Tyrosine phosphatase SHP2 regulates the expression of acyl-CoA synthetase ACSL4

Acyl-CoA synthetase 4 (ACSL4) is implicated in fatty acid metabolism with marked preference for arachidonic acid (AA). ACSL4 plays crucial roles in physiological functions such as steroid synthesis and in pathological processes such as tumorigenesis. However, factors regulating ACSL4 mRNA and/or protein levels are not fully described. Because ACSL4 protein expression requires tyrosine phosphatase activity, in this study we aimed to identify the tyrosine phosphatase involved in ACSL4 expression. NSC87877, a specific inhibitor of the tyrosine phosphatase SHP2, reduced ACSL4 protein levels in ACSL4-rich breast cancer cells and steroidogenic cells. Indeed, overexpression of an active form of SHP2 increased ACSL4 protein levels in MA-10 Leydig steroidogenic cells. SHP2 has to be activated through a cAMP-dependent pathway to exert its effect on ACSL4. The effects could be specifically attributed to SHP2 because knockdown of the phosphatase reduced ACSL4 mRNA and protein levels. Through the action on ACSL4 protein levels, SHP2 affected AA-CoA production and metabolism and, finally, the steroidogenic capacity of MA-10 cells: overexpression (or knockdown) of SHP2 led to increased (or decreased) steroid production. We describe for the first time the involvement of SHP2 activity in the regulation of the expression of the fatty acid-metabolizing enzyme ACSL4.Fil: Cooke, Mariana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Orlando, Ulises Daniel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Maloberti, Paula Mariana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Podesta, Ernesto Jorge. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Cornejo Maciel, Maria Fabiana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentin

Gene expression profile and signaling pathways in MCF-7 breast cancer cells mediated by acyl-CoA synthetase 4 overexpression

Aim: Breast cancer comprises a heterogeneous group of diseases that vary in morphology, biology, behavior and response to therapy. Previous studies have identified an acyl-CoA synthetase 4 (ACSL4) gene-expression pattern correlated with very aggressive tumors. In particular, we have used the tetracycline Tet-Off system to stably transfect non-aggressive breast cancer MCF-7 cells and developed a stable line overexpressing ACSL4 (MCF-7 Tet-Off/ACSL4). As a result, we have proven that cell transfection solely with ACSL4 cDNA renders a highly aggressive phenotype in vitro and results in the development of growing tumors when injected into nude mice. Nevertheless, and in spite of widespread consensus on the role of ACSL4 in mediating an aggressive phenotype in breast cancer, the early steps through which ACSL4 increases tumor growth and progression have been scarcely described and need further elucidation. For this reason, the goal of this work was to study the gene expression profile and the signaling pathways triggered by ACSL4 overexpression in the mechanism that leads to an aggressive phenotype in breast cancer. Methods: We have performed a massive in-depth mRNA sequencing approach and a reverse-phase protein array using MCF-7 Tet-Off/ACSL4 cells as a model to identify gene expression and functional proteomic signatures specific to ACSL4 overexpression. Results and Conclusion: The sole expression of ACSL4 displays a distinctive transcriptome and functional proteomic profile. Furthermore, gene networks most significantly upregulated in breast cancer cells overexpressing ACSL4 are associated to the regulation of embryonic and tissue development, cellular movement and DNA replication and repair. In conclusion, ACSL4 is an upstream regulator of tumorigenic pathways. Because an aggressive tumor phenotype appears in the early stages of metastatic progression, the previously unknown mediators of ACSL4 might.Fil: Castillo, Ana Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; ArgentinaFil: Orlando, Ulises Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; ArgentinaFil: Lopez, Paula Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; ArgentinaFil: Solano, Angela Rosario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; ArgentinaFil: Maloberti, Paula Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; ArgentinaFil: Podesta, Ernesto Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; Argentin

El Colegio de Profesionales en Arqueología de Tucumán (CPAT): Entre la estructura legal y la práctica profesional

