Effect of 24-epibrassinolide on lipoxygenase activity in maize seedlings under cold stress

Aim. To investigate 24-epibrassinolide influence on the maize seedlings 9- and 13-lipoxygenases activity (9- and 13-LOX) under normal conditions (25 oC) and cold stress (5 oC). Methods. LOX activity was measured after treatment of seedlings with 0.01 and 1 μM 24-epibrassinolide. The enzymes were extracted from maize seedlings with 0.1 M sodium acetate (pH 4.5) buffer, supplemented with a non-ionic detergent (0.1 % Brij-99) and EDTA (0.1 mM). The 9- and 13-LOX activities were determined spectrophotometrically at 234 nm using linoleic acid as substrate at pH 6.0 and 7.0 in the presence or absence of 0.02 % Lubrol PX. Results. 3-6-fold increase in LOX activity of 24-epibrassinolide-treated seedlings was demonstrated under normal conditions. Cold stress in the presence of 1µM 24-epibrassinolide enhances the activities of 9- and 13- LOX by 4 and 10 times, respectively. Conclusions. The results obtained enlarge our understanding of possible pathways of LOX metabolites involvement in the formation of cell response to brassinosteroids.Мета. Дослідження впливу 24-епібрассиноліду на активність 9- і 13-ліпоксигеназ (9- і 13-ЛОГ) з проростків кукурудзи за нормальних умов (25 C) та за дії низькотемпературного стресу (5 C). Методи. Активність ЛОГ визначали за умов обробки проростків 0,01 і 1 мкМ 24-епібрассинолідом. Ферменти екстрагували з проростків кукурудзи в 0,1 М натрій-ацетатному буфері (рН 4,5) за присутності неіонного детергенту (0,1 % Brij-99) та ЕДТА (0,1 мM). Активність 9- і 13-ЛОГ визначали спектрофотометрично при 234 нм з використанням лінолевої кислоти як субстрату при рН 6,0 і 7,0 за присутності та відсутності 0,02 % Lubrol РХ відповідно. Результати. Показано, що за нормальних умов в оброблених 24-епібрассинолідом проростках активність ЛОГ зростає у 3–6 разів. За дії низькотемпературного стресу за присутності 1 мкМ 24-епібрассиноліду активність 9- і 13-ЛОГ підвищувалася в 4 та 10 разів відповідно. Висновки. Одержані в роботі результати розширюють існуючі на сьогодні уявлення щодо можливого шляху залучення метаболітів ЛОГ до формування клітинної відповіді на дію брассиностероїдів.Цель. Исследование влияния 24-эпибрассинолида на активность 9- и 13-липоксигеназ (9- и 13-ЛОГ) из проростков кукурузы при нормальних условиях (25 C) и при действии низко-температурного стресса (5 C). Методы. Активность ЛОГ измеряли после обработки проростков 0,01 и 1 мкМ 24-эпибрассинолидом. Ферменты экстрагировали из проростков кукурузы в 0,1 М натрий-ацетатном буфере (рН 4,5) в присутствии неионного детергента (0,1% Brij-99) и ЭДТА (0,1 мM). Активность ЛОГ определяли спектрофотометрически при 234 нм с использованием линолевой кислоты в качестве субстрата (рН. 6,0 и 7,0) в присутствии и в отсутствие 0,02 % Lubrol РХ соответственно. Результаты. Показано, что в нормальных условиях в обработанных 24-эпибрассинолидом проростках активность ЛОГ возрастает в 3–6 раз. При действии низкотемпературного стресса в присутствии 1 мкM 24-эпибрассинолида активность 9- и 13-ЛОГ увеличивается в 4 и 10 раз соответственно. Выводы. Полученные в настоящей работе результаты расширяют существующие на сегодня представления о возможном пути вовлечения метаболитов ЛОГ в формирование клеточного ответа на действие брассиностероидов

Japanese aggression in Manchuria in the autumn of 1931 and the reaction of the international community

Начавшаяся в сентябре 1931 г. японская агрессия в Маньчжурии вызвала серьёзную обеспокоенность как великих держав ‒ США, Англии, Франции, СССР, так и Лиги Наций. Однако приоритет собственных интересов и различного рода разногласия между ними не позволили принять эффективные меры пресечения агрессии и помощи её жертве ‒ Китаю. Began in September 1931 Japanese aggression in Manchuria caused a serious concern of the great powers ‒ the US, Britain, France, Soviet Union, and the League of Nations. However, the priority of their own interests and various differences between them did not allow to take effective measures to curb aggression and help the victim to China

Design and studies of novel polyoxysterol-based porphyrin conjugates

New types of steroid-porphyrin conjugates derived from 20-hydroxyecdysone (20E) and 24-epibrassinolide (EBl) were synthesized. An exceptional regioselectivity in the reaction of both steroids with porphyrin boronic acids was found to give side-chain-conjugated boronic esters as sole products. UV–Vis-, fluorescence and NMR spectroscopy yielded similar data for all the studied compounds confirming the solvent driven supramolecular assembly with formation of J-aggregates. CD measurements of water diluted solutions showed a clear difference between 20E and EBl conjugates. The latter showed a strong supramolecular chirality, whereas 20E J-aggregates did not

Influence of brassinosteroids on plant cell alternative respiration pathway and antioxidant systems activity under abiotic stress conditions

Aim. To investigate the brassinosteroids (BRs) influence on the plant alternative respiration pathway and antioxidant systems to regulate the ROS (reactive oxygen species) production under optimal and abiotic stress conditions. Methods. Respiration measurement experiments were done with the polarographic technique. Original methods were used to evaluate the antioxidant systems activity. Results. Treatment with BRs increased the inten- sity of plant alternative respiration pathway under control and stress conditions. BRs had no effect on alternative respiration of the BR-insensitive bri1–6 plants. Brassinosteroids also increased the activity of a range of antioxidant systems under osmotic stress. Conclusions. BRs are involved in the regulation of alternative respiration pathway and antioxidant systems activity in plant cells under optimal and abiotic stress conditions.Мета. Дослідити вплив брасиностероїдів (БС) на альтернативний шлях дихання рослин та антиоксидантні системи для регуляції процесів утворення активних форм кисню (АФК) за оптимальних і стресових умов. Методи. Інтенсивність дихання вимірювали методом полярографії. Активність антиоксидантних систем визначали оригінальними методами. Результати. Обробка БС підвищувала інтенсивність альтернативного шляху дихання рослин за оптимальних і стресових умов. БС не впливали на альтернативний шлях рослин bri1–6, нечутливих до дії БС. Брасиностероїди підвищували також активність низки антиоксидантних систем за умов осмотичного стресу. Висновки. БС залучені до регуляції альтернативного шляху дихання та активності антиоксидантних систем у клітинах рослин за контрольних умов та умов абіотичних стресів.Цель. Исследовать влияние брассиностеродиов (БС) на альтернативный путь дыхания растений и антиоксидантные системы для регуляции процессов образования активных форм кислорода (АФК) в оптимальных и стрессовых условиях. Методы. Интенсивность дыхания измеряли методом полярографии. Активность антиоксидантных систем определяли оригинальными методами. Результаты. Обработка БС повышала интенсивность альтернативного пути дыхания растений в контрольных и стрессовых условиях. БС не влияли на альтернативный путь дыхания растений bri1–6, нечувствительных к действию БС. Брассино-стероиды также повышали активность ряда антиоксидантных систем в условиях осмотического стресса. Выводы. БС вовлечены в регуляцию альтернативного пути дыхания и активности антиоксидантных систем клеток растений в контрольных условиях и в условиях абиотичесских стрессов

НОВЫЙ ПОДХОД К ИММУНОХИМИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ БРАССИНОСТЕРОИДОВ

For the first time, reagents have been synthesized and a technique has been developed for a lanthanide immunofluorometric assay of phytohormonal steroids of 24-epicastasterone and 24-epibrassinolide. A low-molecular-weight conjugate of the brassinosteroid and an Eu3+ complexonate was synthesized by the reaction of 24-epicastasterone-6-(O-carboxymethyl) oxime N-succinimide ester with the europium salt of the diethylenetriaminepentaacetic acid N1-(aminoethyl)amide. A protein conjugate with a high specific fluorescent activity was the product of a simultaneous acylation of primary amino groups in albumin with activated esters of carboxyl derivatives of 24-epicastasterone and an Eu3+ complexonate. Using the high-molecular weight conjugate in an immunochemical system, a linear relationship was obtained between a fluorescent signal of labeled 24-epiсastasterone bound to immobilized antibodies and 24-epibrassinolide concentration in the range of 1 to 300 nM.Впервые получены реагенты и разработана методика лантанидного иммунофлуориметрического анализа фитогормональных стероидов 24-эпикастастерона и 24-эпибрассинолида. В реакции N-сукцинимидного эфира 6-(О-карбоксиметил)оксима 24-эпикастастерона с европиевой солью N1-(аминоэтил)амида диэтилентриаминпентауксусной кислоты синтезирован низкомолекулярный конъюгат брассиностероид-комплексонат Eu3+. Продуктом одновременного ацилирования первичных аминогрупп полипептидной цепи альбумина активированными эфирами карбоксипроизводных 24-эпикастастерона и комплексоната Eu3+ является белковый конъюгат, обладающий высокой удельной флуоресцентной активностью. При использовании высокомолекулярного конъюгата в иммунохимической системе получена линейная зависимость флуоресцентного сигнала меченого 24-эпикастастерона, связанного с иммобилизованными антителами, от концентрации 24-эпибрассинолида (1–300 нМ) в растворе

Защитное действие салицилатов брассиностероидов на растения ярового ячменя, подвергнутые биотическому стрессу

In laboratory experiments, salicylates 24-epibrassinolide, 24-epicastasterone and the first synthesized 6-deoxo-24-epicastasterone salicylate act as inducers of plant immunity under biotic stress on the model phytopathosystem of barley-phytopathogenic fungus Helminthosporium teres Sacc. In small-scale field experiments, it was shown that the treatment of plants with brassinosteroid salicylates has a stimulating effect on the formation of protective physiological and biochemical reactions of plants. The most active protective effect exhibited salicylate 24-epibrassinolide.В лабораторных опытах выявлено, что салицилаты 24-эпибрассинолида, 24-эпикастастерона и впервые синтезированный салицилат 6-дезоксо-24-эпикастастерона улучшают посевные качества семян ярового ячменя и действуют как индукторы иммунитета растений в условиях биотического стресса. В мелкоделяночных опытах показано, что обработка растений салицилатами брассиностероидов в фазу выхода в трубку оказывает стимулирующее действие на формирование защитных физиолого-биохимических реакций растений. Наиболее активное защитное действие проявил салицилат 24-эпибрассинолида

Влияние брассиностероидов на развитие мицелия базидиального гриба Pleurotus ostreatusв

Experiments on the effect of brassinosteroids and their salicylates on the mycelium biomass during submerged cultivation of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) were carried out. It was shown that their addition to the nutrient medium at a concentration of 0.05 mg/l significantly increases the biomass of the mycelium. It was found that, when exposed to 24- epi- and 28-homocastasterone for 9 days, the mycelium colony developed only in the depths of the culture liquid, and the mycelium was formed into glomeruli with a dense structure. The use of salicylates 24-epicastasterone and 6-deoxo-24-epicastasterone promoted the development of an extensive colony of mycelium both on the surface and in the depth of the culture liquid. Salicylates also influenced the structure of the mycelium – the jellyfish-like loose mycelium was observed in flasks with a medium containing 24-epi and 6-deoxo-24-epicastasterone salicylates. For the first time, the determination of the content of endogenous brassinosteroids in the fruiting body and mycelium of P. ostreatus was carried out.Проведенные эксперименты при погруженном культивировании вешенки обыкновенной (Pleurotus ostreatus) показали, что добавление в питательную среду брассиностероидов и их производных в концентрации 0,05 мг/л значительно увеличивает биомассу мицелия. Установлено, что при использовании 24-эпи- и 28-гомокастастерона при выращивании вешенки в течение 9 суток колония мицелия развивалась только в глубине культуральной жидкости, а мицелий формировался в клубочки с плотной структурой. Добавление салицилатов 24-эпикастастерона и 6-дезоксо-24-эпикастастерона способствовало развитию обширной колонии мицелия как на поверхности, так и в глубине культуральной жидкости. Салицилаты оказывали влияние и на структуру мицелия – медузоподобный рыхлый мицелий наблюдали в колбах со средой, содержащей салицилаты 24-эпи- и 6-дезоксо-24-эпикастастерона. В работе впервые установлено наличие и проведено количественное определение содержания эндогенных брассиностероидов ряда брассинолида, 24-эпибрассинолида и 28-гомобрассинолида в плодовом теле и мицелии гриба вешенки обыкновенной

НАНОСТРУКТУРИРОВАННЫЕ КОМПЛЕКСЫ СТЕРОИДНОГО ФИТОГОРМОНА: НОВЫЙ ПОДХОД К ЗАЩИТЕ ОТ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

The in vitro study of the antiviral activity of the dextrin-24-epibrassinolide complex in chicken embryos was carried out. The complex was shown to have an inhibitory effect against the infectious laryngotracheitis virus.Проведено изучение антивирусной активности комплекса декстрин-24-эпибрассинолид на куриных эмбрионах in vitro. Показано, что данный комплекс является ингибитором вируса инфекционного ларинготрахеита птиц