The role of platelets in inflammatory processes

Płytki krwi są postrzegane przede wszystkim jako komórki biorące udział w procesach hemostazy naczyniowej i utrzymaniu integralności ściany naczyniowej. Nie do końca znana jest natomiast ich rola w procesach zapalnych, które powiązane są z aktywnością wrodzonego układu odporności immunologicznej. W pracy zostaną omówione między innymi wydzielane z ziarnistości płytek krwi związki (cytokiny/chemokiny), które przy współudziale komórek śródbłonka rekrutują leukocyty do miejsca zapalenia, receptory TLR (Toll-like receptors) płytek uczestniczące w rozpoznawaniu obcego patogenu oraz zostaną opisane mechanizmy prowadzące do udziału płytek krwi w procesach zapalnych. Niniejsza praca ma na celu uproszczone przedstawienie wpływu płytek krwi na funkcjonowanie skomplikowanego systemu wrodzonej odpowiedzi immunologicznej.Platelets are mostly perceived as cells that play an eminent role in hemostasis and safeguard of vascular integrity. However, not yet fully recognized is the part they play in triggering of inflammatory processes related to the innate immune system. The paper discusses — among others — compounds (cytokines/chemokines) released from platelet granules which can mediate the interaction with leukocytes (via endothelial cells) and enhance their recruitment to the inflammation site and also Toll-like receptors which play a critical role in the early innate immune response to invading pathogens. The paper also describes mechanisms through which platelets can contribute to inflammation processes. The aim of this paper is a simplified presentation of the effect of platelets on the complex system of innate immune response

Current state of knowledge on TRALI pathophysiology, diagnostics and prevention

Transfusion-related acute lung injury (TRALI) is the leading cause of mortality following transfusion of blood components. Characteristic for TRALI is acute hypoxemia during or up to 6h after transfusion provided that cardiogenic respiratory failure and transfusion-associated circulatory overload (TACO) are excluded.In this article we present: 1) Etiology and pathomechanism of TRALI syndrome including the numerous issues that are still unresolved. Currently accepted is the multiple-event model which involves both the patient and the transfused blood components. The TRALI syndrome may be either immunological or nonimmunological dependant on the various factors that activate neutrophils – the main cells in TRALI pathogenesis. 2) TRALI diagnosis should be based mainly on the clinical presentation due to the variety of pathomechanism of the syndrome; however testing of anti-leukocyte antibodies in transfused blood components, according to ISBT guidelines, is recommended in order to prevent TRALI incidence. 3) Different strategies of TRALI prevention, although up to date no ultimate provisions have been accepted. Transfusion of plasma collected only from men seems to be a promising solution as in many countries that adapted this preventive measure the number of TRALI cases has substantially decreased. 4) Different methods of proceeding with donors who donated blood components that were the cause of TRALI in transfused patients. It still remains an open question whether to defer donors with anti-leukocyte antibodies or multi pregnant women

Physiopathological activity of cell membrane microparticles

Mikrocząstki (MP) są uwalniane z błon powierzchniowych większości komórek eukariotycznych. W pracy przedstawiono, na podstawie doniesień literatury światowej, różne rodzaje aktywności MP: prokoagulacyjną i antykoagulacyjną, efekt immunomodulacyjny, zdolność do adhezji i indukowania procesów zapalnych, udział w apoptozie, angiogenezie i przyjęciu przeszczepów komórek hematopoetycznych. Ponadto opisano wpływ MP na powstawanie wrodzonych zaburzeń czynności płytek krwi, hemoglobinopatii S, małopłytkowości indukowanej heparyną, posocznicy, zakrzepowej plamicy małopłytkowej, nocnej napadowej hemoglobinurii, cukrzycy, patologii w chorobach sercowo-naczyniowych, w zakrzepicy żył głębokich oraz zatorach pęcherzyków płucnych. Zwrócono także uwagę na znaczenie MP w składnikach krwi przygotowywanych do transfuzji.Microparticles (MP) are released from cell membrane of most eukaryotic cells. Supported by data from world literature, this paper presents different kinds of MP activity: procoagulant and anticoagulant activity, immunomodulatory effect, capacity for adhesion and induction of inflammatory processes, participation in apoptosis, angiogenesis and engraftment of hematopoietic stem cell transplantation. Apart from the above, the presentation also describes MP contribution to pathogenesis: congenital bleeding disorders, haemoglobinopathy S, heparin-induced thrombocytopenia, thrombocytopenic purpura, diabetes, paroxysmal noctural haemoglobinuria, cardiovascular diseases, deep venous thrombosis and pulmonary embolism. The significance of MP in blood components for transfusion is also stressed