En el año 2010 —mediante Ley Provincial Nº 8337/10— se crea el Colegio de Profesionales en Arqueología de Tucumán (CPAT), el cual se constituyó como un espacio de reflexión, regulación y defensa de la profesión. A partir de este momento, el Estado provincial le delega el control y manejo sobre las matrículas de Arqueología. Sin embargo, el CPAT no fue creado sólo en defensa de los intereses de la práctica profesional, sino también como organismo de protección del patrimonio arqueológico local. Actualmente busca también acompañar la diversificación de los ámbitos laborales en los cuales se insertan los/as arqueólogos/as. A través de estas líneas no sólo presentaremos un breve recorrido por la estructura legal y normativa del CPAT, sino que también nos detendremos en algunas de sus intervenciones en relación a la práctica profesional en nuestra provincia.In 2010, the Colegio de Profesionales en Arqueología de Tucumán (CPAT) was created by provincial law N° 8337/10 configuring a place for regulating and defending the profession and reflecting on it. Since then, the provincial State delegates to the CPAT the control and management of the archaeological professional registrations. However, this institution was not only created to defend professional practice, but also for protecting local archaeological heritage. Currently it also seeks to follow the diversification of employment opportunities within the field. Throughout these lines we will not only go through the legal and normative structure of the CPAT, bust also focus on some interventions carried out in relation to professional practice in our province.Fil: Maloberti, Paula Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo. Instituto de Arqueología y Museo; Argentina. Colegio de Profesionales en Arqueología de Tucumán; ArgentinaFil: Di Lullo, Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Estudios Sociales. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Estudios Sociales; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo. Instituto de Arqueología y Museo; Argentina. Colegio de Profesionales en Arqueología de Tucumán; ArgentinaFil: Gramajo Bühler, Carlos Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Estudios Sociales. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Estudios Sociales; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo. Instituto de Arqueología y Museo; Argentina. Colegio de Profesionales en Arqueología de Tucumán; Argentin

El proyecto político-pedagógico del Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre: plan de estudio y actividades de intervención más allá del aula

Este trabajo es una reflexión del equipo docente del Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos "2 de Diciembre" acerca de las prácticas desarrolladas en el marco de nuestro proyecto político - pedagógico. Para ello desplegaremos la fundamentación general del proyecto, la caracterización de la población con la que se trabaja y los objetivos políticos que implican la construcción de una identidad de clase en la cual los estudiantes se asuman como parte de la clase trabajadora con capacidad transformadora. A partir de ello, se describirán los objetivos pedagógicos que estructuran nuestro plan de estudios, explicitando el proceso de cambio de una estructura curricular tradicional (dividida en materias disciplinares) por otra dividida en 5 áreas de conocimiento, como así también la especificidad del enfoque de cada área en el marco del proyecto general. Por último, detallaremos algunas de las actividades que se implementan más allá del aula como aporte al debate acerca de cómo potenciar las intervenciones en los procesos de conocimiento de nuestra clase. En particular, se sistematizarán las actividades de integración al proyecto y de diagnóstico de los estudiantes, las actividades de conocimiento para la intervención política y las actividades de evaluación, tanto de los estudiantes como del mismo proyecto. Éstas son el resultado de la experiencia y la reflexión sobre la práctica así como también de las necesidades surgidas a partir del diálogo e intercambio mantenido con los y las estudiantes como parte de un proceso que implica conocimiento y acción, dimensiones necesarias en la construcción de la educación popular.Fil: Aguilar, Maria Luz. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; ArgentinaFil: Burela, Paula. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; ArgentinaFil: Carpio, Ariel. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; ArgentinaFil: Hirsch, Dana. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ladowsky, Mariana. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; ArgentinaFil: Inzillo, Lorena. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; ArgentinaFil: Maloberti, Federico. Universidad de Buenos Aires. Departamento de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Matovich, Mariana. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; ArgentinaFil: Ortiz, Juliana. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; ArgentinaFil: Rivero, Maura. Bachillerato Popular de Jóvenes y Adultos 2 de Diciembre; Argentin

