocupação na cadeia produtiva principalmente com a alta produção anual de toneladas de cama de frango com potencial de disseminação de micro-organismos a outras aves e seres humanos, além de impactos ambientais. Desta forma é necessário haver algum tipo de tratamento da mesma para minimizar possíveis contaminações de agentes patogênicos. Algumas plantas têm potencial para serem utilizadas para este fim como o Helianthus tuberosus L. e Smallanthus sonchifolius que sintetizam substâncias com comprovadas propriedades antimicrobianas e de fácil preparação de seus extratos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação de extratos brutos dessas plantas em amostras de cama de frangos comerciais quanto à redução do número de bactérias aeróbias e anaeróbias. Realizou-se o tratamento de três amostras de cama de frango com extratos de ambas as plantas com 50 mg de massa seca/grama de cama. Através de análises microbiológicas comparou-se o número de bactérias anaeróbias e aeróbias nas amostras tratadas e nos controles após três e 24 horas. Os resultados demonstraram redução na carga bacteriana aeróbia e anaeróbia nas camas testadas. Novas concentrações de extratos e outros períodos de ação devem ser testados para avaliar a possível potencialização da ação das substâncias

PESQUISA DE INFECÇÕES PARASITÁRIAS COM POTENCIAL ZOONÓTICO EM ANIMAIS MANTIDOS EM HABITAÇÕES COLETIVAS

Cortiços são habitações coletivas alternativas para famílias de baixa renda que geralmente apresentam alta taxa de lotação e condições higiênicas precárias, sendo permitida em alguns deles a criação de animais domésticos. Este estudo objetivou avaliar a presença de endoparasitas de importância zoonótica em amostras de fezes recolhidas de animais de estimação em cortiços na cidade de São Caetano do Sul. Foram visitadas 38 habitações coletivas no período de setembro a dezembro de 2008 e de 17 delas onde eram mantidos animais, 19 amostras de fezes foram coletadas dos animais presentes. As amostras foram analisadas aplicando-se método de concentração de oocistos, cistos ou ovos de parasitas e foi detectada positividade em 8 amostras, sendo que as espécies mais encontradas foram Giardia sp. em 6 das amostras (31,58%), seguido pelo nematódeo Toxocara sp. em 5 amostras (26,32%),  Ancylostoma sp. em 1 amostra (5,26%) e o protozoário Cystoisospora sp em 1 amostra (5,26%). Observou-se que 50% das amostras apresentaram contaminação simples e 50% contaminação mista, sendo que a associação mais encontrada foi Toxocara sp. e Giardia sp. Todas estas espécies podem causar zoonoses com exceção do protozoário Cystoisospora sp. Apesar do número reduzido de amostras, foram isoladas espécies de importância zoonótica, que podem causar doenças importantes como a Síndrome da Larva Migrans Visceral e retardo no desenvolvimento linear e cognitivo infantil. Palavras-chave: animais, habitações coletivas, parasitas, zoonose