Transfusion-related acute lung injury: A dangerous and underdiagnosed noncardiogenic pulmonary edema

Transfusion-related acute lung injury (TRALI) is one of the leading causes of death associatedwith transfusion of blood and blood components. The understanding of the etiology andpathophysiology of this syndrome has much improved during the last decades, neverthelessnumerous issues are still unresolved and symptomatic treatment remains the cornerstone ofmedical management. Consequently more attention is directed at primary as well as secondaryprevention. The awareness of the problem within the medical society is still unsatisfactorywhich results in a high number of unrecognized cases or of inaccurate diagnoses one of whichis cardiogenic pulmonary edema. The aim of this review is to make the TRALI syndrome morefamiliar to clinicians and to emphasize how signifi cant proper medical management is both forthe patients presenting TRALI symptoms as well as for future recipients of blood components

Reticulated platelets — hematological norm and fluctuation in the number of reticulated platelets with time

Wstęp: Retykulopłytki (RP) są najwcześniejszą postacią płytek krwi obecną we krwi obwodowej. W związku z coraz szerszym zastosowaniem diagnostycznym badań dotyczących RP obecna praca ma na celu: ustalenie norm hematologicznych dla RP u zdrowych osób i sprawdzenie, czy ich liczba ulega wahaniom w odstępie czasu. Jednocześnie sprawdzono, czy liczba RP może być oznaczana nie tylko w dniu pobrania próbki krwi, ale także z materiału przechowywanego na następny dzień. Materiał i metody: Do badań użyto próbki krwi pobrane na EDTA od 148 osób. Odsetek/ /wartość bezwzględną RP oznaczano techniką immunofluorescencyjną z zastosowaniem podwójnego znakowania: przeciwciałem monoklonalnym anty-CD41 sprzężonym z fikoerytryną oraz oranżem tiazolu. Poziom RP oceniano w cytometrze przepływowym. Wyniki: Norma hematologiczna dla retykulopłytek wynosi: w procentach 1,3 ± 0,8%, w wartościach bezwzględnych 3,29 ± 2,02 × 103/μl; zakres wartości prawidłowych wyrażony w procentach waha się od 0,5% do 6%, a w wartościach bezwzględnych od 1,26 do 15,2 × 103/μl. Oznaczanie RP powinno się wykonywać z próbki krwi pobranej w dniu badania. Liczba RP u zdrowych osób nie ulega istotnym wahaniom w czasie. Wnioski: Normy hematologiczne liczby RP ustalone w wyniku przeprowadzonych przez autorki doświadczeń są zbliżone do wartości prawidłowych podawanych w literaturze. J. Transf. Med. 2011; 3: 123–128Background: Reticulated platelets (RP) are the youngest platelet forms in peripheral blood. With their diagnostic utility gradually increasing the aim of our study was to establish normal haematological values for RP in healthy individuals and to check their stability over time. Additionaly, the aim was to verify, if the RP number had to be determined from fresh blood or the evaluation could be performed on stored blood samples. Material and methods: Blood samples were freshly collected on EDTA anticoagulant from 148 healthy individuals. To determine the percentage/absolute RP values we used immunofluorescent double labelling with monoclonal antibody anti-CD41-phycoerythrin and thiazole orange. The RP level were analysed using flow cytometry. Results: The haematological normal value is — 1.3 ± 0.8%, 3.29 ± 2.02 × 103/μl (absolute value); range — 0.5–6%, 1.26–15.2 x 103/μl (absolute number). For RP labelling it is recommended to use freshly collected blood samples. Reticulated platelets level in healthy individuals was stable and did not change significantly with time. Conclusions: The hematological norms of RP established during our study are similar to the norms reported in literature. J. Transf. Med. 2011; 4: 123–12

Ostre poprzetoczeniowe uszkodzenie płuc u młodej kobiety z ciążą ektopową – opis przypadku i przegląd literatury