Acyl-CoA synthetase-4, a new regulator of mTOR and a potential therapeutic target for enhanced estrogen receptor function in receptor-positive and -negative breast cancer

Although the role of acyl-CoA synthetase 4 (ACSL4) in mediating an aggressive phenotype is well accepted, there is little evidence as to the early steps through which ACSL4 increases tumor growth and progression. In this study, and by means of the stable transfection of MCF-7 cells with ACSL4 using the tetracycline Tet-Off system (MCF-7 TetOff/ACSL4), we identify the mTOR pathway as one of the main specific signatures of ACSL4 expression and demonstrate the partial involvement of the lipoxygenase pathway in the activation of mTOR. The specificity of ACSL4 action on mTOR signaling is also determined by doxycycline inhibition of ACSL4 expression in MCF-7 Tet-Off/ACSL4 cells, by the expression of ACSL4 in the non-aggressive T47D breast cancer cell line and by knocking down this enzyme expression in the MDA-MB-231 breast cancer cells, which constitutively express ACSL4. ACSL4 regulates components of the two complexes of the mTOR pathway (mTORC1/2), along with upstream regulators and substrates. We show that mTOR inhibitor rapamycin and ACSL4 inhibitor rosiglitazone can act in combination to inhibit cell growth. In addition, we demonstrate a synergistic effect on cell growth inhibition by the combination of rosiglitazone and tamoxifen, an estrogen receptor α (ERα) inhibitor. Remarkably, this synergistic effect is also evident in the triple negative MDA-MB-231 cells in vitro and in vivo. These results suggest that ACSL4 could be a target to restore tumor hormone dependence in tumors with poor prognosis for disease-free and overall survival, in which no effective specifically targeted therapy is readily available.Fil: Orlando, Ulises Daniel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Castillo, Ana Fernanda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Dattilo, Melina A.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; ArgentinaFil: Solano, Angela Rosario. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Maloberti, Paula Mariana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Podesta, Ernesto Jorge. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquimica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentin

Intercellular mitochondrial transfer through nanotubules is promoted by cyclic amp (cAMP) in rat astrocytes and human glioblastoma cells

Nanotubules (Tunneling nanotubules, TnTs) are cell membrane projectionsmade of F-actin fibers of nanometric diameter (up to 1 μm),which enable cytoplasmatic connections between cells. It has beenshown that mitochondria, other organelles, and cellular componentsare transferred by TnTs in several normal and tumor cell lines. TnTsestablishment has been extensively described in nervous systemcells, as neurons and astrocytes. Published evidence indicates theexistence of mitochondrial transfer through TnTs between differentcell types, such as normal and tumoral cells. Mitochondrial passagefrom normal to tumor cells restores oxidative metabolism, decreasingtumorigenic potential. A similar effect has been observed withcAMP, a very well-known astrocytes stellation promoter, which mediatesmitochondrial biogenesis and tumor growth inhibition. Mitochondrialtransfer within TnTs in nervous system cells have not beendemonstrated so far. Then, our goal was to analyze mitochondrialtrafficking through TnTs in normal and tumoral astrocytes and apossible effect of cAMP. We used normal rat astrocytes and humanglioblastoma U87 cells. Mitochondria and actin were probed with amito-targeted green fluorescent protein and phalloidin, respectively.Astrocytes and U87 were incubated with or without 8Br-cAMP(cAMP analogue). We analyzed images by confocal microscopy andmeasured the width of actin connections between cells. We analyzedeach culture separately; astrocytes and U87 establish thick projectionscontaining mitochondria but treatment with cAMP promotes anincrease of TnTs-like connections with mitochondria inside (controlvs cAMP: astrocytes: 2.07±0.71 vs 0.85±0.21 μm, ***p<0.05; U87:2.69±1.40 vs.0.84±0.22 μm, *p<0.05, ± SD, ANOVA, Tukey test).Thus, cAMP promotes TnTs-like structures and mitochondrial passagethrough them in normal astrocytes and glioblastoma cells, suggestinga role for intercellular mitochondrial transfer through TnTs instellation process.Fil: Helfenberger, Katia Estefanía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Benzo, Yanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Duarte, Alejandra Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Fuentes, Federico. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Poderoso, Juan José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Maloberti, Paula Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Poderoso, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaLXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología y Reunión Anual de la Sociedad Argentina FisiologíaArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaSociedad Argentina FisiologíaSociedad Argentina de Inmunologí

