WT-1 Expresion linked to nitric oxide availability during neonatal obstructive nephropathy

The wt-1 gene encodes a zinc finger DNA-binding protein that acts as a transcriptional activator or repressor depending on the cellular or chromosomal context. The wt-1 regulates the expression of a large number of genes that have a critical role in kidney development. Congenital obstructive nephropathy disrupts normal renal development and causes chronic progressive interstitial fibrosis, which contributes to renal growth arrest, ultimately leading to chronic renal failure. Wt-1 is downregulated during congenital obstructive nephropathy, leading to apoptosis. Of great interest, nitric oxide bioavailability associated with heat shock protein 70 (Hsp70) interaction may modulate wt-1 mRNA expression, preventing obstruction-induced cell death during neonatal unilateral ureteral obstruction. Moreover, recent genetic researches have allowed characterization of many of the complex interactions among the individual components cited, but the realization of new biochemical, molecular and functional experiments as proposed in our and other research labs, allow us to establish a deeper level of commitment among proteins involved and the potential pathogenic consequences of their imbalance.Fil: Mazzei, Luciana Jorgelina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; ArgentinaFil: Manucha, Walter Ariel Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médica; Argentin

El factor de la trasncripción WT-1 y su relación con el desarrollo de la injuria renal inducida durante la nefropatía obstructiva

El estudio del desarrollo renal sirve como un paradigma para comprender los mecanismos que son la base de la formación de un órgano. Múltiples genes desempeñan funciones trascendentes en el desarrollo renal temprano, entre los que se destaca WT-1. Se ha comprobado experimentalmente que la proteína WT1 en unos casos reprime y en otros activa la transcripción de numerosos genes, pero sus dianas fisiológicas son poco conocidas. Recientes investigaciones genéticas han permitido caracterizar muchas de las complejas interacciones entre los componentes individuales, sin embargo la concreción de nuevos experimentos bioquímicos, moleculares y funcionales como los propuestos en nuestro y otros laboratorios de investigación, nos permitirán establecer con mayor profundidad el grado de compromiso entre las proteínas participantes y las posibles consecuencias fisiopatogénicas de su desacopleFil: Mazzei, Luciana Jorgelina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Manucha, Walter Ariel Fernando. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Instituto de Medicina y Biologia Experiment.de Cuyo; Argentin

Changes in renal WT-1 expression preceding hypertension development

Background: Hypertension is a public health problem with mostly unknown causes, and where strong hereditary genetic alterations have not been fully elucidated. However, the use of experimental models has provided valuable information. Recent evidences suggest that alterations in key nephrogenic factors, such as Wilms' tumor 1 transcription factor (WT-1), could contribute to the development of hypertension. The aim of this paper is to evaluate the expression of WT-1 and related genes in the nephrogenic process in connection with the development of hypertension as well as the corresponding anatomical and functional correlation. Methods: Male spontaneously hypertensive and control rats were evaluated weekly from birth until week 8 of life. Their blood pressure was taken weekly using the tail-cuff blood pressure system. Weekly, 5 rats per group were sacrificed with a lethal injection of pentobarbital, and their kidneys were removed, decapsulated and weighed. The serum was collected for measuring biochemical parameters. The results were assessed using one-way analysis of variance for comparisons between groups. Results: The relationship between renal weight/total body weights was established, without significantly different values. These data were compared with apoptosis, fibrosis, number and size of the glomeruli. The elevation of systolic blood pressure was significant since week 6. Biochemical values differed slightly. Histology showed a slight increase in deposits of collagen fibers since week 4. Additionally, in kidney cortices, the expression of WT-1, heat shock protein 70 (Hsp70) and vitamin D receptors (VDR) decreased since week 4. Finally, we demonstrated ultrastructural damage to mitochondria since week 4. Conclusions: Our results would suggest an unprecedented link, possibly a regulatory mechanism, between WT-1 on nephrogenic alteration processes and their relationship with hypertension. Moreover, and previous to the increase in blood pressure, we demonstrated low expressions of WT-1, VDR and Hsp70 in kidneys from neonatal SHRs. If so, this may suggest that deregulation in the expression of WT-1 and its impact on nephrogenesis induction could be crucial in understanding the development and maintenance of hypertension.Fil: Mazzei, Luciana Jorgelina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: García, Isabel Mercedes. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Calvo, Juan Pablo. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Casarotto, Mariana. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Fornes, Miguel Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Abud, María Angélica. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Cuello Carrión, Fernando Darío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Ferder, León. Universidad de Puerto Rico; Puerto RicoFil: Manucha, Walter Ariel Fernando. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Cienicas Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Synthesis, physicochemical characterization and biological activity of anandamide/ε-polycaprolactone nanoparticles obtained by electrospraying