Background: Transfusion-related acute lung injury (TRALI) is a major cause of death associated with transfusion. Nevertheless it is still misdiagnosed and underreported. We present a case of this serious complication in order to make it more familiar to clinicians and indicate proper medical management, which is significant not only for the patients presenting TRALI symptoms but also for future recipients of blood components. Case presentation: A 32-year-old white woman with in-vitro fertilization in anamnesis was admitted to Department of Obstetrics and Gynecology because of abdominal pain. Ultrasonography examination revealed pathological mass in left adnexa. The patient underwent laparoscopic left salpingectomy. The following day she reported progressive pain in lower abdomen with signs of peritoneal irritation. Emergency laparotomy was performed and active bleeding from fallopian tube was stopped. Four units of red blood cells concentrate and six units of fresh frozen plasma were transfused. Within two hours of surgery acute respiratory distress symptoms occurred, bilateral infiltrates were found on chest X-ray. The patient responded to supportive treatment (oxygen therapy, dexamethasone, diuretics) and her state improved within 12 hours. Serological diagnostics revealed anti-HLA antibodies in one donor which reacted with patient’s granulocytes. Clinical picture and anti-leukocyte antibodies detected in blood component allowed to identify the immune-mediated TRALI. Conclusions: Transfusion-related acute lung injury is a life-threatening complication of transfusion which manifests as non-cardiogenic pulmonary edema. Each suspected case of this syndrome should be reported to blood center in order to confirm the diagnosis and implement preventive measures (exclusion of implicated donor from further blood donation).  Cel pracy: Ostre poprzetoczeniowe uszkodzenie płuc (TRALI) jest jedną z głównych przyczyn zgonów związanych z transfuzją składników krwi. Niemniej jednak powikłanie to pozostaje często nierozpoznawane lub niezgłaszane do odpowiednich ośrodków. W niniejszej pracy prezentujemy przypadek tego poważnego powikłania w celu przybliżenia jego obrazu klinicznego i wskazania prawidłowego postępowania, które jest nie tylko istotne dla pacjenta z objawami TRALI, ale także dla przyszłych biorców preparatów krwiopochodnych. Opis przypadku: 32-letnia kobieta rasy kaukaskiej z wywiadem zapłodnienia pozaustrojowego została przyjęta do Kliniki Położnictwa i Ginekologii z powodu bólu brzucha. Badanie ultrasonograficzne ujawniło obecność patologicznej masy w obrębie lewych przydatków macicy. Pacjentka przebyła lewostronną laparoskopową salpingektomię. Następnego dnia zgłosiła narastające dolegliwości bólowe w podbrzuszu z cechami podrażnienia otrzewnej. Przeprowadzono pilną laparotomię, w trakcie której zatamowano aktywne krwawienie z kikuta jajowodu. Pacjentce przetoczono 6 jednostek koncentratu krwinek czerwonych i 4 jednostki świeżo mrożonego osocza. Po 2 godzinach od operacji wystąpiły objawy ostrej niewydolności oddechowej a w rentgenogramie klatki piersiowej stwierdzono obustronne zacienienia. Zastosowano leczenie podtrzymujące: tlenoterapia bierna, deksametazon, diuretyki. Stan pacjentki uległ poprawie w ciągu 12 godzin. Diagnostyka serologiczna ujawniła u jednego dawcy krwi obecność przeciwciał anti-HLA reagujących z granulocytami pacjentki. Obraz kliniczny i przeciwciała antyleukocytarne wykryte w przetoczonym składniku krwi pozwoliły rozpoznać immunologiczną postać TRALI. Wnioski: Ostre poprzetoczeniowe uszkodzenie płuc jest zagrażającym życiu powikłaniem potransfuzyjnym, które manifestuje się jako niekardiogenny obrzęk płuc. Wszystkie przypadki z objawami wskazującymi na wystąpienie tego zespołu powinny być zgłaszane do Centrów Krwiodawstwa i Krwiolecznictwa celem potwierdzenia diagnozy i wdrożenia odpowiednich środków profilaktycznych (wyłączenie dawcy z przeciwciałami antyleukocytarnymi z dalszego oddawania krwi dla celów klinicznych).

