COMPONENTES MOLECULARES ENVOLVIDOS NA CRIOPRESERVAÇÃO DO SÊMEN SUÍNO

Cryopreservation induces structural and functional changes in the spermatozoa, which may vary between animals of the same species, even when their semen is subjected to the same cryopreservation protocol. This feature leads some studies to question the semen protein composition and its influence on sperm protection in relation to the thermal shock. S wine seminal plasma presents predominance of spermadesins, which are low molecular weight proteins and present a protective function of the plasmatic membrane. Cryopreservation is the most efficient method for long-term sperm conservation. However, the use of frozen semen in swine species is still associated with low productive indexes because the cryopreservation process causes several damages to the spermatozoid. Studies have been carried out with the purpose of identifying specific causes of this damage in order to promote a better protection of the cryopreserved spermatozoa. In this way, the present work aimed to address the main molecular components of semen that are involved in the cryopreservation process.A criopreservação induz mudanças estruturais e funcionais nos espermatozoides, que podem variar entre animais da mesma espécie, mesmo quando o sêmen deles é submetido ao mesmo protocolo de criopreservação. Essa característica leva alguns estudos a questionarem quanto à composição protéica do sêmen e sua influência na proteção espermática, em relação ao choque térmico. O plasma seminal de suínos apresenta predominância de espermadesinas, que são proteínas de baixo peso molecular e apresentam função de proteção da membrana plasmática. A criopreservação é o método mais eficiente para a conservação de espermatozoides a longo prazo. No entanto, o uso do sêmen congelado na espécie suína ainda está associado a baixos índices produtivos, pois o processo de criopreservação ocasiona diversos danos ao espermatozoide. Estudos têm sido realizados com a finalidade de identificar as causas específicas desses danos, a fim de promover uma melhor proteção ao espermatozoide criopreservado. Dessa forma, o presente trabalho tem como objetivo abordar os principais componentes moleculares do sêmen, que estão envolvidos no processo de criopreservação

CRIOPRESERVAÇÃO E CRIOPROTETORES NA PROTEÇÃO DO ESPERMATOZOIDE SUÍNO

The use of frozen semen presents lower conception rates and fewer piglets born per birth. This is due to the fact that cryopreservation causes variations in temperature, changes in sperm permeability and oxidative processes, and the swine semen naturally presents low antioxidant capacity and undergoes oxidative stress. However, several cryoprotectants are used for several species, and the use of cyclodextrin and amino acid-loaded cholesterol is already described, aiming to improve the semen after thawing. The addition of cholesterol to the semen prior to cryopreservation maintains the integrity of the acrosomal membrane and slows sperm capacitation, which can be facilitated by cyclodextrin loading. In parallel, research indicates the importance of the use of amino acids in the semen, which form a layer of thermal protection that preserves the integrity of the sperm cell, in addition to presenting osmorregulatory function. In this sense, the viability of the cryopreservation of the swine semen favors the genetic improvement, minimizes the transmission of pathogens and allows the formation of a germplasm bank. Therefore, it is necessary to improve the use of cryoprotectants in an ideal proportion, which maintains the integrity of the sperm membrane and does not detract from the sperm capacitation and acrosomal reaction required for fertilization.O uso de sêmen congelado apresenta menores índices de concepção e menor número de leitões nascidos por parto. Isso ocorre porque a criopreservação acarreta variações de temperatura, alteração da permeabilidade espermática e processos oxidativos, sendo que o sêmen suíno apresenta, naturalmente, baixa capacidade antioxidante e sofre estresse oxidativo. No entanto, vários crioprotetores são utilizados para diversas espécies e já é descrito o uso de colesterol, carreado com ciclodextrina, e de aminoácidos, visando a melhoria do sêmen após o descongelamento. A adição de colesterol ao sêmen, previamente à criopreservação, mantém a integridade da membrana acrossomal e retarda a capacitação espermática, feito que pode ser facilitado com o carreamento por ciclodextrina. Em paralelo, pesquisas apontam a importância do uso de aminoácidos no sêmen, que formam uma camada de proteção térmica que preserva a integridade da célula espermática, além de apresentarem função osmorregulativa. Nesse sentido, a viabilização da criopreservação do sêmen suíno favorece o melhoramento genético, minimiza a transmissão de patógenos e possibilita a formação de um banco de germoplasma. Para tanto, faz-se necessário o aprimoramento do uso de crioprotetores em uma proporção ideal, que mantenha a integridade da membrana espermática e não prejudique a capacitação espermática e a reação acrossomal, necessárias para a fecundação

PARÂMETROS ESPERMÁTICOS DO SÊMEN SUÍNO CONSERVADO A 10 E 17 0C, EM DILUENTES COMERCIAIS E ALTERNATIVOS

The use of suitable extenders is important to artificial insemination success. Therefore, the objective of this study was to evaluate the efficiency of extenders at different temperatures. The following extenders were used: Beltsville Thawing Solution (BTS); TRIS (Tris-hidroximetil-aminometano - H2NC(CH2OH)3); TRIS + egg yolk (TGO), and skim powdered milk (SPM). Fifty ejaculates were analyzed regarding sperm vigor, motility, membrane functionality, and mitochondrial activity. The TGO and SPM extenders maintained the highest values for vigor and motility at 10 °C, in comparison to the other treatments (p<0.05). At 17 °C, these extenders showed better results of vigor and motility compared to the others, only until D1 (p<0.05). From D2, BTS proved to be the best extender to preserve these characteristics. A higher percentage of sperm with a functional membrane was observed for TGO at 10 °C, followed by SPM, BTS, and TRIS (p<0.05). At 17 °C, BTS maintained this characteristic, except for DO, which showed better results for TGO and SPM. Regarding the mitochondrial activity, higher values were observed at 10 °C for TGO on all days of analysis and D0 at a temperature of 17 °C. The extender TRIS + egg yolk was shown as an alternative for the conservation of swine semen at 10 °C, as well as the SPM. In addition, these same extenders are alternatives for short-term conservation at 17 °C.O uso de diluentes adequados é importante para o sucesso da inseminação artificial. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência de diluentes em diferentes temperaturas. Foram utilizados os seguintes diluentes: Beltsville Thwaing Solution (BTS); TRIS (Tris-hidroximetil-aminometano - H2NC(CH2OH)3); TRIS + gema de ovo (TGO) e Leite em pó desnatado (LPD). Cinquenta ejaculados foram analisados quanto ao vigor, à motilidade, à funcionalidade de membrana e à atividade mitocondrial. Os diluentes TGO e LPD mantiveram os maiores valores para vigor e motilidade a 10 °C, em comparação aos demais tratamentos (p<0,05). A 17 °C, esses diluentes apresentaram resultados melhores de vigor e motilidade em relação aos demais, somente até D1 (p<0,05). A partir de D2, o BTS mostrou-se como o melhor diluente para a preservação dessas características. Maior percentual de espermatozoides com membrana funcional foi observado no TGO a 10 °C, seguido do LPD, BTS e TRIS (p<0,05). A 17 °C, o BTS manteve essa característica, exceto em D0, em que o TGO e o LPD apresentaram melhores resultados. Quanto a atividade mitocondrial, maiores valores foram observados a 10 °C no TGO em todos os dias de análise e em D0 à temperatura de 17 °C. O diluente TRIS + gema de ovo mostrou-se como uma alternativa para conservação do sêmen suíno a 10 °C, assim como o LPD. Além disso, esses mesmos diluentes constituem alternativas para conservação a curto prazo a 17 °C

CARACTERIZAÇÃO DO PERFIL PROTEÔMICO DO SÊMEN SUÍNO E SUA RELAÇÃO COM A CONGELABILIDADE

Cryopreserved swine semen has limited commercial use due to the loss of sperm quality that occurs during the freezing and thawing processes. The porcine sperm cell has peculiarities that contribute to high sensitivity to low temperatures, such as the structure and composition of the plasma membrane. In addition, recent studies point to the relationship between the presence of proteins at the level of sperm membrane and seminal plasma with the cryotolerance of sperm cells. Therefore, this review addresses the intimate relationship between the protein profile of the semen and its freezability. The freezability of the semen can vary from animal to animal and even between ejaculations of the same boar. Research has identified several proteins that appear in higher concentrations in semen with high freezability. The proteomics technique has a great potential linked to reproduction and can be used to identify fertility markers or ejaculates suitable for the freezing / thawing process, thus avoiding expenses, be they for the maintenance of boar with low quality semen for freezing or semen processing for cryopreservation.O sêmen suíno criopreservado possui emprego comercial limitado devido à perda de qualidade espermática, que ocorre durante o processo de congelação e de descongelação. A célula espermática suína possui peculiaridades que contribuem para esta alta sensibilidade às baixas temperaturas, tais como estrutura e composição da membrana plasmática. Além disso, estudos recentes apontam a relação da presença de proteínas a nível de membrana espermática e de plasma seminal, com a criotolerância das células espermáticas. Portanto, esta revisão faz uma abordagem sobre a íntima relação entre o perfil protéico do sêmen e a sua congelabilidade, característica do sêmen, que pode variar de animal para animal e até entre ejaculados de um mesmo varrão. Pesquisas têm identificados diversas proteínas, que aparecem em maiores concentrações no sêmen de alta congelabilidade. A técnica de proteômica apresenta um grande potencial ligado à reprodução, podendo ser utilizada na identificação de marcadores de fertilidade ou de ejaculados aptos ao processo de congelação/descongelação, evitando, assim, gastos, sejam eles de manutenção de reprodutores com sêmen de baixa qualidade para a congelação ou de processamento do sêmen para criopreservação

USO DE PLACA AQUECEDORA VISANDO A INCUBAÇÃO DO ESPERMATOZOIDE OVINO APÓS CRIOPRESERVAÇÃO

The objective was to evaluate the use of the hot plate to replace the water bath in the thermo resistance test of ovine sperm after cryopreservation. Ten ejaculates were also collected from three adult sheep (n=30), by means of artificial sheep vagina. The collected samples were diluted in Tris-Egg Yolk, at a final concentration of 200 x106 sptz/mL and subjected to a cooling curve for subsequent cryopreservation in liquid nitrogen straws. Immediately after thawing, the samples were analyzed for membrane and acrosome integrity, and mitochondrial activity. The semen was then divided into two tubes and submitted to TTR, one in a water bath and the other in a hot plate, and evaluated every 30 minutes, from time zero (post-thaw) until 90 minutes of incubation at 37 °C, for sperm motility and progressive motility. The variables were subjected to analysis of variance and the means were compared using the Tukey test at 5% probability. After the freeze/thawing process, sperm showed a low percentage of membrane integrity, high percentage of mitochondrial activity, in addition to maintaining the integrity of acrossome. No difference was observed in sperm motility nor progressive motility, along the TTR, when comparing the sperm that were incubated in a water bath in relation to those incubated in a hot plate during the period of 90 minutes. The heating plate can be used as a means of incubating sheep sperm in replacement of the water bath.Objetivou-se avaliar a utilização da placa aquecedora, em substituição ao banho-maria, no teste de termorresistência (TTR) de espermatozoides de carneiros após a criopreservação. Foram coletados 10 ejaculados de três carneiros adultos (n=30), por meio de vagina artificial para ovinos. Em seguida, foram diluídos em Tris-Gema de ovo, a uma concentração final de 200 x106 sptz/mL, e submetidos á curva de resfriamento, para posterior criopreservação em palhetas em nitrogênio líquido. Após descongelação, as amostras foram analisadas quanto à integridade de membrana, de acrossoma e atividade mitocondrial. O sêmen então foi dividido em dois tubos e submetido ao TTR, um em banho-maria e outro em placa aquecedora, e, ainda, avaliado a cada 30 minutos, do tempo zero (pós-descongelação) até 90 minutos de incubação, a 37 °C, quanto à motilidade espermática e à motilidade progressiva. As variáveis foram submetidas à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Após o processo de congelação/descongelação, os espermatozoides apresentaram baixo percentual de integridade de membrana e elevado percentual de atividade mitocondrial e integridade do acrossoma. Não foi observada diferença na motilidade espermática nem na motilidade progressiva ao longo do TTR, quando comparados os espermatozoides que foram incubados em banho-maria aos incubados em placa aquecedora durante o período de 90 minutos. A placa aquecedora pode ser utilizada como meio de incubação dos espermatozoides de carneiros em substituição ao banho-maria

LINFOMA EM BOVINO ABATIDO EM ABATEDOURO FRIGORÍFICO SOB SERVIÇO DE INSPEÇÃO FEDERAL

Bovine lymphosarcoma, also known as malignant lymphoma and bovine leukemia, is a lymphoid neoplasm that affects adult animals, evolving in an enzootic way. This work reports a case of bovine lymphoma in an animal slaughtered in a slaughterhouse with a Federal Inspection Service (SIF) in the state of Maranhão. The animal presented post-mortem signs that are compatible with the disease, such as: generalized enlargement of lymph nodes in different regions, accompanied by a loss in the morphological pattern, making it impossible to distinguish the cortex and spinal cord. In the histopathological examination, histopathology showed evidence of infiltration of round neoplastic cells in the lymph node parenchyma. The histological changes associated with multicentric lesions and characteristics of the animal (adult) suggest an infectious etiology associated with the Bovine Leukemia Virus (bovine enzootic leukosis) allowing the diagnosis of Bovine Lymphoma.O linfoma maligno bovino, também conhecido por linfossarcoma ou leucemia bovina, é uma neoplasia linfóide que acomete preferencialmente animais adultos, evoluindo de forma enzoótica. Esse trabalho teve como objetivo relatar um caso de linfoma bovino em um animal abatido em abatedouro frigorifico sob Serviço de Inspeção Federal (SIF) no estado do Maranhão. O animal apresentava, no post-mortem, lesões compatíveis com a enfermidade, como: aumento generalizado dos linfonodos de diferentes regiões, acompanhado de perda no padrão morfológico, não sendo possível a distinção do córtex e da medula. No exame histopatológico, foi evidenciada a infiltração de células neoplásicas redondas no parênquima do nodo linfático. As alterações histológicas associadas as lesões multicêntricas e características do animal (adulto) sugerem etiologia infecciosa associada ao Vírus da Leucemia Bovina (leucose enzoótica bovina) permitindo o diagnóstico de Linfoma Bovino

Análise de condenações de carcaça ao abate de suínos em abatedouros frigoríficos brasileiros registrados no serviço brasileiro de inspeção federal entre 2012 e 2017

A inspeção post mortem realizada macroscopicamente no processo de abate de suínos resguarda a saúde humana diante da transformação de um animal em carne, mas para que ela seja realizada em sua plenitude é necessário ser avaliada e reavaliada na tentativa de equilibrar economia no processamento da carne e segurança alimentar. Esse binômio deve se corresponder para viabilizar a produção de carne suína e seu acesso é a inspeção post mortem. Diante disso, este estudo tem objetivo de avaliar o Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal (SIGSIF) quanto às causas de condenação de carcaças em matadouros-frigoríficos de suínos registrados e as peculiaridades de sazonalidade e regiões

DIFERENTES CONCENTRAÇÕES ANTIBIÓTICAS ADICIONADAS AO DILUENTE DE SÊMEN SUÍNO

Due to bacterial contamination, antibiotics are used in semen extenders to inhibit bacterial growth during storage. Thus, the present study aimed to determine the toxicity limit of different antibiotic concentrations of penicillin/streptomycin added to the semen extender and investigate the influence on sperm motility. For this purpose, semen from five commercial hybrid breeders was collected once a week for 9 weeks, using the gloved hand technique. Each ejaculate was distributed equally among all treatments, which consisted of different concentrations of antibiotic solution: T1 = 0.0g/L (control); T2 = 4.2g/L; T3 = 12.6g/L. The semen diluted in powdered coconut water (ACP-103@) was kept for 5 days and analyzed on the following days: D0 (collection day), D2, and D4 (last conservation day) for sperm vigor and motility. In D0, the semen preserved in the diluent added with 12.6 g of antibiotic solution showed a lower sperm vigor value compared to the other treatments (p<0.05). In D2 and D4, treatments containing antibiotics presented vigor results below those obtained in the control group (p<0.05). Regarding sperm motility, higher percentages of mobile cells were observed in semen samples conserved in ACP 0.0 g/L (control) when compared to the other treatments (p<0.05). It is concluded that the antibiotic concentrations used in the study (4.2 and 12.6 g/L) showed toxic effects soon after the swine semen, negatively affecting seminal parameters during storage at 17 °C.Devido a contaminação bacteriana, utiliza-se antibióticos nos diluentes de sêmen para inibir o crescimento bacteriano durante a sua estocagem. Assim, este trabalho teve por objetivo determinar o limite de toxicidade de diferentes concentrações antibióticas da penicilina/estreptomicina adicionadas ao meio diluente do sêmen e investigar a influência sobre a motilidade espermática. Para isso, o sêmen de cinco reprodutores híbridos comerciais foi coletado uma vez por semana, durante nove semanas, através da técnica da mão enluvada. Cada ejaculado foi distribuído de forma igual entre todos os tratamentos, que consistiram em diferentes concentrações de solução de antibióticos, sendo: T1 = 0,0g/L (controle); T2 = 4,2g/L; e T3 = 12,6g/L. O sêmen diluído em água de coco em pó (ACP-103@) foi conservado por cinco dias e analisado nos dias: D0 (dia da coleta), D2 e D4 (último dia de conservação) quanto ao vigor e à motilidade espermática. Em D0, o sêmen conservado em diluente acrescido de 12,6g de solução antibiótica apresentou menor valor de vigor espermático em relação aos demais tratamentos (p<0,05). Já em D2 e D4, os tratamentos contendo antibióticos apresentaram resultados de vigor aquém dos obtidos no grupo controle (p<0,05). Em relação à motilidade espermática, os maiores percentuais de células móveis foram observados nas amostras de sêmen conservadas em ACP 0,0g/L (controle) quando comparados aos demais tratamentos (p<0,05). Conclui-se que as concentrações antibióticas utilizadas no estudo (4,2 e 12,6 g/L) mostraram efeitos tóxicos logo após a diluição do sêmen suíno, afetando de forma negativa parâmetros seminais durante a conservação a 17 °C

Aerossaculite fúngica em frangos de corte: Relato de caso

This work aims to report a case of aspergillosis in 49-day-old broilers. The case occurred in a commercial broiler farm of multiple ages located in the metropolitan region of Fortaleza. Respiratory problems, unresponsive to antibiotics were observed in broilers during the rearing period. Given the high morbidity and mortality, birds were taken for necropsy, 10 birds with recent death and 5 birds with respiratory symptoms were sacrificed. At necropsy, discharge and a yellowish nodular focal area in the nasal cavity, opacity and thickening of air sacs and presence of yellowish caseous material were observed. Histopathological examination revealed a multifocal infiltration of histiocytes and heterophils in the submucosa, in addition to foci of epithelial necrosis. In the air sacs, foci of histiocytic infiltration were observed, some associated with a central area of necrosis containing negative images of hyphae (compatible with Aspergillus sp.). In view of the association of the birds' respiratory condition with the necropsy and histopathological findings, granulomatous airsacculitis associated with fungal hyphae was diagnosed, suggestive of aspergillosis.Este trabalho tem o objetivo de relatar um caso de aspergilose em frangos de corte com 49 dias de idade. O caso ocorreu em uma granja comercial de frangos de corte de múltiplas idades localizadas na região metropolitana de Fortaleza. Problemas respiratórios, pouco responsivos a antibióticos, foram observados em frangos de corte durante o período de criação. Diante da elevada morbidade e mortalidade, aves foram tomadas para necropsia, 10 aves com morte recente e 5 aves apresentando sintomas respiratórios foram sacrificadas. Na necropsia observou-se corrimento e área focal nodular amarelada na cavidade nasal, opacidade e espessamento de sacos aéreos e presença de material caseoso amarelado. O exame histopatológico revelou uma infiltração multifocal de histiócitos e heterófilos na submucosa, além de focos de necrose do epitélio. Nos sacos aéreos observou-se focos de infiltração histiocitária, alguns associados com área central de necrose contendo imagens negativas de hifas (compatíveis com Aspergillus sp.). Diante da associação do quadro respiratório das aves aos achados de necropsia e histopatológico, diagnosticou-se o quadro de aerossaculite granulomatosa associada a hifas fúngicas, sugestivo de aspergilose

Anacardato de cálcio como promotor de crescimento para leitões na fase de creche

The objective of this work was to evaluate the effects of the dietary inclusion of calcium anacardate on the performance, diarrhea incidence, blood parameters, intestinal morphometry, and pH of gastrointestinal contents in piglets from 21 to 42 days of age. Sixty weaned Topigs piglets, with initial weight of 6.049±0.311 kg, were distributed in the following treatments: diet with or without antibiotic growth promoter (zinc bacitracin) and diets supplemented with increasing levels of calcium anacardate (0.4, 0.8, and 1.2%), with six replicates and two animals per experimental unit. No differences in performance (21 to 42 days of age), blood parameters, and villus height:crypt depth ratio were found between piglets fed diets containing calcium anacardate or antibiotic growth promoter. The replacement of the antibiotic growth promoter zinc bacitracin by calcium anacardate results in similar performance in piglets from 21 to 42 days of age, without changes in blood parameters and in the villus height:crypt depth ratio. The dietary inclusion of calcium anacardate does not decrease diarrhea incidence compared with the antibiotic zinc bacitracin.O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da inclusão do anacardato de cálcio em rações para leitões, dos 21 aos 42 dias de idade, sobre desempenho, ocorrência de diarreia, parâmetros sanguíneos, morfometria intestinal e pH dos conteúdos gastrintestinais. Foram avaliados 60 leitões desmamados da linhagem comercial Topigs, com peso inicial de 6,049±0,311 kg, distribuídos entre os seguintes tratamentos: rações com ou sem antibiótico promotor de crescimento (bacitracina de zinco) e rações contendo doses crescentes de anacardato de cálcio (0,4, 0,8 e 1,2%), com seis repetições e dois animais por unidade experimental. Não foram observadas diferenças no desempenho (21 a 42 dias de idade), nos parâmetros sanguíneos e na relação altura de vilosidade/profundidade de cripta entre leitões que receberam ração contendo anacardato de cálcio ou antibiótico promotor de crescimento. A substituição de antibiótico promotor de crescimento bacitracina de zinco pelo anacardato de cálcio resulta em desempenho semelhante de leitões dos 21 aos 42 dias de idade, e não altera os parâmetros sanguíneos e a relação altura de vilosidade/profundidade de cripta. A inclusão de anacardato de cálcio na ração não diminui a ocorrência de diarreia em comparação ao antibiótico bacitracina de zinco