Drug encapsulation in nanocarriers such as polymeric nanoparticles (Nps) may help to overcome the limitations associated with cannabinoids. In this sense, our work aimed to highlight the use of electrospraying technique for the development of carrier Nps of anandamide (AEA), an endocannabinoid with attractive pharmacological effects but underestimated due to its unfavorable physicochemical and pharmacokinetic properties added to its undesirable effects at the level of the central nervous system. We characterized physicochemically and evaluated in vitro biological activity of anandamide/ε-polycaprolactone nanoparticles (Nps-AEA/PCL) obtained by electrospraying in epithelial cells of human proximal tubule (HK2), to prove the utility of this method and to validate the biological effect of Nps-AEA/PCL. We obtained particles from 100 to 900 nm of diameter with a predominance of 200 a 400 nm. Their zeta potential was -20±1.86 mV. We demonstrated the stable encapsulation of AEA in Nps-AEA/PCL, as well as its dose-dependent capacity to induce the expression of iNOS and NO levels and to decrease the Na+/K+ ATPase activity in HK2 cells. Obtaining Nps-AEA/PCL by electrospraying would represent a promising methodology for a novel AEA pharmaceutical formulation development with optimal physicochemical properties, physical stability and biological activity on HK2 cells.Fil: Martín Giménez, Virna Margarita. Universidad Católica de Cuyo - Sede San Juan; ArgentinaFil: Russo, Marcos Guillermo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Investigaciones en Tecnología Química. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Investigaciones en Tecnología Química; ArgentinaFil: Narda, Griselda Edith. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Investigaciones en Tecnología Química. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Investigaciones en Tecnología Química; ArgentinaFil: Fuentes, Lucía B.. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Mazzei, Luciana Jorgelina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Gamarra Luques, Carlos Diego. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; ArgentinaFil: Kassuha, Diego Enrique. Universidad Católica de Cuyo - Sede San Juan; ArgentinaFil: Manucha, Walter Ariel Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; Argentin

Estudio sobre Interacción WT-1/óxido nítrico en nefropatía obstructiva: Implicancias del factor de transcripción WT-1 en el desarrollo y/o mantenimiento de la enfermedad renal

La enfermedad renal tiene a nivel mundial una elevada incidencia, siendo de mayor gravedad en niños, y donde la nefropatía obstructiva es uno de los desórdenes renales más complejos de tratar debido al severo cuadro inflamatorio, oxidativo, apoptosis y fibrosis. Por otro lado, se inducen mecanismos compensadores como la proteína chaperona Hsp70. De interés, se altera el desarrollo renal por cambios en la expresión del gen WT-1 y pérdida de la función. Los antecedentes sugieren una posible regulación mediada por el óxido nítrico (NO). Por ello, se planteó estudiar la posible regulación WT-1, NO y Hsp70 durante la nefropatía por obstrucción. Para destacar de nuestros principales resultados fue que la mayor biodisponibilidad del NO se correspondió con una significativa mejoría de marcadores bioquímicos y moleculares de fibrosis, apoptosis y funcionalidad renal. Finalmente, la concreción de nuestros objetivos y su contribución a la hipótesis central, podrían tener consecuencias atractivas sobre el diseño de nuevas estrategias para el tratamiento de la enfermedad renal así también como para otras patologías inflamatorias relacionadas.Fil: Manucha, Walter Ariel Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Mazzei, Luciana Jorgelina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentin

Growing evidence suggests WT1 effects in the kidney development are modulated by Hsp70/NO interaction

The study of kidney development at the cellular and molecular levels remains an active area of nephrology research. The functional integrity of the kidney depends on normal development as well as on physiological cell turnover. Apoptosis induction is essential for these mechanisms. A route to cell death revealed in the past decade shows that heat shock proteins (HSPs) and their cofactors are responsible for regulating the apoptotic pathway. Specifically, heat shock protein 70 (Hsp70), the most ubiquitous and highly conserved HSP, helps proteins adopt native conformation or regain function after misfolding. Hsp70 is an important cofactor for the function of Wilms’ tumour 1 (WT1) and suggests a potential role for this chaperone during kidney differentiation. In addition, we have demonstrated that WT1 expression is modulated by nitric oxide (NO) availability and Hsp70 interaction after neonatal unilateral ureteral obstruction. NO has been identified as playing an important role in the developing kidney. These findings suggest that Hsp70 and NO may play a critical and fundamental role in the capacity to modulate both apoptotic pathway and oxidative stress during kidney development. Furthermore, the design of experimental protocols that assess renal epithelial functionality in this context, could contribute to the understanding of renal development and alterations.Fil: Mazzei, Luciana Jorgelina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Manucha, Walter Ariel Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; Argentin