Adrenocorticotropin induces mitogen-activated protein kinase phosphatase 1 in Y1 mouse adrenocortical tumor cells

ACTH signaling pathway includes the action of both protein kinases, mainly cAMP-dependent protein kinase (protein kinase A, PKA), and serine/threonine and tyrosine phosphatases. MAPK phosphatase-1 (MKP-1) is a dual activity protein phosphatase involved in the dephosphorylation of MAPK. To determine whether MKP-1 is a component of ACTH cascade, here we investigate the expression levels of MKP-1 gene in Y1 mouse adrenocortical tumor cells under ACTH stimulation. ACTH transiently increased MKP-1 mRNA and protein levels. MKP-1 mRNA increase occurred at 30 min, peaked at 1 h (6-fold), and returned to basal levels thereafter. The ACTH-mediated mRNA increase was blunted by actinomycin D and enhanced by cycloheximide. A cell permeable cAMP analog, 8-bromo-cAMP, also transiently induced MKP-1 mRNA (4-fold) and the PKA inhibitor N-[2-(p-bromocinnamylamino)ethyl]-5-isoquinolinesulfonamid abolished this effect. In contrast, N-[2-(p-bromocinnamylamino)ethyl]-5-isoquinolinesulfonamid only partially reduced the effect of ACTH, suggesting the participation of PKA-independent mechanisms in the hormone-induced MKP-1 expression. In addition, we show that the rise in intracellular Ca2+ and protein kinase C activation had a potent synergic effect on ACTH- and 8-bromo-cAMP-mediated MKP-1 induction. In summary, our findings demonstrate that MKP-1 is another component of ACTH signaling cascade and indicate that this hormone may potentially down-regulate MAPKs.Fil: Bey, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres". Grupo Vinculado al INGEBI- Laboratorio de Biocatálisis y Biotransformaciones - LBB - UNQUI; ArgentinaFil: Gorostizaga, Alejandra Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Maloberti, Paula Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Castilla Lozano, Maria del Rocio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Poderoso, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Cornejo Maciel, Maria Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Podesta, Ernesto Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Paz, Cristina del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentin

Regulatory mechanisms leading to differential Acyl-CoA synthetase 4 expression in breast cancer cells

Acyl-CoA synthetase 4 (ACSL4) overexpression plays a causal role in the aggressiveness of triple negative breast cancer. In turn, a negative correlation has been established between ACSL4 and estrogen receptor alpha (ERα) expression. However, the upstream regulatory mechanisms leading to differential ACSL4 expression between triple negative breast cancer and ERα-positive cells remained unknown. We performed the characterization of the human ACSL4 promoter and the identification of transcription factors involved. Deletional analysis demonstrated the proximal 43 base pairs of the promoter are involved in overexpression. By site directed mutagenesis we describe that retinoid-related orphan receptor alpha (RORα), Sp1 and E2F elements are involved in the promoter activity. We established for the first time that estrogen-related receptor alpha (ERRα) is a transcription factor involved in the higher activation of the human ACSL4 promoter in breast cancer cells. Furthermore, a combination of inhibitors of ACSL4 and ERRα produced a synergistic decrease in MDA-MB-231 cell proliferation. We also demonstrated that ERα restoration in triple negative breast cancer cells downregulates ACSL4 expression. The results presented in this manuscript demonstrated transcriptional mechanism is involved in the different expression of ACSL4 in human breast cancer cell lines of different aggressiveness.Fil: Dattilo, Melina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Benzo, Yanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Herrera, Lucía Manuela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Prada, Jesica Giselle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Castillo, Ana Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Orlando, Ulises Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Podesta, Ernesto Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Maloberti, Paula Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentin

Angiotensin II-upregulated MAP kinase phosphatase-3 modulates FOXO1 and p21 in adrenocortical H295R cells

MAPK phosphatases (MKP) downregulate the activity of mitogen-activated protein kinases (MAPK), such asERK1/2, and modulate the processes regulated by these kinases. ERK1/2 participate in a wide range of processesincluding tissue-specific hormone-stimulated steroidogenesis. H295R cells are a suitable model for the study ofhuman adrenal cortex functions, particularly steroid synthesis, and respond to angiotensin II (Ang II) triggeringERK1/2 phosphorylation in a transient fashion. MKP-3 dephosphorylates ERK1/2 and, as recently reported,forkhead box protein 1 (FOXO1). Here, we analyzed MKP-3 expression in H295R cells and its putative regulationby Ang II. Results showed the expression of MKP-3 full length (L) and a short splice variant (S), and the upregulationof both isoforms by Ang II. L and S messenger and protein levels increased 30 min after Ang II stimulationand declined over the next 3 h, a temporal frame compatible with ERK1/2 dephosphorylation. In addition, FOXO1activation is known to include its dephosphorylation and nuclear translocation. Therefore, we analyzed the effectof Ang II on FOXO1 modulation. Ang II induced FOXO1 transient phosphorylation and translocation and also theinduction of p21, a FOXO1-dependent gene, whereas MKP-3 knock-down reduced both FOXO1 translocation andp21 induction. These data suggest that, through MKP-3, Ang II counteracts its own effects on ERK1/2 activity andalso triggers the activation of FOXO-1 and the induction of cell cycle inhibitor p21. Taken together, the currentfindings reveal the participation of MKP-3 not only in turn?off but also in turn-on signals which control importantcellular processes.Fil: Mori Sequeiros, María de Las Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Cohen Sabban, Juan Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Dattilo, Melina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Mele, Pablo Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Nudler, Silvana Iris. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Mendez, Carlos Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Maloberti, Paula Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Paz, Cristina del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentin

Expression and function of OXE receptor, an eicosanoid receptor, in steroidogenic cells

Hormonal regulation of steroidogenesis involves arachidonic acid (AA) metabolism through the 5-lipoxygenase pathway. One of the products, 5-hydroperoxy-eicosatetraenoic acid (5-HpETE), acts as a modulator of the activity of the steroidogenic acute regulatory (StAR) protein promoter. Besides, an oxoeicosanoid receptor of the leukotriene receptor family named OXE-R is a membrane protein with high affinity and response to 5-HpETE, among other AA derivatives. The aim of our work was to elucidate whether this receptor may be involved in steroidogenesis. RT-PCR and western blot analysis demonstrated the presence of the mRNA and protein of the receptor in human H295R adrenocortical cells. The treatment of H295R or MA-10 cells (murine Leydig cell line) with 8Br-cAMP together with docosahexaenoic acid (DHA, an antagonist of the receptor) partially reduced StAR induction and steroidogenesis. On the contrary, 5-oxo-ETE -the prototypical agonist, with higher affinity and potency on the receptor- increased cAMP-dependent steroid production, StAR mRNA and protein levels. These results lead us to conclude that AA might modulate StAR induction and steroidogenesis, at least in part, through 5-HpETE production and activation of a membrane receptor, such as the OXE-RFil: Cooke, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Di Consoli, Hernán. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Maloberti, Paula Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Cornejo Maciel, Maria Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentin