Entwicklung einer Screeningmethode in Mikrotiterplatten für Produkt-Vektor-Stamm-Kombinationen unter Berücksichtigung von drei Proteinen unterschiedlichen Molekulargewichts

In dieser Arbeit soll eine Screeningmethode in Mikrotiterplatten entwickelt werden, mit der die Möglichkeit besteht, viele verschiedene Produkt-Vektor-Stamm-Kombinationen sehr rationell zu testen. Dafür werden die drei Proteine unterschiedlichen Molekulargewichtes in jeweils drei Vektoren kloniert und in je sechs Stämme transformiert. Anschließend soll pro Produkt ein “Best-Off-Candidate“ identifiziert werden. Dieses Screening in Mikrotiterplatten stellt im Vergleich zu Versuchen im Schüttelkolben einen viel geringeren Arbeitsaufwand dar und ist daher deutlich lukrativer für ein kommerziell arbeitendes Unternehmen

Synthetic analogs of an Entamoeba histolytica glycolipid designed to combat intracellular Leishmania infection

Intracellular pathogens belonging to the genus Leishmania have developed effective strategies that enable them to survive within host immune cells. Immunostimulatory compounds that counteract such immunological escape mechanisms represent promising treatment options for diseases. Here, we demonstrate that a lipopeptidephosphoglycan (LPPG) isolated from the membrane of a protozoan parasite, Entamoeba histolytica (Eh), shows considerable immunostimulatory effects targeted against Leishmania (L.) major, a representative species responsible for cutaneous leishmaniasis (CL). Treatment led to a marked reduction in the number of intracellular Leishmania parasites in vitro, and ameliorated CL in a mouse model. We next designed and synthesized analogs of the phosphatidylinositol anchors harbored by EhLPPG; two of these analogs reproduced the anti-leishmanial activity of the native compound by inducing production of pro-inflammatory cytokines. The use of such compounds, either alone or as a supportive option, might improve the currently unsatisfactory treatment of CL and other diseases caused by pathogen-manipulated immune responses