Alterations on a key nephrogenic/cardiogenic gene expression linked to hypertension development

La hipertensión produce lesiones orgánicas específicas como daño renal/cardíaco, mientras que la enfermedad cardiovascular generalmente conduce a la hipertensión. Por ello, la hipertensión sería tanto una causa como una consecuencia de la enfermedad cardiovascular. Estudios previos refieren falta de óxido nítrico con anomalías cardiovasculares como hipertensión y reducción de las respuestas del factor hiperpolarizante derivado del endotelio. La falta de este gas también conduce a anomalías renales/cardíacas. Además, la deficiencia nefrogénicaes un factor de riesgo para la enfermedad renal. Así, alteraciones en WT-1, un factor nefrógeno clave, podrían contribuir al desarrollo de hipertensión. Finalmente, el conocimiento más profundo del complejo mecanismo etiopatogénico responsable de la enfermedad hipertensiva nos permitirá proponer nuevas herramientas terapéuticas.The elevation of blood pressure produces specific organic lesions, including kidney and cardiac damage. On the other hand, cardiovascular disease usually leads to the development of hypertension. Thus, hypertension could be both a cause and a consequence of cardiovascular disease. Previous studies linked the lack of nitric oxide to cardiovascular abnormalities, including hypertension, arteriosclerosis, myocardial infarction, cardiac hypertrophy, diastolic heart failure, and reduced endothelium-derived hyperpolarizing factor responses, with shorter survival. The lack of this gas also leads to renal/cardiac abnormalities. It is widely known that nephrogenic deficiency is a risk factor for kidney disease. Besides, recent evidence suggests that alterations in WT-1, a key nephrogenic factor, could contribute to the development of hypertension. Moreover, some genes involved in the development of hypertension depend on WT-1. This knowledge makes it essential to investigate and understand the mechanisms regulating the expression of these genes during renal/cardiac development, and hypertension. As a consequence, the most in-depth knowledge of the complex aetiopathogenic mechanism responsible for the hypertensive disease will allow us to propose novel therapeutic tools.Fil: Mazzei, Luciana Jorgelina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Patología; ArgentinaFil: Sanz, Raúl. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Patología; ArgentinaFil: Manucha, Walter Ariel Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Patología; Argentin

Implicaciones del factor de transcripción WT1 asociado al remodelado cardiaco patológico postinfarto miocárdico

Nuevos avances en el tratamiento del infarto agudo de miocardio involucran inéditas vías de senalización ˜ y progenie celular. En este sentido, la regeneración es una herramienta novedosa que contribuiría al remodelado ventricular fisiológico postinfarto. Más específicamente, la reexpresión del factor de transcripción WT1 en la pared miocárdica por isquemia e infarto se relacionaría con la invasión de células con la capacidad de regeneración. Este mecanismo parece no resultar suficiente para restituir completamente las células musculares y vasos perdidos. De especial interés, la presencia de la proteína de respuesta a golpe de calor 70 (Hsp70) y su interacción con el receptor de vitamina D modularían positivamente la expresión de WT1. En este contexto, se propone que la activación de los receptores de vitamina D asociados a Hsp70 podría favorecer el remodelado cardiaco fisiológico y reducir la progresión a insuficiencia cardiaca.New advances in the treatment of acute myocardial infarction involve novel signaling pathways and cellular progeny. In this sense, regeneration is a novel tool that would contribute to post-infarction physiological ventricular remodeling. More specifically, re-expression of the WT1 transcription factor in the myocardial wall by ischemia and infarction would be related to the invasion of cells with the capacity for regeneration. This mechanism seems not to be sufficient to restore muscle cells and lost vessels entirely. Of particular interest, the presence of the heat-shock response protein 70 (Hsp70) and its interaction with the vitamin D receptor would modulate the expression of WT1 positively. In this context, it is proposed that the activation of vitamin D receptors associated with Hsp70 could favor physiological cardiac remodeling and reduce the progression to heart failure.Fil: Sanz, Raul Lelio. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Mazzei, Luciana Jorgelina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Manucha, Walter Ariel Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas; Argentin