Cerebral venous and sinus thrombosis complicated by heparin-induced thrombocytopenia

Zakrzepica żył i zatok mózgu (CVT) jest rzadko występującą postacią żylnej choroby zakrzepowo- zatorowej, o rocznej zapadalności 2–4/1 000 000. Nowoczesne techniki obrazowania, przede wszystkim rezonans magnetyczny w połączeniu z flebografią rezonansu magnetycznego (MR-v) oraz flebografią tomografii komputerowej (CT-v), znacznie usprawniły proces diagnostyczny CVT. Niedawno opublikowane uzgodnieniowe zalecenia dotyczące postępowania w CVT rekomendują stosowanie terapeutycznych dawek heparyny niefrakcjonowanej (UFH) lub drobnocząsteczkowej (LMWH) w leczeniu wstępnym tej choroby oraz podawanie antagonistów witaminy K we wtórnej prewencji CVT. W pracy przedstawiono sposób leczenia pacjentki z CVT, u której w trakcie otrzymywania LMWH w dawkach terapeutycznych rozwinęła się małopłytkowość indukowana heparyną (HITT). W artykule podkreślono wagę właściwego monitorowania wstępnego leczenia heparyną oraz omówiono strategię leczenia HITT w Polsce, gdzie większość antykoagulantów zarejestrowanych do stosowania u pacjentów z HITT jest praktycznie niedostępna. Hematologia 2011; 2, 4: 363–369Cerebral venous and sinus thrombosis (CVT) is a rare form of venous thromboembolism, with annual incidence of 2–4 per million. Modern imaging techniques, particularly magnetic resonance imaging (MRI) combined with MR-venography and computed tomography venography (CT-v), have greatly improved the diagnosis of CVT. Recently published consensus-based guidelines on the treatment of CVT recommend therapeutic doses of unfractionated heparin (UFH) or low-molecular-weight heparin (LMWH) for the initial treatment of the disease followed by vitamin K antagonists for secondary CVT prevention. In this paper, we describe the management of patient with acute CVT who developed heparin induced thrombocytopenia thrombosis (HITT) while receiving therapeutic doses of LMWH. This report highlights the importance of careful monitoring of initial treatment with heparin, and discusses the strategy of HITT management in Poland, where most anticoagulants licensed for HITT treatment are virtually not achievable. Hematologia 2011; 2, 4: 363–36

Ocena dostępności dawców koncentratów krwinek płytkowych o oznaczonych antygenach leukocytarnych i płytkowych dla pacjentów z przeciwciałami anty-HLA i/lub anty-HPA

Clinical efficacy of PC transfusions in patients immunized with Human Leukocyte Antigens (HLA) and/or Human Platelet Antigens (HPA) can be improved by relying on platelets from donors typed for HPA and/or HLA. A specific group of PC recipients are newborns with alloimmune thrombocytopenia (FNAIT) resulting from maternal alloimmunization during pregnancy against specific fetal platelet antigens HPA (especially HPA-1a) produced by the mother as a result of fetomaternal HPA incompatibility. The study aim was to assess the demand and availability for HPA/HLA typed donors in Poland. Outcome of a survey distributed to 23 Polish blood transfusion centers (CKiK) supplemented by data acquired in direct contact (phone) revealed that: 1/ demand for PCs from donors with HLA and/or HPA typed antigens was reported in 7/23 (33.3%) CKiK; 2 / over a 1.5 year period, 1 788 PCs were prepared for patients with anti-HLA- antibodies, 63 PCs for patients with anti-HPA-antibodies and 58 PCs - for patients with anti-HLA and anti-HPA antibodies. FNAIT neonates were transfused with 35 PCs from register donors and 176 PCs from casual donors; 3 / in 13/23 CKiK (61.9%) PC selection for immunized patients was mainly based on crossmatching in LCT; 4 / registers report of 12,885 donors typed for HLA Class I antigens including 417 donors typed for HPA; 5 / nation-wide there are 133 HPA-1a negative donors available for immunized patients; they were selected after typing of 5 872 donors; The number of HPA/HLA typed donors for immunized patients is insufficient. as compared to other countries. Moreover, the demand for registered donors is steadily growing due to expension of FNAIT diagnostics currently performed at the Institute of Hematology and Transfusion Medicine (IHiT) but also in the laboratories of CKiK. One of the responsibilities of the blood transfusion service is to provide PCs for immunized patients.Wstęp. Skuteczność przetoczeń koncentratów krwinek płytkowych (KKP) u pacjentów uodpornionych antygenami HLA (Human Leukocyte Antigens) i/lub HPA (Human Platelet Antigens) można zwiększyć, stosując KKP od dawców nieposiadających antygenów, do których pacjent wytworzył przeciwciała anty-HLA i/lub anty-HPA. Szczególną grupę biorców KKP stanowią noworodki z alloimmunologiczną małopłytkowością płodowo-noworodkową (AIMPN), wynikającą z niszczenia płytek dziecka przez matczyne przeciwciała skierowane do antygenów płytek (szczególnie HPA-1a), które matka tworzy z powodu konfliktu płytkowego. W krajach wysoko rozwiniętych dla pacjentów zimmunizowanych dostępni są dawcy o oznaczonych antygenach HLA i HPA.Cel. Celem pracy była ocena zapotrzebowania i dostępności takich dawców w Polsce na podstawie wyników ankiety rozesłanej do 23 Centrów Krwiodawstwa i Krwiolecznictwa (CKiK) oraz dodatkowych informacji ustnych uzyskanych z CKiK.Wyniki. Wyniki uzyskane z 21 CKiK wykazały, że:1) zapotrzebowania na KKP od dawców z oznaczonymi antygenami HLA i/lub HPA zgłoszono do 7/21 (33,3%) CKiK; 2) w skali całego kraju w ciągu 1,5 roku przygotowano: 1788 KKP dla pacjentów z przeciwciałami anty-HLA, 63 KKP dla pacjentów z anty-HPA, 58 KKP dla pacjentów z anty-HLA i anty-HPA; dla noworodków z AIMPN przygotowano 35 KKP od dawców bez antygenu, do którego były skierowane przeciwciała u matki i 176 KKP pochodzących od dawców przypadkowych; 3) w 13/21 (61,9%) CKiK dobór dawców KKP dla pacjentów zimmunizowanych odbywa się głównie na podstawie próby krzyżowej w teście limfocytotoksycznym (LCT); 4) rejestry dawców z oznaczonymi antygenami HLA klasy I zawierają dane 12 885 osób, u 417 z nich zbadano antygeny HPA; 5) w skali kraju do przetoczeń dla pacjentów zimmunizowanych antygenami HPA dostępnychjest 133 dawców HPA-1a ujemnych, wyselekcjonowanych na podstawie badań 5872 dawców. Wnioski. W Polsce, w porównaniu z innymi krajami, liczba dawców z oznaczonymi antygenami HLA i/lub HPA dla pacjentów zimmunizowanych jest niewystarczająca. Ponadto zapotrzebowanie na dawców z rejestru ciągle rośnie dzięki rozwojowi diagnostyki AIMPN wykonywanej nie tylko w Instytucie Hematologii i Transuzjologii (IHiT), ale także w laboratoriach CKiK. Pion krwiodawstwa jest zobowiązany do zabezpieczenia dostępności dawców KKP przeznaczonych dla pacjentów uodpornionych

Reticulated platelet count used for differentiation of the type of thrombocytopenia in pregnant women

Background: Analysis of reticulated platelets (RP), the youngest form of platelets in peripheral blood, is useful for assessment of thrombopoietic response in thrombocytopenic conditions due to intense immunological platelet destruction. Aim: The aim of the study was to assess the value of RP measurement for differentiation between pregnancyrelated thrombocytopenia (PT), immunological thrombocytopenia (IM ) and hereditary thrombocytopenia (HT) in pregnant women with platelet count below 100 G/L. Material: The study included 49 pregnant thrombocytopenia women (21 with PT, 22 with IM , 6 with HR) as well as 22 healthy pregnant women (Control). Methods: The percentage of RP in peripheral blood was measured using double staining with: PE-labeled anti CD41 (Dako) and thiazole orange (Beckton Dickinson). The measurements were performed several times during pregnancy (II and III trimester) and delivery. Anti-platelet antibodies were tested by immunofluorescence and immunoensimatic assays. HPA1a antigen was determined by PCR/ SSP. Results: The average platelet count in all groups of thrombocytopenia women was significantly lower than in control group. The mean RP percentage in the control group (5.31%) was within the range of the haematological normal value (0.5-6%), and for thrombocytopenia women it was: 9.19% for PT women, 14.75% for IM women and 14.94% for HT women and was significantly higher than that in the control group. In the group of IM pregnant women the RP percentage was significantly higher in the II trimester than in the PT women. Anti-platelet antibody and HPA1a antigen testing excluded alloimmunological/fetus/neonatal thrombocytopenia in the study material. Conclusion: RP analysis has been proved useful for preliminary differentiation of PT and IT in the II trimester of pregnancy. Higher RP percentage informs the physician of the likelihood of immunological thrombocytopenia in the pregnant woman as well as of the delivery of a thrombocytopenia child