Caracterización de cepas de Escherichia coli productoras de toxina Shiga aisladas de bovinos: presencia de marcadores de virulencia atípicos

CARACTERIZACIÓN DE CEPAS DE Escherichia coli PRODUCTORAS DE TOXINA SHIGA AISLADAS DE BOVINOS: PRESENCIA DE MARCADORES DE VIRULENCIA ATÍPICOS. Larzábal M. (1); Vilte D.A. (1); Rodríguez S. (1); Elizondo A.M. (1); Irino K. (2); Mercado E.C. (1) (1) Instituto de Patobiología, CICVyA, CNIA, Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). CC25 (1712), Castelar, Prov. Buenos Aires, Argentina. (2) Departamento de Microbiología, Sección Enterobacterias, Instituto Adolfo Lutz, SP, Brasil. [email protected] Palabras Clave: STEC, bovinos, marcadores virulencia. Introducción: Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) produce enfermedad severa en el hombre, cuyo espectro clínico incluye diarrea, colitis hemorrágica (CH) y síndrome urémico hemolítico (SUH), la principal causa de falla renal aguda en niños. STEC es considerado un agente zoonótico, siendo el ganado bovino el principal reservorio de infección para el hombre. Factores de virulencia adicionales, como la producción de intimina (eae) y enterohemolisina (ehxA) se encuentran presentes en los serotipos de STEC denominados enterohemorrágicos (EHEC). Objetivo: caracterizar los marcadores de virulencia propios de EHEC e investigar la presencia de factores de virulencia putativos en cepas STEC. Materiales y Métodos: 35 cepas STEC aisladas de heces de terneros diarreicos (n=27) o sanos (n=3) y de carne bovina (n=5). Los subtipos de Stx2 (stx2) e intimina (eae) fueron determinados mediante PCR-RFLP. Genes codificantes de toxinas (ehxA, cdt-III, cdt-IV, cnf1, cnf2 y astA), adhesinas (afaE8, f17A, sfa, pap y clpG) y aerobactina (iucD) fueron detectados mediante PCR. La identificación de los antígenos O y H se llevó a cabo mediante métodos standard. Resultados: la mayoría de las cepas (n=27) perteneció a seropatotipos asociados con frecuencia a CH y SUH. Los serotipos O157 (n=6), O5:H- (n=5), O26:H- (n=1),O26:H11 (n=6), O111:H- (n=8) y O145:H- (n=1), los subtipos de toxina Stx2 (n=11), Stx2vh-b (n=2) y Stx2vh-a (n=1), y los genes eae (n=32) y ehxA (n=35) identificados, son marcadores de virulencia de cepas altamente patógenas para el hombre. Algunas de estas cepas presentaron marcadores de virulencia propios de E. coli diarragénicos (astA) o productores de infecciones extraintestinales (ExPEC) (cdt-III, iucD, f17A, pap). Marcadores característicos de cepas de origen bovino (cnf2, afaE8) se detectaron en serotipos poco frecuentes en humanos. Conclusiones: el ganado bovino es reservorio de cepas EHEC altamente virulentas. La función en cepas EHEC de factores de virulencia característicos de cepas ExPEC debe ser investigada. Algunos de los genes detectados podrían ser parte de islas de patogenicidad parcialmente deleteadas presentes en el cromosoma de cepas EHEC o pertenecer a elementos genéticos móviles recientemente adquiridos

The Resveratrol Tetramer (-)-Hopeaphenol Inhibits Type III Secretion in the Gram-Negative Pathogens Yersinia pseudotuberculosis and Pseudomonas aeruginosa

Society faces huge challenges, as a large number of bacteria have developed resistance towards many or all of the antibiotics currently available. Novel strategies that can help solve this problem are urgently needed. One such strategy is to target bacterial virulence, the ability to cause disease e.g., by inhibition of type III secretion systems (T3SSs) utilized by many clinically relevant gram-negative pathogens. Many of the antibiotics used today originate from natural sources. In contrast, most virulence-blocking compounds towards the T3SS identified so far are small organic molecules. A recent high-throughput screening of a prefractionated natural product library identified the resveratrol tetramer (-)-hopeaphenol as an inhibitor of the T3SS in Yersinia pseudotuberculosis. In this study we have investigated the virulence blocking properties of (-)-hopeaphenol in three different gram-negative bacteria. (-)- Hopeaphenol was found to have micromolar activity towards the T3SSs in Yersinia pseudotuberculosis and Pseudomonas aeruginosa in cell-based infection models. In addition (-)-hopeaphenol reduced cell entry and subsequent intracellular growth of Chlamydia trachomatis