Oestradiol-17β plasma concentrations after intramuscular injection of oestradiol benzoate or oestradiol cypionate in llamas (Lama glama)

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Llamas (<it>Lama glama</it>) are induced ovulators and the process of ovulation depends on dominant follicular size. In addition, a close relationship between behavioural estrus and ovulation is not registered in llamas. Therefore, the exogenous control of follicular development with hormones aims to predict the optimal time to mate. Oestradiol-17β (E₂) and its esters are currently used in domestic species, including camelids, in synchronization treatments. But, in llamas, there is no reports regarding the appropriate dosages to be used and most protocols have been designed by extrapolation from those recommended for other ruminants. The aim of the present study was to characterize plasma E₂concentrations in intact female llamas following a single intramuscular (i.m.) injection of two oestradiol esters: oestradiol benzoate (EB) and oestradiol cypionate (ECP).</p> <p>Methods</p> <p>Twelve non pregnant and non lactating sexually mature llamas were i.m. injected on day 0 with 2.5 mg of EB (EB group, n = 6) or ECP (ECP group, n = 6). Blood samples were collected immediately before injection, at 1, 6, 12, 24 h after treatment and then daily until day 14 post injection. Changes in hormone concentrations with time were analyzed in each group by analysis of variance (ANOVA) using a repeated measures (within-SS) design. Plasma E₂concentrations and area under the concentration-time curve (AUC) values were compared between groups by ANOVA. In all cases a Least-Significant Difference test (LSD) was used to determine differences between means. Hormonal and AUC data are expressed as mean ± S.E.M.</p> <p>Results</p> <p>Peak plasma E₂concentrations were achieved earlier and were higher in EB group than in ECP group. Thereafter, E₂returned to physiological concentrations earlier in EB group (day 5) than in ECP group (day 9). Although plasma E₂profiles differed over time among groups there were no differences between them on AUC values.</p> <p>Conclusions</p> <p>The i.m. injection of a single dose of both oestradiol esters resulted in plasma E₂concentrations exceeding physiological values for a variable period. Moreover, the plasma E₂profiles observed depended on the derivative of oestradiol administered. This basic information becomes relevant at defining treatment protocols including oestrogens in llamas.</p

Receptor a estrógenos beta en carcinomas mamarios caninos: su relación con el grado histológico de malignidad

Los tumores mamarios representan el tipo tumoral más frecuente en la hembra canina, siendo aproximadamente la mitad de ellos de naturaleza maligna. Las hormonas esteroides sexuales (estrógenos y progesterona) son consideradas el principal factor de riesgo para su desarrollo (Misdorp, 2002). Ambas hormonas ejercen sus efectos a través de su unión a receptores nucleares, y para el caso de los estrógenos, existen dos subtipos de receptores, denominados alfa (REa) y beta (REb). Su presencia ha sido demostrada en mamas caninas normales y neoplásicas. Estudios previos indican que la expresión del REα en tumores mamarios malignos se asocia con indicadores de buen pronóstico, como tamaño tumoral menor a 3 cm, y ausencia de metástasis ganglionar y a distancia (Nieto y col., 2000). Por su parte, la significancia de la expresión del RE beta es actualmente incierta, existiendo controversias al respecto. Un estudio reporta una mayor expresión del RE beta en tumores benignos que en los malignos (Martín de las Mulas y col., 2004) mientras que otros autores no han encontrado diferencias significativas entre ambos tipos tumorales (Port Louis y col., 2012). Asimismo, en los tumores malignos, se desconoce la posible relación entre la expresión de este receptor y los parámetros clínicos y/o patológicos de valor pronóstico para el animal.Objetivo: Evaluar la expresión del RE beta en tumores mamarios malignos caninos y determinar si existen diferencias significativas en su expresión entre diferentes Grados Histológicos de Malignidad (GHM).Diseño experimental: Se realizó un diseño no experimental, de tipo descriptivo.Materiales y métodos: Se obtuvieron 20 muestras de tumores caninos luego de la mastectomía, los cuales fueron diagnosticados por histología como carcinomas simples. La determinación del GHM se realizó a través del sistema Ellston y Ellis (Nottingham) utilizado en la graduación del cáncer mamario humano. Este sistema tiene en cuenta tres características morfológicas (formación de túbulos, pleomorfismo nuclear y recuento mitótico) y permite clasificar a los carcinomas en Grado I (bien diferenciado), Grado II (moderadamente diferenciado) o Grado III (pobremente diferenciado). A mayor GHM, peor es el pronóstico de vida para el paciente. Asimismo, las muestras fueron procesadas usando la técnica inmunohistoquímica avidina-biotina-peroxidasa para la determinación del REβ. Se utilizó un anticuerpo primario específico para el RE beta (Novocastra, Clone EMR02, Leyca Biosystems, UK). La expresión del mismo se evaluó en las células epiteliales tumorales, determinando el porcentaje de células positivas. El análisis de imagen se realizó por dos observadores independientes y se analizaron 10 campos por muestra con un aumento de 1000X. Para el análisis estadístico, se utilizó una prueba de Chi-cuadrado de Pearson. Se consideraron diferencias estadísticamente significativas con p menor o igual 0,05.Resultados: De los 20 carcinomas analizados, 9 presentaron GHM I, 6 fueron GHM II, y 5 fueron Grado III. Con respecto a la expresión inmunohistoquímica del REβ, en los tumores de Grado I se expresó en un 13%, en los de Grado II se expresó en un 20%, y en aquellos de Grado III, la expresión fue del 31% (p ≤ 0,05) (Figura 1).Conclusiones y relevancia clínica: La mayor expresión del RE beta se observó en aquellos carcinomas que presentaron GHM III. Este dato coincide con un reporte previo del grupo, en el que la expresión del RE beta fue más frecuente en aquellos tumores malignos que presentaban indicadores de pronóstico desfavorable (estadio clínico IV y afección de linfonodos regionales) (Benavente y col., 2015). A futuro, sería de utilidad realizar estudios con un mayor número de casos, y que tengan en cuenta la sobrevida del paciente, para conocer el verdadero valor pronóstico del RE beta en cáncer mamario canino.Fil: Benavente, Micaela Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Bianchi, Carolina Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Denzoin Vulcano, L. A.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatología; ArgentinaFil: Aba, Marcelo Alfredo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaII Congreso Internacional de Medicina de Animales de CompañiaTandilArgentinaUniversidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinaria

Plasma and Ocular Prednisolone Disposition after Oral Treatment in Cats

Objective. To evaluate the plasma and aqueous humor disposition of prednisolone after oral administration in cats. Methods. Six cats were administered with a single oral dose of prednisolone (10 mg). Blood and aqueous humor samples were serially collected after drug administration. Prednisolone concentrations in plasma and aqueous humor were measured at 0.25, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0, 4.0, and 5.0 h after administration by a high-performance liquid chromatographic analytical method developed and validated for this purpose. Results. Mean ± standard error (SE) of maximum plasma prednisolone concentration (300.8 ± 67.3 ng/mL) was reached at 1 h after administration. Prednisolone was distributed to the aqueous humor reaching a mean peak concentration of 100.9 ± 25.5 ng/mL at 1.25 h after administration. The mean ± SE systemic and aqueous humor exposure (AUC) was 553.3 ± 120.0 ng*h/mL and 378.8 ± 64.9 ng*h/mL, respectively. A high AUCaqueous humor/AUCplasma ratio was observed (0.68 ± 0.13). The mean half-life time of elimination in plasma and aqueous humor was 0.87 ± 0.16 h and 2.25 ± 0.44 h, respectively. Clinical Significance. The observed high ratio between aqueous humor and plasma prednisolone concentrations indicates that extensive penetration of prednisolone to the anterior segment of the eye may occur. This is the first step that contributes to the optimization of the pharmacological therapeutics for the clinical treatment of uveitis

Estrogen and Progesterone Receptors and COX-2 Expression in Endometrial Biopsy Samples During Maternal Recognition of Pregnancy in Llamas (Lama glama)

Endometrial expression of oestrogen receptor-a (ERa),progesterone receptor (PR) and cyclooxigenase-2 (COX-2)was evaluated in non-pregnant and pregnant llamas during theperiod when luteolysis/maternal recognition of pregnancy isexpected to occur. Females (n = 28) were divided into twogroups: non-pregnant llamas were induced to ovulate with aBuserelin injection, and endometrial biopsies were obtained onday 8 (n = 5) or 12 (n = 5) post-induction of ovulation.Animals of the pregnant group (n = 18) were mated with afertile male. Pregnancy was confirmed by the visualization ofthe embryo collected by transcervical flushing in 5 of 9 animalson day 8 post-mating and by progesterone profile on day 12post-mating in 4 of 9 animals, when endometrial biopsies wereobtained. An immunohistochemical technique was used toevaluate receptors population and COX-2 expression.Pregnant llamas showed a higher percentage of positive cellsand stronger intensity for ERa than for non-pregnant llamasin stroma on day 8 and in the luminal epithelium on day 12post-induction of ovulation, while a deep decrease in endometrialPR population was reported in pregnant llamas on thatday in luminal and glandular epithelia and stroma. In theluminal epithelium, COX-2 expression was lower in pregnantthan in non-pregnant animals. Briefly, the increase of ERa inpregnant llamas gives further support to the hypothesis thatoestrogens are involved in the mechanism of maternal recognitionof pregnancy. Endometrial PR decrease in pregnantllamas might be a necessary event to allow the expression ofproteins involved in conceptus attachment, a mechanismwidely accepted in other species. Moreover, embryo seems toattenuate maternal PGF2a secretion during early pregnancy bydecreasing the endometrial expression of COX-2 in the luminalepithelium of pregnant llamas.Fil: Bianchi, Carolina Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Meikle, A.. Universidad del Uruguay; UruguayFil: Benavente, Micaela Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Álvarez, M.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires.. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatologia. Laboratorio de Endocrinologia; ArgentinaFil: Trasorras, Virginia Luz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Miragaya, Marcelo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Rodriguez, E.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires.. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatologia. Laboratorio de Endocrinologia; ArgentinaFil: Aba, Marcelo Alfredo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Oestrogen, Progesterone and Oxytocin Receptors and COX-2 Expression in Endometrial Biopsy Samples from the Induction of Ovulation to Luteolysis in Llamas (Lama glama)

Endometrial expression of oestrogen (ERa), progesterone (PR) and oxytocin receptor (OR) and cyclooxygenase-2 (COX-2) was evaluated from the induction of ovulation to luteolysis in llamas. Ovarian activity was daily assessed by ultrasonography in five females. Ovulation was induced immediately after the detection of an ovulatory follicle by a GnRH injection (Day 0). Endometrial samples were obtained by transcervical biopsies from the left and right horns on day 0 and days 4, 8, 10 and 12 post-GnRH. Blood samples were collected daily for progesterone and estradiol-17b determinations by RIA. An immunohistochemical technique was used to study receptors population and COX-2 expression which were then evaluated by two independent observers. The expression of ERa and PR was highest on day 0 in the luminal epithelium and stroma in association with high plasma estradiol-17b concentrations. Thereafter, a decrease in ERa population was registered on day 4 and a new increase of its expression was observed between days 8 and 12 in those cell types. Conversely, PR population was gradually down-regulated until its lowest expression was reached on day 10 post-GnRH in the luminal epithelium. Content of OR was similar throughout the study in all cell types. The expression of COX-2 was highest from day 8 to 12 post-GnRH in the luminal epithelium, in relation to the time of maximal PGF2a release. Both steroid receptors populations and COX-2 expression were similar between horns. Meanwhile, OR expression was higher in the right than in the left uterine horn. In summary, this study showed that the loss of endometrium sensitivity to progesterone by days 8?10 post-induction of ovulation and the concomitant increase of COX-2 expression could play a key role in the mechanism of luteolysis and somehow be related to the short corpus luteum lifespan of llamas.Fil: Bianchi, Carolina Paula. Consejo Nacional de Invest.cientif.y Tecnicas. Ctro Cientifico Tecnologico Conicet - Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil;Fil: Meikle, A.. Universidad de la República de Uruguay; Uruguay;Fil: Alvarez, M.A.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires.. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatologia. Laboratorio de Endocrinologia; Argentina;Fil: Benavente, Micaela Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico - CONICET- Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina;Fil: Cavilla, María Verónica. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires.. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatologia. Laboratorio de Endocrinologia; Argentina;Fil: Rodriguez, E.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires.. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina;Fil: Aba, Marcelo Alfredo. Consejo Nacional de Invest.cientif.y Tecnicas. Ctro Cientifico Tecnologico Conicet - Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil

Feline uveitis: Therapeutic effect of melatonin

Acute or chronic uveitis is a common ophthalmic disorder that constitutes one of the main causes of irreversible blindness in domestic cats. Uveitis affects primarily the uveal tract, but other ocular critical structures can also be affected. In addition, inflammation of the posterior segment (choroid and retina) of the eye may provoke retinal detachment and degeneration, with consequent blindness. At present, treatment of cats with uveitis generally involves administration of corticosteroids, which is directed toward reduction of pain and lesions in ocular tissues. However, the immunosuppressive effect of corticosteroids may contribute to the development of the systemic disease, and their chronic use could result in corticosteroid-induced glaucoma. A novel method for experimental induction of uveitis in cats would greatly facilitate the understanding of the cellular events involved in ocular inflammation as well as the development of new treatment strategies. In this chapter, we will summarize recent investigations showing that a single intravitreal injection of bacterial lipopolysaccharide (LPS) in cat eyes induces clinical, biochemical, functional, and histological changes that are consistent with the main features of naturally occurring feline uveitis, and that melatonin prevents clinical, biochemical, histological, ultrastructural, and functional consequences of experimental uveitis in cats.Fil: Rosenstein, Ruth Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Sande Casal, Pablo Horacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Fernández, Diego Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Aba, Marcelo A.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Keller Sarmiento, María Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Saenz, Daniel Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: del Sole, Maria Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin